細胞培養(yǎng)基的種類按照細胞培養(yǎng)基的發(fā)展歷史,細胞培養(yǎng)基大致可分為平衡鹽溶液、天然細胞培養(yǎng)基、合成細胞培養(yǎng)基、無血清細胞培養(yǎng)基、限定化學成分細胞培養(yǎng)基等幾大種類。(balancedsaltsolution,BSS)BSS主要是由無機鹽、葡萄糖組成,它的作用是維持細胞滲透壓平衡,保持pH穩(wěn)定及提供簡單的營養(yǎng)。其主要用于細胞的漂洗、配制其他試劑等。幾種常用的BSS配方如下(表1-1)。D-Hank's與Hank's的一個主要區(qū)別是前者不含有Ca2+和Mg2+,因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。因為Ca2+、Mg2+是細胞膜的重要組成成份,參與細胞粘附等功能,使用不含Ca2+、Mg2+的BSS可避免細胞結團。此外,Hanks液和Earle液是常用的BSS基礎溶液,前者緩沖能力較弱,適合于密閉培養(yǎng);后者緩沖能力較強,適合于5%CO2的培養(yǎng)條件。表1-1幾種常用的BSS配方(g/L)天然培養(yǎng)基指來自動物體液或利用**分離提取的一類培養(yǎng)基,如血漿、血清、***、雞胚浸出液等。其***是營養(yǎng)成分豐富,培養(yǎng)效果良好,但缺點是成分復雜,來源受限且制作過程復雜、批間差異大。目前***使用的天然培養(yǎng)基是血清,另外各種**提取液、促進細胞貼壁的膠原類物質在培養(yǎng)某些特殊細胞也是必不可少。DMEM高糖培養(yǎng)基可以改善細胞的生長環(huán)境。天津無血清細胞培養(yǎng)基報價
無血清培養(yǎng)基,一般是在合成培養(yǎng)基的基礎上,加入成份完全明確的或部分明確的血清替代成份,達到既能滿足動物細胞培養(yǎng)的要求,又能有效克服使用血清所帶來問題的目的。無血清培養(yǎng)基中通常需要添加一些額外的組分,才能幫助細胞貼壁生長,包括以下幾大類物質:1)促貼壁物質:一般為細胞外基質,如纖連蛋白、層粘連蛋白等。它們還是重要的分裂素以及維持正常細胞功能的分化因子,對許多細胞的繁殖和分化,起著重要作用。纖連蛋白主要促進來自中胚層細胞的貼壁與分化,這些細胞包括成纖維細胞、肉*細胞、粒細胞、腎上皮細胞、腎上腺皮質細胞、CHO細胞、成肌細胞等。2)促生長因子及***:針對不同細胞添加不同的生長因子。***也是刺激細胞生長、維持細胞功能的重要物質,有些***是許多細胞必不可少的,如胰島素。3)酶**劑:培養(yǎng)貼壁生長的細胞,需要用胰酶消化傳代,在無血清培養(yǎng)基中需含酶**劑,以終止酶的消化作用,達到保護細胞的目的。**常用的是大豆胰酶**劑。4)結合蛋白和轉運蛋白:常見如轉鐵蛋白和牛血清白蛋白。牛血清白蛋白的添加量比較大,可增加培養(yǎng)基的粘度,保護細胞免受機械損傷。許多旋轉式培養(yǎng)的無血清培養(yǎng)基都含有牛血清白蛋白。中國臺灣MEM細胞培養(yǎng)基供應商家DMEM高糖培養(yǎng)基在生物醫(yī)學研究中有重要應用。
細胞培養(yǎng)基的類型:基礎培養(yǎng)基:如DMEM(Dulbecco's Modified Eagle's Medium)和RPMI 1640,用于不同類型的細胞培養(yǎng)。DMEM:含有較高濃度的葡萄糖(如4500mg/L)、氨基酸、維生素和微量元素等營養(yǎng)物質,適用于多種哺乳動物細胞系的培養(yǎng)。RPMI 1640:含有較低濃度的葡萄糖(如2000mg/L),適用于淋巴細胞、骨髓細胞、白血病細胞等多種類型的哺乳動物細胞系的培養(yǎng)。減血清培養(yǎng)基:通過高濃度營養(yǎng)物質和特定因子減少對血清的依賴,降低實驗變異性。無血清培養(yǎng)基:完全用特定營養(yǎng)和生長因子配方替代血清,適用于需要高度控制的研究,如重組蛋白和病毒載體的生產。
早開發(fā)的基礎培養(yǎng)基(minimalessentialmedium,MEM),其本質為含有鹽、氨基酸、維生素和其他必需營養(yǎng)物的pH緩沖的等滲混合物。在此基礎上,DMEM、IMDM、HAMF12、PRMI1640等各種合成細胞培養(yǎng)基被不斷開發(fā)出來。常用合成培養(yǎng)基的配方此處不詳細介紹,其特性及應用的范圍見表1-2。表1-2常用合成培養(yǎng)基的特性及應用的范圍培養(yǎng)基名稱特性及應用范圍199細胞培養(yǎng)基添加適量的血清后,可***用于多種細胞培養(yǎng),并用于**學、*苗生產等。MEM細胞培養(yǎng)基MEM(MinimalEssentialMedium)培養(yǎng)基有含Earle's平衡鹽的類型,也有含Hanks'平衡鹽的類型;有高壓**型的,也有過濾**型的;還有含非必需氨基酸的類型。是**基本、適用范圍**廣的細胞培養(yǎng)基。DMEM細胞培養(yǎng)基DMEM(Dulbecco’smodifiedMinimalEssentialMedium)是由Dulbecco在MEM培養(yǎng)基的基礎上改良獲得的,各成分份量加倍,分低糖(1000mg/L)、高糖(4500mg/L)兩種類型。細胞生長快。附著稍差的腫*細胞、克隆培養(yǎng)用高糖效果較好,常用于雜交*的骨髓*細胞和DNA轉染的轉化細胞培養(yǎng)。IMDM細胞培養(yǎng)基IMDM(Iscove’smodifiedDMEM)是由Iscove在DMEM基礎上改良,增加了幾種氨基酸和胱氨酸量等??捎糜陔s交*細胞培養(yǎng)。 MEM培養(yǎng)基含有多種必需氨基酸和維生素,適合細胞培養(yǎng)。
選擇合適的細胞系和培養(yǎng)基配方是實驗成功的關鍵。不同的細胞系有不同的培養(yǎng)需求,例如,人類和哺乳動物細胞通常在36°C至37°C的溫度下生長,而昆蟲細胞則在約27°C的溫度下更為活躍。此外,控制適當的pH值和CO2濃度對維持細胞的生理狀態(tài)同樣至關重要。在進行細胞培養(yǎng)時,無菌操作是必不可少的。嚴格遵循無菌規(guī)程,防止微生物污染,是確保實驗成功的關鍵。同時,定期更換培養(yǎng)基、維持細胞在對數生長期傳代,也是維持細胞健康和提高實驗重復性的重要措施。在傳代過程中,應使用合適的解離方法,如胰蛋白酶處理或機械刮除,以確保細胞的活力和生長能力。如需了解更多關于細胞培養(yǎng)的信息,可訪問億賽生物官網獲取專業(yè)指導。DMEM培養(yǎng)基適合于基因編輯和轉染實驗。重慶基礎細胞培養(yǎng)基供應商
DMEM培養(yǎng)基適用于神經細胞的培養(yǎng)。天津無血清細胞培養(yǎng)基報價
選擇合適的細胞系和培養(yǎng)基配方對于實驗的成功至關重要。不同的細胞系具有不同的培養(yǎng)需求,例如,人類和哺乳動物細胞通常在36°C至37°C的環(huán)境中生長,而昆蟲細胞則在27°C左右的溫度下生長較好。培養(yǎng)環(huán)境還需控制適當的pH值和CO2濃度,以維持細胞的生理狀態(tài)。在細胞培養(yǎng)過程中,需嚴格遵循無菌操作規(guī)程,防止微生物污染。此外,定期更換培養(yǎng)基,保持細胞在對數生長期進行傳代,有助于維持細胞的健康和實驗的重復性。傳代時,應使用合適的解離方法,如胰蛋白酶處理或機械刮除,以確保細胞的活力和生長能力。詳情請咨詢億賽生物官網。天津無血清細胞培養(yǎng)基報價