從而提高菌株增殖速率，但是濃度過大會導(dǎo)致抑菌現(xiàn)象，后期菌株增殖放緩，以產(chǎn)酸為主，2-羥基乙胺還能夠作為陽離子表面活性劑，使得細(xì)胞壁疏松，提高細(xì)胞通透性，促進(jìn)谷氨酸釋放到發(fā)酵液，從而提高了谷氨酸產(chǎn)量和糖酸轉(zhuǎn)化率。三、通過上述實(shí)驗(yàn)確定cecl3添加量為10mg/l、2-羥基乙胺的添加量40mg/l，在此基礎(chǔ)上，研究發(fā)酵培養(yǎng)基b對菌體濃度、谷氨酸含量以及糖酸轉(zhuǎn)化率的影響。對照組1采用發(fā)酵培養(yǎng)基a進(jìn)行發(fā)酵，不采用發(fā)酵培養(yǎng)基b，100l發(fā)酵罐中含有70l發(fā)酵培養(yǎng)基a；發(fā)酵工藝參照實(shí)施例1。對照組2：發(fā)酵培養(yǎng)基b中不添加琥珀酸，其余同實(shí)施例1。對照組3：發(fā)酵培養(yǎng)基b中不添加殼聚糖，其余同實(shí)施例1。對照組4：發(fā)酵培養(yǎng)基a中添加5g/l的琥珀酸，其余同對照組1。實(shí)驗(yàn)組為實(shí)施例1。具體結(jié)果見表1。表1組別菌濃度od600nm谷氨酸產(chǎn)量g/l糖酸轉(zhuǎn)化率％對照組：對照組1采用單一發(fā)酵培養(yǎng)基發(fā)酵，谷氨酸產(chǎn)量和糖酸轉(zhuǎn)化率明顯低于實(shí)驗(yàn)組，各組別菌體濃度差異并不大；對照組4在對照組1的基礎(chǔ)上添加了琥珀酸，對菌體濃度并沒有影響，谷氨酸產(chǎn)量和糖酸轉(zhuǎn)化率也沒有明顯差異，可能原因是，發(fā)酵前期以菌體增殖為主，產(chǎn)酸較少，琥珀酸對菌體增殖并沒有明顯的刺激作用。無血清培養(yǎng)基提供了純凈的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境。江蘇DMEM高糖培養(yǎng)基哪家便宜

    C）大腸埃希菌＋＋－－產(chǎn)氣腸桿菌－－＋＋志賀菌屬－＋－－沙門菌屬－＋－＋表硫化氫和尿素酶試驗(yàn)對腸桿菌屬的鑒別試驗(yàn)傷寒沙門菌甲型副傷寒沙門菌變形桿菌志賀菌屬大腸埃希菌克雷伯菌屬硫化氫試驗(yàn)－/＋＋＋＋＋＋＋－－－尿素酶試驗(yàn)－－＋－－＋乳糖發(fā)酵試驗(yàn)－－－－＋＋在培養(yǎng)基中加入指示劑或某種化學(xué)物質(zhì)**不需要的**生長，利于需要的**分離，這種培養(yǎng)基稱為選擇性培養(yǎng)基。常用的抑菌劑有膽鹽、煌綠、玫瑰紅鈉、亞硒酸鈉等。常用的指示荊有溴甲酚紫、溴麝香草酚藍(lán)等。美藍(lán)是氧化還原指示劑。例如，在培養(yǎng)基內(nèi)加入青霉素可**革蘭陽性**，而利于革蘭陰性**的生長；如果加入鏈霉素，則可獲得與加青霉素相反的選擇效果；加入制霉素可*****，有利于**的分離。又如亞**鉍瓊脂，既能**革蘭陽性**生長，又能**許多革蘭陰性**生長，但傷寒沙門菌卻能在這個培養(yǎng)基上生長出具有棕色環(huán)的菌落。SS瓊脂是臨床**檢驗(yàn)中一種常用的選擇性培養(yǎng)基。大腸埃希菌在SS培養(yǎng)基上，因發(fā)酵乳糖而產(chǎn)酸，使指示劑中性紅變深，并使膽鹽沉淀，所以菌落紅色而不透明。沙門菌分解含硫氨基酸而產(chǎn)生硫化氫，硫化氫與枸櫞酸鐵形成硫化鐵，所以菌落中心呈黑色。痢疾志賀菌，既不發(fā)酵乳糖也不產(chǎn)生硫化氧。廣東基礎(chǔ)培養(yǎng)基進(jìn)口無血清培養(yǎng)基適用于需要無血清環(huán)境的細(xì)胞。

    **早開發(fā)的基礎(chǔ)培養(yǎng)基（minimalessentialmedium,MEM），其本質(zhì)為含有鹽、氨基酸、維生素和其他必需營養(yǎng)物的pH緩沖的等滲混合物。在此基礎(chǔ)上，DMEM、IMDM、HAMF12、PRMI1640等各種合成細(xì)胞培養(yǎng)基被不斷開發(fā)出來。常用合成培養(yǎng)基的配方此處不詳細(xì)介紹，其特性及應(yīng)用的范圍見表1-2。表1-2常用合成培養(yǎng)基的特性及應(yīng)用的范圍培養(yǎng)基名稱特性及應(yīng)用范圍199細(xì)胞培養(yǎng)基添加適量的血清后，可***用于多種細(xì)胞培養(yǎng)，并用于**學(xué)、*苗生產(chǎn)等。MEM細(xì)胞培養(yǎng)基MEM（MinimalEssentialMedium）培養(yǎng)基有含Earle's平衡鹽的類型，也有含Hanks'平衡鹽的類型；有高壓**型的，也有過濾**型的；還有含非必需氨基酸的類型。是**基本、適用范圍**廣的細(xì)胞培養(yǎng)基。DMEM細(xì)胞培養(yǎng)基DMEM（Dulbecco’smodifiedMinimalEssentialMedium）是由Dulbecco在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上改良獲得的，各成分份量加倍，分低糖（1000mg/L）、高糖（4500mg/L）兩種類型。細(xì)胞生長快。附著稍差的腫*細(xì)胞、克隆培養(yǎng)用高糖效果較好，常用于雜交*的骨髓*細(xì)胞和DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細(xì)胞培養(yǎng)。IMDM細(xì)胞培養(yǎng)基IMDM（Iscove’smodifiedDMEM）是由Iscove在DMEM基礎(chǔ)上改良，增加了幾種氨基酸和胱氨酸量等?？捎糜陔s交*細(xì)胞培養(yǎng)。

    三)、試驗(yàn)結(jié)果：初代培養(yǎng)：使用本發(fā)明的消毒方法，消毒成功率能達(dá)到80％，誘導(dǎo)培養(yǎng)基萌芽率能達(dá)到90％，可以成功建立無菌再生體系。繼代培養(yǎng)：使用本發(fā)明的增殖培養(yǎng)基，繡球組培苗增殖倍率能夠達(dá)到8～10倍，組培苗高度一致，生長健壯。生根培養(yǎng)：使用本發(fā)明的生根培養(yǎng)基，繡球組培苗生根率能夠達(dá)到95％，根系發(fā)達(dá)，健壯，可以成功用于移栽大棚。本發(fā)明所指ms培養(yǎng)基是murashige和skoog研制的培養(yǎng)基，其成分配方表見表1。1/2ms培養(yǎng)基是指大量元素含量為ms培養(yǎng)基的一半，其他成分用量相同。表1、ms培養(yǎng)基成分表本發(fā)明涉及的植物生長調(diào)節(jié)劑有：6-ba—6-芐氨基嘌呤；ga3—赤霉素；iba—吲哚丁酸，naa—萘乙酸。本發(fā)明中的誘導(dǎo)培養(yǎng)基、增殖培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基均為液體培養(yǎng)基。本具體實(shí)施方式的實(shí)施例均為本發(fā)明的較佳實(shí)施例，并非依此限制本發(fā)明的保護(hù)范圍，故：凡依本發(fā)明的結(jié)構(gòu)、形狀、原理所做的等效變化，均應(yīng)涵蓋于本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。減血清培養(yǎng)基減少了實(shí)驗(yàn)中血清帶來的變異性。

    1/2ms生長培養(yǎng)基的培養(yǎng)結(jié)果為：中雙11號油菜種子在1/2ms生長培養(yǎng)基上的萌發(fā)率為100％，培養(yǎng)9d的幼苗，表現(xiàn)為植株健壯、平均株高為，葉色濃綠，莖稈粗壯、平均莖中粗為，根系發(fā)達(dá)、平均根數(shù)為(>)、平均主根長為。如圖3所示。培養(yǎng)實(shí)例3和對比培養(yǎng)例3的培養(yǎng)結(jié)果比較：中雙11號油菜種子在1/2cs生長培養(yǎng)基和1/2ms生長培養(yǎng)基上的萌發(fā)率均為100％；在相同條件下培養(yǎng)9d時，與1/2ms生長培養(yǎng)基相比，1/2cs生長培養(yǎng)基中的幼苗長勢更佳，其株高、根的數(shù)目優(yōu)于1/2ms生長培養(yǎng)基，莖粗及平均主根長度與1/2ms生長培養(yǎng)基相近。如圖3所示。培養(yǎng)實(shí)例4：馬鈴薯無菌苗培養(yǎng)生長培養(yǎng)基配制：1/2cs基本培養(yǎng)基+蔗糖30g/l+植物凝膠8g/l，用超純水溶解，。1/2cs基本培養(yǎng)基的成分及用量如表1所示。培養(yǎng)方法：以克新18號馬鈴薯為例，將配制好的1/2cs生長培養(yǎng)基分裝于長、寬、高9cm的耐高溫培養(yǎng)盒中，選擇生長旺盛的馬鈴薯脫毒苗，于無菌環(huán)境下，根據(jù)實(shí)際需要，用手術(shù)剪刀剪取約1cm長的至少帶有1個葉芽的莖端或莖段，用彎頭鑷子將其1/3-1/2長度垂直插入培養(yǎng)基中；于溫度22-23℃、濕度50-70％、光照強(qiáng)度2000-3000lux、光照和黑暗交替(光照時間14h、黑暗時間10h)條件下培養(yǎng)。MEM培養(yǎng)基適合多種類型的細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)。重慶減血清培養(yǎng)基價格查詢

MEM培養(yǎng)基提供了豐富的營養(yǎng)成分，支持細(xì)胞的快速增殖。江蘇DMEM高糖培養(yǎng)基哪家便宜

    1)、初代培養(yǎng)：繡球外植體，將葉片剪去，自來水沖洗干凈。在超凈工作臺上把已經(jīng)沖洗干凈的外植體浸入75％酒精中消毒30s，用無菌水沖洗3～4次。使用白貓漂白水和無菌水按1：4的體積比配制消毒液，將外植體放入消毒液浸泡40min，其中白貓漂白水為上海白貓(集團(tuán))有限公司生產(chǎn)的“白貓”牌家用漂白水。消毒完成，將外植體接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基中培養(yǎng)，建立無菌再生系統(tǒng)，誘導(dǎo)培養(yǎng)環(huán)境為光照強(qiáng)度1500lx條件下，溫度25℃，光照時間16h；黑暗條件下，溫度23℃，光照時間8h，培養(yǎng)6～8周。其中誘導(dǎo)培養(yǎng)基為ms+～～，誘導(dǎo)培養(yǎng)基的ph值為。(2)、繼代培養(yǎng)：以建立的無菌再生系統(tǒng)為對象，將無菌外植體轉(zhuǎn)接到增殖培養(yǎng)基，其中增殖培養(yǎng)基為ms+～～，培養(yǎng)環(huán)境為光照強(qiáng)度1500lx條件下，溫度25℃，光照時間16h；黑暗條件下，溫度23℃，光照時間8h，培養(yǎng)8～12周。每隔8～12周轉(zhuǎn)接入新的增殖培養(yǎng)基，增殖培養(yǎng)基的ph值為。(3)、生根培養(yǎng)：經(jīng)過繼代培養(yǎng)的繡球組培苗，取2～3cm的頂芽，放入生根培養(yǎng)基，其中生根培養(yǎng)基為1/2ms+～～，生根培養(yǎng)基的ph值為。誘導(dǎo)培養(yǎng)環(huán)境為光照強(qiáng)度1500lx條件下，溫度25℃，光照時間16h；黑暗條件下，溫度23℃，光照時間8h，培養(yǎng)8～12周。。江蘇DMEM高糖培養(yǎng)基哪家便宜