第三節(jié)**的代謝與培養(yǎng)基新陳代謝(metabolism)足生物有機體基本的特征之一,是生命活動中一切生化反應(yīng)的總稱。它包括物質(zhì)的分解和物質(zhì)的合成過程。**吸收了外界的營養(yǎng),在酶的作用下將其分解,再在酶的作用下臺成**菌體的成分。分解與合成兩個過程伴同發(fā)生,緊密相關(guān),維持了**細胞的生命,進行**的生長。通過檢測**系統(tǒng)及代謝產(chǎn)物的生理,來鑒定**的試驗稱生化試驗。生化試驗可分為糖代謝試驗、蛋白質(zhì)代謝試驗、鹽利用試驗和呼吸酶類斌驗4種。l.代謝試驗①氧化發(fā)酵試驗O-F;②糖(醇)類發(fā)酵試驗;③VP和甲基紅試驗2.蛋白質(zhì)代謝試驗①蛋白水解試驗;②硫化氫試驗;③吲哚試驗;④脫羧酶試驗;③脫氨試驗;⑥尿素酶試驗。3.鹽類代謝試驗①枸櫞酸鹽試驗;②丙二酸鹽利用試驗;③硝酸鹽還原試驗4.呼吸酶類試驗①氧化酶試驗;②細胞色素氧化酶試驗表IMVIC試驗對腸桿菌屬的鑒別作用菌名吲哚(I)甲基紅(M)VP(Vi)枸櫞酸鹽。DMEM培養(yǎng)基提供了細胞生長所需的基本營養(yǎng)成分。青海DMEM高糖培養(yǎng)基市場報價
本發(fā)明屬于氨基酸生產(chǎn)技術(shù)領(lǐng)域:,具體涉及一種優(yōu)化的谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基。背景技術(shù)::谷氨酸,是一種酸性氨基酸。分子內(nèi)含兩個羧基,化學名稱為α-氨基戊二酸。谷氨酸是里索遜1856年發(fā)現(xiàn)的,為無色晶體,有鮮味,微溶于水,而溶于鹽酸溶液,等電點。大量存在于谷類蛋白質(zhì)中,動物腦中含量也較多。谷氨酸在生物體內(nèi)的蛋白質(zhì)代謝過程中占重要地位,參與動物、植物和微生物中的許多重要化學反應(yīng)。谷氨酸鈉俗稱味精,是重要的鮮味劑,對香味具有增強作用。谷氨酸鈉***用于食品調(diào)味劑,既可單獨使用,又能與其它氨基酸等并用。用于食品內(nèi),有增香作用。在食品中濃度為,每人每天允許攝入量為0-120微克/千克(以谷氨酸計)。在食品加工中一般用量為-。谷氨酸主要以微生物發(fā)酵制備而得,通過優(yōu)化發(fā)酵培養(yǎng)基,使得菌體增殖速率提高,可以提高氨基酸的產(chǎn)量?,F(xiàn)有技術(shù)對谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基優(yōu)化進行了大量的研究,例如文獻1“基于pb試驗和響應(yīng)面分析法對谷氨酸棒桿菌cnl021發(fā)酵培養(yǎng)基優(yōu)化,**釀造2014年”,通過**陡爬坡試驗和響應(yīng)面分析法對發(fā)酵培養(yǎng)基組成進行優(yōu)化,得到谷氨酸棒桿菌**適發(fā)酵培養(yǎng)基組,較未優(yōu)化培養(yǎng)基的發(fā)酵培養(yǎng)基產(chǎn)酸量提高了。陜西培養(yǎng)基MEM培養(yǎng)基含有多種必需氨基酸和維生素,適合細胞培養(yǎng)。
nh4)2so4264mg、nh4h2po4288mg、mgso4·7h2o370mg、cacl2332mg、mnso4·h2o15mg、znso4·7h2o4mg、h3bo33mg、cocl2·、cuso4·、na2moo4·、nafeedta37mg、肌醇100mg、煙酸2mg、鹽酸硫胺素7mg、鹽酸吡哆醇1mg、甘氨酸2mg。將本實施例中的廣適性植物**培養(yǎng)基命名為cs基本培養(yǎng)基。實施例二,本實施例廣適性植物**1/2培養(yǎng)基,其每1000ml培養(yǎng)基中含有:kno31331mg、(nh4)2so4132mg、nh4h2po4144mg、mgso4·7h2o185mg、cacl2166mg、mnso4·h2o15mg、znso4·7h2o4mg、h3bo33mg、cocl2·、cuso4·、na2moo4·、nafeedta37mg、肌醇100mg、煙酸2mg、鹽酸硫胺素7mg、鹽酸吡哆醇1mg、甘氨酸2mg。將本實施例中的廣適性植物**1/2培養(yǎng)基命名為1/2cs基本培養(yǎng)基。上述實施例中的cs基本培養(yǎng)基、1/2cs基本培養(yǎng)基與現(xiàn)有ms基本培養(yǎng)基及1/2ms基本培養(yǎng)基的成分對比如表1所示:表1ms、cs、1/2ms、1/2cs基本培養(yǎng)基成分表上述實施例中的cs基本培養(yǎng)基和1/2cs基本培養(yǎng)基,若應(yīng)用于植物**培養(yǎng)中的固體培養(yǎng)基制作,可根據(jù)實際需要添加包含但不限于適量***、蔗糖、葡萄糖、白糖、瓊脂、植物凝膠、卡拉膠、大量元素水溶肥等,添加量同ms培養(yǎng)基一致,調(diào)節(jié)ph至,121℃15min滅菌后搖勻分裝。
無血清培養(yǎng)基,一般是在合成培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上,加入成份完全明確的或部分明確的血清替代成份,達到既能滿足動物細胞培養(yǎng)的要求,又能有效克服使用血清所帶來問題的目的。無血清培養(yǎng)基中通常需要添加一些額外的組分,才能幫助細胞貼壁生長,包括以下幾大類物質(zhì):1)促貼壁物質(zhì):一般為細胞外基質(zhì),如纖連蛋白、層粘連蛋白等。它們還是重要的分裂素以及維持正常細胞功能的分化因子,對許多細胞的繁殖和分化,起著重要作用。纖連蛋白主要促進來自中胚層細胞的貼壁與分化,這些細胞包括成纖維細胞、肉*細胞、粒細胞、腎上皮細胞、腎上腺皮質(zhì)細胞、CHO細胞、成肌細胞等。2)促生長因子及***:針對不同細胞添加不同的生長因子。***也是刺激細胞生長、維持細胞功能的重要物質(zhì),有些***是許多細胞必不可少的,如胰島素。3)酶**劑:培養(yǎng)貼壁生長的細胞,需要用胰酶消化傳代,在無血清培養(yǎng)基中需含酶**劑,以終止酶的消化作用,達到保護細胞的目的。**常用的是大豆胰酶**劑。4)結(jié)合蛋白和轉(zhuǎn)運蛋白:常見如轉(zhuǎn)鐵蛋白和牛血清白蛋白。牛血清白蛋白的添加量比較大,可增加培養(yǎng)基的粘度,保護細胞免受機械損傷。許多旋轉(zhuǎn)式培養(yǎng)的無血清培養(yǎng)基都含有牛血清白蛋白。無酚紅培養(yǎng)基適用于對酚紅敏感的實驗。
無動物組分無血清細胞培養(yǎng)基的應(yīng)用三、細胞培養(yǎng)基的質(zhì)量標準和檢測方法澄清度水是細胞培養(yǎng)基的溶劑。細胞培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分只有完全溶解于水才能被細胞吸收攝取,細胞才能生長增殖,因此細胞培養(yǎng)基是否溶解以及培養(yǎng)液是否透明澄清直接影響培養(yǎng)基使用。該項目是通過對水溶解后的細胞培養(yǎng)基的澄清度檢查,判斷細胞培養(yǎng)基的澄清度。按中華******典2005年版二部附錄ⅨB進行。pH值哺乳類動物細胞生長需要合適的酸堿度,pH過高或者過低都會導(dǎo)致細胞死亡。pH值的測定也可以檢查細胞培養(yǎng)基的批間差。清大天一標準規(guī)定取規(guī)定量供試品,用注射用水(水溫20℃-30℃)溶解至1L,加入規(guī)定量碳酸氫鈉到上述溶液中,用與細胞培養(yǎng)基溶液pH值相近的兩點標準緩沖液校準后的酸度計進行測定。按中華******典2005年版二部附錄ⅥH進行;加入規(guī)定量的碳酸氫鈉(見表4-12)到上述溶液中,按中華******典2005年版二部附錄ⅥH進行。干燥減量的質(zhì)量分數(shù)細胞培養(yǎng)基具有吸濕性,在空氣中放置水分會很快升**燥減量的質(zhì)量分數(shù)表示產(chǎn)品中含濕量。細胞培養(yǎng)基是有菌制劑,其豐富的營養(yǎng)成分有利于微生物生長,控制細胞培養(yǎng)基中的水分可以防止微生物的繁殖,保持細胞培養(yǎng)基的養(yǎng)分。MEM培養(yǎng)基含有多種必需的營養(yǎng)成分和礦物質(zhì)。江蘇無血清培養(yǎng)基價格對比
F12培養(yǎng)基適用于基因編輯和轉(zhuǎn)染實驗。青海DMEM高糖培養(yǎng)基市場報價
nh4)2so4264mg、nh4h2po4288mg、mgso4·7h2o370mg、cacl2332mg、mnso4·h2o15mg、znso4·7h2o4mg、h3bo33mg、cocl2·、cuso4·、na2moo4·、nafeedta37mg、肌醇100mg、煙酸2mg、鹽酸硫胺素7mg、鹽酸吡哆醇1mg、甘氨酸2mg。本發(fā)明廣適性植物**1/2培養(yǎng)基,其每1000ml培養(yǎng)基中含有:kno31331mg、(nh4)2so4132mg、nh4h2po4144mg、mgso4·7h2o185mg、cacl2166mg、mnso4·h2o15mg、znso4·7h2o4mg、h3bo33mg、cocl2·、cuso4·、na2moo4·、nafeedta37mg、肌醇100mg、煙酸2mg、鹽酸硫胺素7mg、鹽酸吡哆醇1mg、甘氨酸2mg。本發(fā)明的有益效果:1、本發(fā)明植物**培養(yǎng)基,其能***應(yīng)用于多種植物**培養(yǎng),培養(yǎng)效果與ms培養(yǎng)基相當或優(yōu)于ms培養(yǎng)基,可規(guī)?;茝V使用。2、本發(fā)明植物**培養(yǎng)基,其在不新增加易制爆試劑種類的情況下,去除了現(xiàn)有培養(yǎng)基中含有的市場禁止流通的易制爆試劑nh4no3,不*消除了培養(yǎng)基的安全**,也便于培養(yǎng)基的購買、儲存及管理。3、本發(fā)明植物**培養(yǎng)基,其配方用適量的(nh4)2so4和nh4h2po4取代nh4no3及kh2po4,該替換減少的鉀離子和硝態(tài)氮通過適當增加kno3成分來補充,并且適當提高鉀離子含量,可促進植物發(fā)芽,有利于維管束、纖維**以及胚的發(fā)育。青海DMEM高糖培養(yǎng)基市場報價