2-羥基乙胺可以促進(jìn)磷脂酰乙醇胺細(xì)胞壁組分的合成，從而提高菌株增殖速率，后期菌株增殖放緩，以產(chǎn)酸為主，2-羥基乙胺還能夠作為陽離子表面活性劑，使得細(xì)胞壁疏松，提高細(xì)胞通透性，促進(jìn)谷氨酸釋放到發(fā)酵液；cecl3稀土鹽能夠促進(jìn)菌株增殖，提高谷氨酸相關(guān)合成酶的活力，提高谷氨酸的產(chǎn)量；但是過高的濃度會(huì)造成菌株增殖放緩和死亡，谷氨酸產(chǎn)量相應(yīng)下降；發(fā)酵中后期，菌株增殖速度放緩，以產(chǎn)酸為主，殼聚糖上的氨基與**細(xì)胞壁中帶負(fù)電荷的磷壁酸或脂多糖結(jié)合，并螯合mg2+、ca2+等陽離子,從而改變細(xì)胞壁的通透性，促進(jìn)谷氨酸分泌到胞外。發(fā)酵培養(yǎng)基中添加了琥珀酸，三羧酸循環(huán)有一定促進(jìn)作用，而對(duì)乙醛酸循環(huán)途徑具有**作用，從而導(dǎo)致中間代謝物更多地流向三羧酸循環(huán)途徑，進(jìn)而促進(jìn)谷氨酸產(chǎn)量的增加。說明書附圖圖1：cecl3稀土鹽對(duì)菌體濃度的影響；圖2：cecl3稀土鹽對(duì)谷氨酸含量的影響；圖3：2-羥基乙胺對(duì)菌體濃度的影響；圖4：2-羥基乙胺對(duì)谷氨酸含量的影響；圖5：2-羥基乙胺對(duì)糖酸轉(zhuǎn)化率的影響。具體實(shí)施方式為了使本技術(shù)領(lǐng)域：的人員更好地理解本申請(qǐng)中的技術(shù)方案，下面將結(jié)合本申請(qǐng)具體實(shí)施例，對(duì)本申請(qǐng)的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述，顯然。減血清培養(yǎng)基減少了血清成分的變異性。天津MEM培養(yǎng)基一般多少錢

    nh4)2so4264mg、nh4h2po4288mg、mgso4·7h2o370mg、cacl2332mg、mnso4·h2o15mg、znso4·7h2o4mg、h3bo33mg、cocl2·、cuso4·、na2moo4·、nafeedta37mg、肌醇100mg、煙酸2mg、鹽酸硫胺素7mg、鹽酸吡哆醇1mg、甘氨酸2mg。本發(fā)明廣適性植物**1/2培養(yǎng)基，其每1000ml培養(yǎng)基中含有：kno31331mg、(nh4)2so4132mg、nh4h2po4144mg、mgso4·7h2o185mg、cacl2166mg、mnso4·h2o15mg、znso4·7h2o4mg、h3bo33mg、cocl2·、cuso4·、na2moo4·、nafeedta37mg、肌醇100mg、煙酸2mg、鹽酸硫胺素7mg、鹽酸吡哆醇1mg、甘氨酸2mg。本發(fā)明的有益效果：1、本發(fā)明植物**培養(yǎng)基，其能***應(yīng)用于多種植物**培養(yǎng)，培養(yǎng)效果與ms培養(yǎng)基相當(dāng)或優(yōu)于ms培養(yǎng)基，可規(guī)?；茝V使用。2、本發(fā)明植物**培養(yǎng)基，其在不新增加易制爆試劑種類的情況下，去除了現(xiàn)有培養(yǎng)基中含有的市場(chǎng)禁止流通的易制爆試劑nh4no3，不*消除了培養(yǎng)基的安全**，也便于培養(yǎng)基的購(gòu)買、儲(chǔ)存及管理。3、本發(fā)明植物**培養(yǎng)基，其配方用適量的(nh4)2so4和nh4h2po4取代nh4no3及kh2po4，該替換減少的鉀離子和硝態(tài)氮通過適當(dāng)增加kno3成分來補(bǔ)充，并且適當(dāng)提高鉀離子含量，可促進(jìn)植物發(fā)芽，有利于維管束、纖維**以及胚的發(fā)育。河南DMEM/F12培養(yǎng)基無酚紅培養(yǎng)基在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中減少了干擾因素。

    平衡鹽溶液（balancedsaltsolution，BSS）簡(jiǎn)稱鹽溶液，集緩沖液的緩沖能力、生理鹽水的等滲性以及培養(yǎng)液的營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)特點(diǎn)于一體，兼具維持滲透壓、緩沖和調(diào)節(jié)溶液的酸堿度、同時(shí)供給細(xì)胞生存所必需的能量和無機(jī)離子成分的作用。各種BSS的緩沖系統(tǒng)有所不同，其中以Hank’s液和Earle’s液為例，它們主要差別在于碳酸氫鈉的水平,在Earle’s(g/L)中比在Hank’s(g/L)中高。碳酸氫鈉需用高水平的CO2平衡，以維持溶液的pH值。Eagles液在空氣水平的CO2中，溶液會(huì)變堿，Hank’s液在CO2培養(yǎng)箱中會(huì)變酸。如果希望在CO2培養(yǎng)箱中保存**，需要用Earle’s液，。如果**是清洗將要在細(xì)胞培養(yǎng)基中儲(chǔ)存的**，用Hank’s液就可以了。表3-1幾種常用的平衡鹽溶液配方（g/L）一些BSS含有的Ca2+、Mg2+是細(xì)胞膜的重要組成成分，同時(shí)參與許多重要的細(xì)胞功能活動(dòng)。但它們有使細(xì)胞凝集的作用，在配制分散細(xì)胞的消化液和特殊用途的細(xì)胞洗滌時(shí)，宜采用Ca2+、Mg2+含量較低的Dulbecco液或無Ca2+、Mg2+的D-Hanks液，或者PBS液。概述基礎(chǔ)細(xì)胞培養(yǎng)基主要包括199、MEM、RPMI-1640、DMEM、DMEM/F12等。主要成分是氨基酸、維生素、碳水化合物、無機(jī)鹽和其它一些輔助物質(zhì)。

    二氧化碳不斷被釋放，培養(yǎng)液變酸，pH值發(fā)生變化。酚紅是細(xì)胞培養(yǎng)基中**常用的pH指示劑，但依靠細(xì)胞培養(yǎng)基中的酚紅等pH指示劑進(jìn)行判斷，需要實(shí)驗(yàn)員的經(jīng)驗(yàn)積累，存在較大的主觀性。實(shí)際上，個(gè)性化細(xì)胞培養(yǎng)基或是無血清細(xì)胞培養(yǎng)基中酚紅含量較少或是不含酚紅，只能通過pH計(jì)或者pH電極進(jìn)行pH值的檢測(cè)，結(jié)果更為準(zhǔn)確可靠。緩沖能力細(xì)胞培養(yǎng)基應(yīng)具有一定的緩沖能力。細(xì)胞培養(yǎng)過程中造成細(xì)胞培養(yǎng)液pH波動(dòng)的主要物質(zhì)是細(xì)胞代謝產(chǎn)生的CO2。在封閉式培養(yǎng)過程中CO2與水結(jié)合產(chǎn)生碳酸，細(xì)胞培養(yǎng)液pH很快下降；打開培養(yǎng)器具時(shí)CO2逸出則會(huì)引起pH升高。細(xì)胞培養(yǎng)基通常采用NaHCO3-CO2緩沖系統(tǒng)，按下列化學(xué)反應(yīng)方程式調(diào)節(jié)細(xì)胞培養(yǎng)基的pH值：H2O+CO2→H2CO3?H++HCO3－NaHCO3?Na++HCO3－此外，還有緩沖能力較高的磷酸鹽緩沖系統(tǒng)。但碳酸鹽緩沖系統(tǒng)的細(xì)胞毒性小、成本低，在細(xì)胞培養(yǎng)中應(yīng)用得更為***。另一種較為常用的緩沖液是HEPES（羥乙基哌嗪乙硫磺酸）液，它是一種非離子兩性緩沖液，在pH~。高濃度的HEPES可能對(duì)細(xì)胞**性作用，細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)HEPES的添加濃度一般為10～25mmol/L。滲透壓細(xì)胞必須生活在等滲的環(huán)境中，大多數(shù)體外培養(yǎng)的細(xì)胞對(duì)滲透壓有一定耐受性。研究顯示。無酚紅培養(yǎng)基確保了細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

    1)、初代培養(yǎng)：繡球外植體，將葉片剪去，自來水沖洗干凈。在超凈工作臺(tái)上把已經(jīng)沖洗干凈的外植體浸入75％酒精中消毒30s，用無菌水沖洗3～4次。使用白貓漂白水和無菌水按1：4的體積比配制消毒液，將外植體放入消毒液浸泡40min，其中白貓漂白水為上海白貓(集團(tuán))有限公司生產(chǎn)的“白貓”牌家用漂白水。消毒完成，將外植體接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基中培養(yǎng)，建立無菌再生系統(tǒng)，誘導(dǎo)培養(yǎng)環(huán)境為光照強(qiáng)度1500lx條件下，溫度25℃，光照時(shí)間16h；黑暗條件下，溫度23℃，光照時(shí)間8h，培養(yǎng)6～8周。其中誘導(dǎo)培養(yǎng)基為ms+～～，誘導(dǎo)培養(yǎng)基的ph值為。(2)、繼代培養(yǎng)：以建立的無菌再生系統(tǒng)為對(duì)象，將無菌外植體轉(zhuǎn)接到增殖培養(yǎng)基，其中增殖培養(yǎng)基為ms+～～，培養(yǎng)環(huán)境為光照強(qiáng)度1500lx條件下，溫度25℃，光照時(shí)間16h；黑暗條件下，溫度23℃，光照時(shí)間8h，培養(yǎng)8～12周。每隔8～12周轉(zhuǎn)接入新的增殖培養(yǎng)基，增殖培養(yǎng)基的ph值為。(3)、生根培養(yǎng)：經(jīng)過繼代培養(yǎng)的繡球組培苗，取2～3cm的頂芽，放入生根培養(yǎng)基，其中生根培養(yǎng)基為1/2ms+～～，生根培養(yǎng)基的ph值為。誘導(dǎo)培養(yǎng)環(huán)境為光照強(qiáng)度1500lx條件下，溫度25℃，光照時(shí)間16h；黑暗條件下，溫度23℃，光照時(shí)間8h，培養(yǎng)8～12周。。RPMI1640培養(yǎng)基在免疫細(xì)胞培養(yǎng)中表現(xiàn)出色。安徽DMEM/F12培養(yǎng)基供應(yīng)商

DMEM培養(yǎng)基提供了適宜的pH值和滲透壓。天津MEM培養(yǎng)基一般多少錢

    擬南芥根愈傷**誘導(dǎo)時(shí)，培養(yǎng)6-9d在切口處開始出現(xiàn)少量顆粒狀愈傷**，培養(yǎng)20-22d獲得淡黃色松脆型愈傷**，在愈傷**周圍觀察到大量致密分布的白毛，顆粒狀愈傷**誘導(dǎo)率及愈傷**總誘導(dǎo)率均為100％。如圖5所示。培養(yǎng)實(shí)例5和對(duì)比培養(yǎng)例5的誘導(dǎo)結(jié)果比較：用上述方法進(jìn)行哥倫比亞擬南芥葉片和根愈傷**誘導(dǎo)時(shí)，cs誘導(dǎo)培養(yǎng)基與ms誘導(dǎo)培養(yǎng)基的顆粒狀愈傷**誘導(dǎo)率及愈傷**總誘導(dǎo)率均為100％，但cs誘導(dǎo)培養(yǎng)基的愈傷**出愈時(shí)間比ms誘導(dǎo)培養(yǎng)基提前至少1d；在相同培養(yǎng)條件下，與ms誘導(dǎo)培養(yǎng)基相比，經(jīng)cs誘導(dǎo)培養(yǎng)基誘導(dǎo)的葉片團(tuán)塊狀愈傷**更大、誘導(dǎo)的根愈傷**更多。如圖5所示。培養(yǎng)實(shí)例6：本氏***葉片及根愈傷**誘導(dǎo)培養(yǎng)實(shí)例6與培養(yǎng)實(shí)例5不同的地方在于，步驟(1)將；步驟(2)將2,；步驟(3)所取葉片為本氏***無菌苗葉片，用手術(shù)剪刀將無菌葉片剪成，用鑷子將其平鋪于誘導(dǎo)培養(yǎng)基；步驟(4)所取根為本氏***無菌苗的根，cs誘導(dǎo)培養(yǎng)基的誘導(dǎo)結(jié)果為：本氏***葉片愈傷**誘導(dǎo)時(shí)，培養(yǎng)15-18d的葉片明顯增大增厚，葉片四周產(chǎn)生大量的淡綠色致密的愈傷**，愈傷**誘導(dǎo)率為100％，且在愈傷**團(tuán)塊上已開始產(chǎn)生多個(gè)嫩綠色的不定芽；本氏***根愈傷**誘導(dǎo)時(shí)，培養(yǎng)9-11d在切口處產(chǎn)生大量淡黃色致密的愈傷**。天津MEM培養(yǎng)基一般多少錢