cs液體培養(yǎng)基和1/2cs液體培養(yǎng)基在用不同ph超純水(ph為)配制時的ph都較為穩(wěn)定,在未調(diào)ph的情況下,可直接用于多種植物培養(yǎng)。如圖8所示。(2)以克新18號馬鈴薯無菌苗為例,觀察在未調(diào)ph和將ph調(diào)至:a、培養(yǎng)基制作方法:隨機選取超純水,測得其ph為,用于配制8種不同的液體培養(yǎng)基。第一種:1/2ms未調(diào)ph液體培養(yǎng)基,其為取1/2ms基本培養(yǎng)基置于ph為;第二種:1/2cs未調(diào)ph液體培養(yǎng)基,其為取1/2cs基本培養(yǎng)基置于ph為;第三種:ms未調(diào)ph液體培養(yǎng)基,其為取ms基本培養(yǎng)基置于ph為;第四種:cs未調(diào)ph液體培養(yǎng)基,其為取cs基本培養(yǎng)基置于ph為;第五種:1/,其為取1/2ms基本培養(yǎng)基置于ph為,調(diào)ph至;第六種:1/,其為取1/2cs基本培養(yǎng)基置于ph為,調(diào)ph至;第七種:,其為取ms基本培養(yǎng)基置于ph為,調(diào)ph至;第八種:,其為取cs基本培養(yǎng)基置于ph為,調(diào)ph至。b、培養(yǎng)方法:從培養(yǎng)實例4所述培養(yǎng)基獲得長勢**的馬鈴薯幼苗,在清水中緩苗2-3d后選取長勢一致的馬鈴薯幼苗,如圖9-a所示,置于上述8種不同液體培養(yǎng)基8d,每隔2d更新1次液體培養(yǎng)基;于溫度22-23℃、濕度50-70%、光照強度2000-3000lux、光照和黑暗交替(光照時間14h、黑暗時間10h)條件下培養(yǎng)。減血清培養(yǎng)基減少了血清成分的變異性。吉林培養(yǎng)基進口
一)、實驗室種子培養(yǎng)基**方法1、高壓蒸汽**鍋、手提式**鍋。容量小。2、立式或臥式**鍋。容量較大,一般能裝幾十瓶或幾百瓶。3、**柜。要和蒸汽鍋爐配套,用于大量種瓶培養(yǎng)基的**,一次能裝幾百至幾千瓶(袋)。(二)、培養(yǎng)基的分批**1、定義:將配制好的培養(yǎng)基輸入發(fā)酵罐中,用蒸汽加熱,使培養(yǎng)基和設(shè)備同時**的一種**方式,又稱實罐**。2、**過程過程包括升溫、保溫和冷卻等三個階段,各階段對**的貢獻:20%、75%、5%。培養(yǎng)基的升溫可由兩種方式實現(xiàn):間接加熱,在夾套或蛇管中通入蒸汽加熱;直接加熱,在培養(yǎng)基中直接通入熱蒸汽加熱。**過程中加熱和保溫階段的**作用是主要的,而冷卻階段的**作用是次要的,一般很小,可以忽略不計。此外,還應(yīng)指出的是,應(yīng)當避免長時間的加熱階段,因為加熱時間過長,不僅破壞營養(yǎng)物質(zhì),而且也有可能引起培養(yǎng)液中某些有害物質(zhì)的生成,從而影響培養(yǎng)過程的順利進行。在實際生產(chǎn)中,也可能遇到所供蒸汽不足、溫度不夠高的情況,這時可以適當延長**時間。生產(chǎn)上甚至有用100℃蒸煮而達到徹底**的實例。如要做固體曲而沒有高溫蒸汽時,可將原料用100蒸汽蒸30min,殺死其中的營養(yǎng)細胞,但孢子與**的芽孢沒有被殺死。云南RPMI1640培養(yǎng)基包括MEM培養(yǎng)基含有多種必需的營養(yǎng)成分。
從而提高菌株增殖速率,但是濃度過大會導(dǎo)致抑菌現(xiàn)象,后期菌株增殖放緩,以產(chǎn)酸為主,2-羥基乙胺還能夠作為陽離子表面活性劑,使得細胞壁疏松,提高細胞通透性,促進谷氨酸釋放到發(fā)酵液,從而提高了谷氨酸產(chǎn)量和糖酸轉(zhuǎn)化率。三、通過上述實驗確定cecl3添加量為10mg/l、2-羥基乙胺的添加量40mg/l,在此基礎(chǔ)上,研究發(fā)酵培養(yǎng)基b對菌體濃度、谷氨酸含量以及糖酸轉(zhuǎn)化率的影響。對照組1采用發(fā)酵培養(yǎng)基a進行發(fā)酵,不采用發(fā)酵培養(yǎng)基b,100l發(fā)酵罐中含有70l發(fā)酵培養(yǎng)基a;發(fā)酵工藝參照實施例1。對照組2:發(fā)酵培養(yǎng)基b中不添加琥珀酸,其余同實施例1。對照組3:發(fā)酵培養(yǎng)基b中不添加殼聚糖,其余同實施例1。對照組4:發(fā)酵培養(yǎng)基a中添加5g/l的琥珀酸,其余同對照組1。實驗組為實施例1。具體結(jié)果見表1。表1組別菌濃度od600nm谷氨酸產(chǎn)量g/l糖酸轉(zhuǎn)化率%對照組:對照組1采用單一發(fā)酵培養(yǎng)基發(fā)酵,谷氨酸產(chǎn)量和糖酸轉(zhuǎn)化率明顯低于實驗組,各組別菌體濃度差異并不大;對照組4在對照組1的基礎(chǔ)上添加了琥珀酸,對菌體濃度并沒有影響,谷氨酸產(chǎn)量和糖酸轉(zhuǎn)化率也沒有明顯差異,可能原因是,發(fā)酵前期以菌體增殖為主,產(chǎn)酸較少,琥珀酸對菌體增殖并沒有明顯的刺激作用。
本發(fā)明屬于氨基酸生產(chǎn)技術(shù)領(lǐng)域:,具體涉及一種優(yōu)化的谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基。背景技術(shù)::谷氨酸,是一種酸性氨基酸。分子內(nèi)含兩個羧基,化學(xué)名稱為α-氨基戊二酸。谷氨酸是里索遜1856年發(fā)現(xiàn)的,為無色晶體,有鮮味,微溶于水,而溶于鹽酸溶液,等電點。大量存在于谷類蛋白質(zhì)中,動物腦中含量也較多。谷氨酸在生物體內(nèi)的蛋白質(zhì)代謝過程中占重要地位,參與動物、植物和微生物中的許多重要化學(xué)反應(yīng)。谷氨酸鈉俗稱味精,是重要的鮮味劑,對香味具有增強作用。谷氨酸鈉***用于食品調(diào)味劑,既可單獨使用,又能與其它氨基酸等并用。用于食品內(nèi),有增香作用。在食品中濃度為,每人每天允許攝入量為0-120微克/千克(以谷氨酸計)。在食品加工中一般用量為-。谷氨酸主要以微生物發(fā)酵制備而得,通過優(yōu)化發(fā)酵培養(yǎng)基,使得菌體增殖速率提高,可以提高氨基酸的產(chǎn)量?,F(xiàn)有技術(shù)對谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基優(yōu)化進行了大量的研究,例如文獻1“基于pb試驗和響應(yīng)面分析法對谷氨酸棒桿菌cnl021發(fā)酵培養(yǎng)基優(yōu)化,**釀造2014年”,通過**陡爬坡試驗和響應(yīng)面分析法對發(fā)酵培養(yǎng)基組成進行優(yōu)化,得到谷氨酸棒桿菌**適發(fā)酵培養(yǎng)基組,較未優(yōu)化培養(yǎng)基的發(fā)酵培養(yǎng)基產(chǎn)酸量提高了。無酚紅培養(yǎng)基在細胞實驗中減少了潛在的毒性作用。
培養(yǎng)實例2:蘭茲貝格型擬南芥無菌植株培養(yǎng)培養(yǎng)實例2與培養(yǎng)實例1不同的地方在于:步驟(1)所用種子為蘭茲貝格(ler,landsbergerecta)型擬南芥種子,蘭茲貝格擬南芥較哥倫比亞擬南芥具有更早的花期,在適宜條件下培養(yǎng),可以獲得處于各發(fā)育時期的擬南芥無菌***,包括根、胚軸、葉柄、子葉、蓮座葉、莖、花、角果等,其余完全同培養(yǎng)實例1。1/2cs生長培養(yǎng)基的培養(yǎng)結(jié)果為:蘭茲貝格型擬南芥種子在1/2cs生長培養(yǎng)基上的萌發(fā)率為100%,培養(yǎng)28d的幼苗,表現(xiàn)為植株健壯、平均株高為,蓮座葉發(fā)達、平均**大蓮座葉長為,葉色濃綠,根系粗壯、平均主根長為,花序含有較多花朵,花粉形態(tài)和活力均正常、平均有活力的花粉為%。如圖2所示。對比培養(yǎng)例2:將1/2cs基本培養(yǎng)基替換為1/2ms基本培養(yǎng)基,其余完全同培養(yǎng)實例2,1/2ms基本培養(yǎng)基的成分及用量如表1所示。1/2ms生長培養(yǎng)基的培養(yǎng)結(jié)果為:蘭茲貝格型擬南芥種子在1/2ms生長培養(yǎng)基上的萌發(fā)率為100%,培養(yǎng)28d的幼苗,表現(xiàn)為植株健壯、平均株高為,蓮座葉發(fā)達、平均**大蓮座葉長為,葉色濃綠,根系粗壯、平均主根長為,花序發(fā)育良好,花粉形態(tài)和活力均正常、平均有活力的花粉為%。如圖2所示。DMEM培養(yǎng)基提供了適宜的pH值和滲透壓。寧夏RPMI1640培養(yǎng)基聯(lián)系方式
F12培養(yǎng)基在細胞生物學(xué)研究中廣泛應(yīng)用,適用于多種細胞系。吉林培養(yǎng)基進口
由于培養(yǎng)基的間歇**不需要專門的**設(shè)備,投資少,對設(shè)備要求簡單,對蒸汽的要求也比較低,且**效果可靠,因此,間歇**是中小型生產(chǎn)工廠經(jīng)常采用的一種培養(yǎng)基**方法。(三)、培養(yǎng)基的連續(xù)**1、定義:連續(xù)**也叫連消,將配制好的并經(jīng)預(yù)熱(60~75℃)的培養(yǎng)基用泵連續(xù)輸入由直接蒸汽加熱的加熱塔,使在短時間內(nèi)達到**溫度(126~132℃)。然后進入維持罐(或維持管),使在**溫度下維持3~7分鐘后再進入冷卻管,使其冷卻至接種溫度并直接進入已事先**(空罐**)過的發(fā)酵罐內(nèi)。其溫度一般以126~132℃為宜,總蒸汽壓力要求達到~MPa以上。培養(yǎng)基采用連續(xù)**時,需在培養(yǎng)基進入發(fā)酵罐前,直接用蒸汽進行空罐**(空消),用無菌空氣保壓,待培養(yǎng)基流入罐后,開始冷卻。**時對培養(yǎng)基的加熱可采用各種加熱器。培養(yǎng)基的冷卻方式有噴淋冷卻式、真空冷卻式、薄板換熱器式幾種方式,其過程均包括加熱、維持和冷卻階段。2、連續(xù)**的流程:(1)由熱交換器組成的**系統(tǒng)流程中采用了薄板換熱器作為培養(yǎng)液的加熱和冷卻器,蒸汽在薄板換熱器的加熱段使培養(yǎng)液的溫度升高,經(jīng)維持段保溫一定時間后,培養(yǎng)基在薄板換熱器的冷卻段進行冷卻。吉林培養(yǎng)基進口