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云南胰酶

來源: 發(fā)布時間:2024-08-31

0.25%胰酶是細(xì)胞生物學(xué)中常用的一種生物試劑,下面匯總一下胰酶使用過程中常見的一些問題。

胰酶的使用濃度是多少?胰酶濃度:常用0.25%胰酶+0.02%EDTA作為消化液。

胰酶的保存胰酶可在-20℃下保存一年。隨著時間延長,胰酶的消化能力減弱。胰酶可分裝凍存,在使用前從-20℃冰箱取出。盡量避免在4℃長期保存。胰酶使用的時候要注意什么?(1)在使用胰酶細(xì)胞消化液的過程中要特別注意避免消化液被細(xì)菌污染。(2)胰酶細(xì)胞消化液消化細(xì)胞時間不宜過長,否則細(xì)胞鋪板后生長狀況會較差。 胰酶細(xì)胞消化液(Trypsin-EDTA Solution)含0.25%胰酶和0.02%EDTA。云南胰酶

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胰酶中的酚紅有哪些作用?酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為pH指示劑,中性時為紅色,酸性時為黃色,堿性時為紫色。研究表明:酚紅可以模擬固醇類***(特別是雌***)的作用。為避免固醇類反應(yīng),培養(yǎng)細(xì)胞尤其是哺乳類細(xì)胞時,建議用不含酚紅的培養(yǎng)基。由于酚紅干擾檢測,在做流式細(xì)胞檢測時,也會使用不含酚紅的培養(yǎng)基或者胰酶。圖 2. Phenol red test圖片來源網(wǎng)絡(luò)8、在做細(xì)胞凋亡檢測時,細(xì)胞為什么不能用含有EDTA的胰酶消化?Annexin V(膜聯(lián)蛋白)是Ca2+依賴的蛋白,EDTA會螯合Ca2+從而影響Annexin V,進(jìn)而影響結(jié)果,因此需選用不含EDTA的胰酶。建議放入培養(yǎng)箱中進(jìn)行消化,時間可以長一點(diǎn)。隨時觀察細(xì)胞情況,避免消化過度;也可使用細(xì)胞刮刀將細(xì)胞刮下,后用***吹勻,比消化簡單,還可避免使用胰酶帶來的傷害。天津重組胰酶價格信息胰蛋白酶溶液作為細(xì)胞分離試劑廣泛應(yīng)用于貼壁細(xì)胞的連續(xù)培養(yǎng)。

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0.25%胰酶和加了EDTA胰酶區(qū)別是什么詳細(xì)說明

細(xì)胞之間是通過CAM(細(xì)胞粘性分子)相連的,而很多粘性分子只有在有+2價金屬離子,如Ca2+,Mg2+,的存在下才能行使這種功能。EDTA是鈣離子的鰲合劑,在胰酶中加入EDTA的作用簡單的說就是為了增加胰酶的消化作用,尤其適用于比較難于消化的細(xì)胞;同時可以減少胰消化時間,以減少酶對細(xì)胞的損傷作用。加入EDTA的消化反應(yīng)不能通過加入培養(yǎng)液終止,必須離心才能去除EDTA,所以要掌握好消化時間。

    6.磷酸酶EDTA相對不溶??梢杂么帕嚢杵鲾嚢?,或?qū)⑵渲糜?度的冰箱中,溶解后過濾并**。7.可配備2-3倍血漿酶,節(jié)省時間和過濾器。使用時,請對PBS消毒。8.將儲存溶液儲存在-20°C的冰箱中,然后將溶液儲存在4°C。使用時,請勿將其放在27°C的水浴中,因為這會使自由基酶迅速無法使用。使用前放置一次。是的,因為添加的數(shù)量很少,因此通常不會凍結(jié)細(xì)胞。9.在消化過程中,向培養(yǎng)瓶中加入適量的胰酶。個人經(jīng)驗,一般在10cm培養(yǎng)皿中加。加入后,立即搖動培養(yǎng)皿蓋住胰酶。一旦充滿,用負(fù)壓吸引多余的胰酶排出,將其加入37度培養(yǎng)箱中進(jìn)行消化。10.請注意,過量的胰酶對細(xì)胞有害,而過量的EDTA也會影響粘附,因此無需將細(xì)胞浸入血漿酶中進(jìn)行消化。11.磷酸酶37具有**佳的消化作用,并具有在37度以下消化的能力。在消化過程中,甚至不需要將一些易于消化的細(xì)胞放入培養(yǎng)箱中。請注意,它不能消化太長時間。四、實驗所需試劑清單:序列產(chǎn)品名貨號CAS備注11000ul藍(lán)吸頭FT-10002氫氧化鈉JT86501310-73-23PBSHC14884EDTABSH-59-55螯合樹脂chelex100SS6072以上為EDTA-胰蛋白酶的配制,實驗請選用高質(zhì)量試劑。胰酶使用的時候要注意什么?

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胰蛋白酶**初在牛的胰腺中被發(fā)現(xiàn),現(xiàn)在已經(jīng)擴(kuò)展到多種來源,包括哺乳動物(人、牛、豬和狗)、無脊椎動物和微生物等。胰蛋白酶的商業(yè)化生產(chǎn)主要依賴哺乳動物的胰腺組織提取或者重組表達(dá)提取。直接從哺乳動物胰腺組織中提取的缺點(diǎn)是生產(chǎn)成本高,易造成其他結(jié)構(gòu)相近的蛋白污染。重組表達(dá)提取胰蛋白酶可以縮短提取時間、降低生產(chǎn)成本,提取的蛋白純度高,通過優(yōu)化重組表達(dá)體系可以提高蛋白的表達(dá)量,這些優(yōu)勢為其在醫(yī)療、食品等行業(yè)中的應(yīng)用提供了更多的可能性。[1]折疊適用于貼壁細(xì)胞的消化傳代;也可用于組織細(xì)胞分離的初步消化。青海進(jìn)口胰酶有哪些

EDTA是一種化學(xué)螯合劑,主要作用在于能螯合Ca、Mg離子,使細(xì)胞分離。云南胰酶

胰蛋白酶廣泛應(yīng)用于食品加工、制藥、生化檢測和制革等多種行業(yè)。在制藥工業(yè)中,胰蛋白酶可使天然蛋白、變性蛋白、纖維蛋白和黏蛋白等水解為多肽或氨基酸,以達(dá)到***的目的。胰蛋白酶生物藥用于***呼吸道疾病,可以溶解黏痰和膿性痰,還可以***毒蛇咬傷等。由于血清中含有非特異性抑肽酶,故胰蛋白酶不會消化正常組織,而能分解膿性痰等黏性分泌物,促進(jìn)***、化療藥物向病灶滲透。在食品工業(yè)中,胰蛋白酶主要用于水解價值較高的動植物性蛋白等,以牛乳為例,利用胰蛋白酶水解其中的酪蛋白、α-乳白蛋白和β-乳球蛋白等致敏原,能生產(chǎn)低敏配方奶粉。在制革工業(yè)中,胰蛋白酶用于皮革脫灰軟化,也可以利用胰蛋白酶提取具有良好生物相容性和生物降解性的膠原蛋白。[1]云南胰酶