為什么緩沖溶液的ph值在4.75~7.25之間？

緩沖溶液的緩沖范圍在PKa±16531=4.75±1之間。水合氫離子的濃度取決于弱酸與其共扼堿的濃度比。當(dāng)加入少量強(qiáng)堿時(shí)，酸被中和，導(dǎo)致了氫氧根離子在溶液中很少累積。從而C（A一）的濃度增加，C（HA）的濃度減少。可以看到，雖然加入了強(qiáng)堿，但是溶液里的氫氧根離子變化很少，同時(shí)，濃度較大，相對(duì)的變化小，兩者比值幾乎無(wú)變化，因此根據(jù)公式，水合氫離子的濃度變化很小。所以緩沖溶液的ph值在4.75~7.25 長(zhǎng)時(shí)間或過(guò)量使用PBS緩沖液可能會(huì)對(duì)人體產(chǎn)生耐受性,導(dǎo)致惡心、嘔吐、腹瀉等癥狀。湖南有酚紅緩沖液技術(shù)指導(dǎo)

緩沖液的作用和使用注意事項(xiàng)

一、緩沖液的概念緩沖液（Buffersolution）通常是由弱酸及其共軛堿或弱堿及其共軛酸緩沖對(duì)所組成的溶液，能夠在加入一定量其他物質(zhì)時(shí)減緩pH的改變。以生物實(shí)驗(yàn)中**常用的一種緩沖液PBS為例，是由Na2HPO4、KH2PO4組成的緩沖對(duì)，在PH5.8-8.0范圍內(nèi)有較強(qiáng)的緩沖能力。二、緩沖液的作用緩沖溶液的作用是在有限的范圍內(nèi)調(diào)整溶液的pH值，使待測(cè)溶液的酸度符合分析方法所規(guī)定的范圍。例如，苯酚在堿性介質(zhì)及鐵**鉀存在下，可與4-氨基安替比林反應(yīng)生成橙紅色的安替比林染料，為了防止芳香胺類的干擾以pH在10士0.2時(shí)**為適宜。為此，就需要在待測(cè)溶液中加入氨一氯化錢緩沖溶液調(diào)整和控制待測(cè)溶液的pH為10.0士0.2。 江西DPBS緩沖液技術(shù)指導(dǎo)Pbs緩沖也是磷酸鹽緩沖生理鹽水，屬于等張液對(duì)于細(xì)胞并無(wú)毒性作用。

    2.配制方法：將Tris-HCl平衡苯酚與等體積的氯仿/異戊醇（24:1）混合均勻后，移入棕色玻璃瓶中4℃保存。10%(W/V)SDS組份濃度：10%(W/V)SDS配制量：100ml配制方法：1.稱量10g高純度的SDS置于100-200ml燒杯中，加入約80ml的去離子水，68℃加入溶解2.滴加濃鹽酸調(diào)節(jié)pH值至3.將溶液定容至100ml后，室溫保存。2NNaOH組份濃度：2NNaOH配制量：100ml配制方法：1.量取80ml去離子水置于100～200ml塑料燒杯中（NaOH溶解過(guò)程中大量放熱，有可能使玻璃燒杯炸裂)。2.稱取8gNaOH小心地逐漸加入到燒杯中，邊加邊攪拌。3.待NaOH完全溶解后，用去離子水將溶液體積定容至100ml。4.將溶液轉(zhuǎn)移至塑料容器中后，室溫保存。NHCl組份濃度：NHCl配制量：100ml配制方法：1.在ml的去離子水中加入ml的濃鹽酸（N)，均勻混合。2.室溫保存。5MNaCl組份濃度：5MNaCl配制量：1L配制方法：1.稱取gNaCl置于1L燒杯中，加入約800ml的去離子水后攪拌溶解。2.加去離子水將溶液定容至1L后，適量分成小份。3.高溫高壓**后，4℃保存。20%(W/V)Glucose組份濃度：20%(W/V)Glucose配制量：100ml配制方法：1.稱取20gGlucose置于100～200ml燒杯中，加入約80ml的去離子水后，攪拌溶解。2.加去離子水將溶液定容至100ml。

    PBS緩沖液什么是PBS緩沖液？PBS緩沖液是一種常用的生物化學(xué)緩沖液，全稱為磷酸鹽緩沖液（PhosphateBufferedSaline）。PBS緩沖液主要由磷酸鹽、鹽和水組成，pH值一般在。它被***用于生物實(shí)驗(yàn)室中，用于稀釋、洗滌和儲(chǔ)存生物樣品，保持生物樣品的穩(wěn)定性和活性。PBS緩沖液的組成PBS緩沖液的主要成分包括三個(gè)部分：1.磷酸鹽：PBS緩沖液中的磷酸鹽是為了維持緩沖液的酸堿平衡。磷酸鹽能夠抵抗外界酸堿環(huán)境的影響，并且能夠穩(wěn)定細(xì)胞的PH值，保護(hù)細(xì)胞免受外界環(huán)境的傷害。2.鹽：PBS緩沖液中的鹽主要是氯化鈉（NaCl），用于調(diào)節(jié)PBS緩沖液的離子濃度。PBS緩沖液中的適當(dāng)離子濃度可以提供細(xì)胞所需的離子環(huán)境，維持細(xì)胞的生理功能。3.水：水是PBS緩沖液的基礎(chǔ)成分，用于稀釋磷酸鹽和鹽。純凈的水可以保證PBS緩沖液的質(zhì)量，避免其他雜質(zhì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。 在生物體中有三種主要的pH緩沖體系.

    1:50～l:800)后，按行進(jìn)行包被、洗滌。按列分別加入用稀釋液1:100稀釋的強(qiáng)陽(yáng)性、弱陽(yáng)性、陰性參考血清及稀釋液(作空白對(duì)照)，保溫，洗滌。加工作濃度酶標(biāo)抗體，洗滌，加底物顯色，加酸終止反應(yīng)后讀取A值。選擇強(qiáng)陽(yáng)性參考血清A值；為0．8左右，陰性參考血清A值<0．1的包被抗原稀釋度為工作濃度。?方陣(棋盤)法選擇包被抗體和酶標(biāo)抗體的工作濃度將抗體用包被液稀釋為10mg／L、lmg／L、／L三個(gè)濃度按行包被，每一個(gè)濃度包被三行(每行3孔)，分別在每個(gè)濃度包被的***、二、三行中分別加入強(qiáng)陽(yáng)性抗原，弱陽(yáng)性抗原和陰性對(duì)照，將酶標(biāo)抗抗體用稀釋液稀釋為1:l000、l:5000、l:10000三個(gè)濃度，分別加入每個(gè)濃度包被的***、二、三列中。加底物顯色，加酸終止反應(yīng)，分別讀取A值。以強(qiáng)陽(yáng)性抗原液A值在，陰性參考A值<**適條件。據(jù)此選擇包被抗體和酶標(biāo)抗體的**佳工作濃度。?二、ELISA**適工作濃度的選擇及標(biāo)準(zhǔn)化操作1**適工作濃度的選擇?1．1間接法測(cè)抗體?????酶標(biāo)抗體工作濃度的選擇：①用IgG進(jìn)行包被，洗滌。②將酶標(biāo)IgG用稀釋液作一系列稀釋后分別加入已包被的孔中，保溫、洗滌。③加酸終止反應(yīng)后，讀取吸光度(A)。讀取A值在1．0時(shí)的酶標(biāo)抗體稀釋度，作為酶標(biāo)抗體的工作濃度。生化實(shí)驗(yàn)中加入緩沖液的目的和作用。河南PBS緩沖液進(jìn)貨價(jià)

緩沖液是一種能在加入少量酸或堿時(shí)抵抗pH改變的溶液。湖南有酚紅緩沖液技術(shù)指導(dǎo)

PBS 與 DPBSPBS 和 DPBS 都包括氯化鈉和磷酸鹽緩沖液，是生物學(xué)研究中常用的試劑，用于維持 pH 值，同時(shí)可大幅度地減少活細(xì)胞中的滲透壓休克；然而，與 PBS 相比，DPBS 還包括氯化鉀，配方中可含或不含鈣和鎂以及含或不含葡萄糖和**酸。根據(jù)您的具體應(yīng)用選擇 PBS 或 DPBS。

Dulbecco 的磷酸鹽緩沖液（DPBS）DPBS 與 PBS 的不同之處在于它還包括氯化鉀，并且提供多種配方。它也用于生物應(yīng)用，水基緩沖液，包括氯化鈉和磷酸鹽緩沖液。

HBSS 與 EBSSHanks 的平衡鹽溶液（HBSS）和 Earle 的平衡鹽溶液（EBSS）都是等滲溶液，用于維持生物應(yīng)用中的滲透壓和 pH 值。雖然 HBSS 和 EBSS 包括葡萄糖和碳酸氫鈉，用于短期維持生長(zhǎng)培養(yǎng)基以外的細(xì)胞，但 EBSS 在 5% CO2 下使用，而 HBSS 包含較少的碳酸氫鈉，可以在沒(méi)有 CO2 的情況下使用。從各種依應(yīng)用而定的配方中進(jìn)行選擇。 湖南有酚紅緩沖液技術(shù)指導(dǎo)