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新疆進(jìn)口胰酶牌子

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2024-09-04

    只斷裂賴氨酸或精氨酸胰蛋白酶原的***過(guò)程的羧基參胰蛋白酶降解物分析與形成的肽鍵。白色或米黃色結(jié)晶性粉末。溶于水,不溶于乙醇、甘油、氯仿和**。分子量24000,pI,**適pH值~。pH>。Ca2+對(duì)酶活性有穩(wěn)定作用;重金屬離子、有機(jī)磷化合物、DFP、天然胰蛋白酶**劑對(duì)其活性有強(qiáng)烈**。臨床用于抗消腫,工業(yè)上用于皮革制造、生絲處理、食品加工等。胰蛋白酶*典標(biāo)準(zhǔn)胰蛋白酶來(lái)源含量本品系自豬、羊或牛胰中提取的蛋白分解酶。按干燥品計(jì)算,每1mg中胰蛋白酶的活力不得少于2500單位。胰蛋白酶制法要求本品應(yīng)從檢*合格的牛、羊或豬胰中提取,生產(chǎn)過(guò)程應(yīng)符合現(xiàn)行版《*品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》的要求。胰蛋白酶性狀本品為白色或類(lèi)白色結(jié)晶性粉末。胰蛋白酶鑒別取本品約2mg,置白色點(diǎn)滴板上,加對(duì)甲苯磺酰-L-精氨酸甲酯鹽酸鹽試液,即顯紫色。胰蛋白酶檢查酸度取本品,加水溶解并制成每1ml中含2mg的溶液,依法測(cè)定(2010年版*典二部附錄ⅥH),pH值應(yīng)為~。溶液的澄清度取本品,加,依法檢查(2010年版*典二部附錄ⅨB),溶液應(yīng)澄清。糜蛋白酶-底物溶液的制備取N-乙酰-L-酪氨酸乙酯,置100ml量瓶中,加磷酸鹽緩沖液(取,混合,pH值為)50ml,溫?zé)崾谷芙猓鋮s后再稀釋至刻度,搖勻。細(xì)胞培養(yǎng)中胰酶的作用一般是分解脂肪等。新疆進(jìn)口胰酶牌子

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胰蛋白酶的作用是使細(xì)胞間的蛋白質(zhì)水解從而使細(xì)胞離散。不同的組織或者細(xì)胞對(duì)胰酶的作用反應(yīng)不一樣胰酶分散細(xì)胞的活性還與其濃度、溫度和作用時(shí)間有關(guān),在pH為8.0、溫度為37°℃時(shí),胰酶溶液的作用能力**強(qiáng)。使用胰酶時(shí),應(yīng)把握好濃度、溫度和時(shí)間,以免消化過(guò)度造成細(xì)胞損傷。因Ca2+、Mg2+和血清、蛋白質(zhì)可降低胰酶的活性,所以配制胰酶溶液時(shí)應(yīng)選用不含Ca2+、Mg2+的BSS,如:D-Hanks液。終止消化時(shí),可用含有血清培養(yǎng)液或者胰酶抑制劑終止胰酶對(duì)細(xì)胞的作用。遼寧重組胰酶價(jià)格胰酶和胰蛋白酶不一樣,前者包括后者。

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在組織細(xì)胞的體外培養(yǎng)和原代細(xì)胞培養(yǎng)中的組織細(xì)胞分散(將組織塊制備成單個(gè)細(xì)胞懸液)以及傳代細(xì)胞培養(yǎng)中,貼壁生長(zhǎng)細(xì)胞的消化分散均要使用組織細(xì)胞消化液。常用的消化液為胰蛋白酶 (Trypsin) ,EDTA 等。胰蛋白酶是一種絲氨酸水解酶,它能把多肽鏈中賴氨酸和精氨酸殘基中的羧基側(cè)切段,水解細(xì)胞間的蛋白質(zhì),破壞細(xì)胞間的連接,從而使組織或貼壁細(xì)胞離散成單個(gè)細(xì)胞。胰酶分散細(xì)胞的活性與組織或細(xì)胞的特性、胰酶濃度、溫度和作用時(shí)間有關(guān),在PH 8.0和37℃時(shí),胰酶的作用能力**強(qiáng),因此使用胰酶時(shí),應(yīng)把握好濃度、溫度和時(shí)間,以免消化過(guò)度造成細(xì)胞損傷。一般常用胰酶的工作濃度為0.25%,而半貼壁細(xì)胞或?qū)σ让该舾械募?xì)胞常采用低濃度(0.05%)的胰酶進(jìn)行細(xì)胞消化。由于EDTA能夠螯合Ca2+和Mg2+,從而破壞細(xì)胞連接促進(jìn)細(xì)胞的解離,因此在胰酶溶液中常常會(huì)加入一定量的EDTA混合使用,以增強(qiáng)解離效果。

胰酶細(xì)胞消化液(Trypsin-EDTASolution)含0.25%胰酶(Trypsin)、0.02%EDTA和酚紅,不含Ca2+和Mg2+。該消化液已用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌,可以直接用于培養(yǎng)細(xì)胞的消化,或者一些組織的消化。本胰酶細(xì)胞消化液具有方便快速的特點(diǎn),通常室溫消化1分鐘左右就可以消化下大多數(shù)貼壁細(xì)胞。使用說(shuō)明:貼壁細(xì)胞的消化:1、吸去培養(yǎng)液,用無(wú)菌的PBS、Hanks液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。2、加入少量胰酶細(xì)胞消化液(含酚紅),略蓋過(guò)細(xì)胞即可,室溫放置30秒至2分鐘。不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。3、顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化,或者用***吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái);此時(shí)吸除胰酶細(xì)胞消化液;加入含血清的完全細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。4、如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入胰酶細(xì)胞消化液重新消化。5、如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落,直接用胰酶細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。1000-2000g離心1分鐘,沉淀細(xì)胞,盡量去除胰酶細(xì)胞消化液后,加入含血清的完全培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。胰酶溶液中的二氧化碳與干冰揮發(fā)的二氧化碳可能會(huì)極少部分的氣體交換。

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    6.磷酸酶EDTA相對(duì)不溶??梢杂么帕嚢杵鲾嚢瑁?qū)⑵渲糜?度的冰箱中,溶解后過(guò)濾并**。7.可配備2-3倍血漿酶,節(jié)省時(shí)間和過(guò)濾器。使用時(shí),請(qǐng)對(duì)PBS消毒。8.將儲(chǔ)存溶液儲(chǔ)存在-20°C的冰箱中,然后將溶液儲(chǔ)存在4°C。使用時(shí),請(qǐng)勿將其放在27°C的水浴中,因?yàn)檫@會(huì)使自由基酶迅速無(wú)法使用。使用前放置一次。是的,因?yàn)樘砑拥臄?shù)量很少,因此通常不會(huì)凍結(jié)細(xì)胞。9.在消化過(guò)程中,向培養(yǎng)瓶中加入適量的胰酶。個(gè)人經(jīng)驗(yàn),一般在10cm培養(yǎng)皿中加。加入后,立即搖動(dòng)培養(yǎng)皿蓋住胰酶。一旦充滿,用負(fù)壓吸引多余的胰酶排出,將其加入37度培養(yǎng)箱中進(jìn)行消化。10.請(qǐng)注意,過(guò)量的胰酶對(duì)細(xì)胞有害,而過(guò)量的EDTA也會(huì)影響粘附,因此無(wú)需將細(xì)胞浸入血漿酶中進(jìn)行消化。11.磷酸酶37具有**佳的消化作用,并具有在37度以下消化的能力。在消化過(guò)程中,甚至不需要將一些易于消化的細(xì)胞放入培養(yǎng)箱中。請(qǐng)注意,它不能消化太長(zhǎng)時(shí)間。四、實(shí)驗(yàn)所需試劑清單:序列產(chǎn)品名貨號(hào)CAS備注11000ul藍(lán)吸頭FT-10002氫氧化鈉JT86501310-73-23PBSHC14884EDTABSH-59-55螯合樹(shù)脂chelex100SS6072以上為EDTA-胰蛋白酶的配制,實(shí)驗(yàn)請(qǐng)選用高質(zhì)量試劑。培養(yǎng)細(xì)胞時(shí),胰酶和雙抗該怎么用?甘肅進(jìn)口胰酶一般多少錢(qián)

適用于貼壁細(xì)胞的消化傳代;也可用于組織細(xì)胞分離的初步消化。新疆進(jìn)口胰酶牌子

品名:0.25%胰蛋白酶溶液,1X分類(lèi):細(xì)胞消化試劑規(guī)格:100ML用途:消化試劑,如胰蛋白酶,被用于將粘附細(xì)胞從其附著的表面或底物上分離和降解,以及將組織進(jìn)行游離,以開(kāi)展原代細(xì)胞培養(yǎng)。產(chǎn)品包括2種常用濃度的γ照射豬胰蛋白酶(1:250)以及一種新型非哺乳動(dòng)物豬胰蛋白酶替代品,稱為T(mén)hermoScientificHyQTaseTM.HyQTase是一種蛋白水解酶和膠原水解酶的混合超濾溶液,可以快速消化,同時(shí)不損傷細(xì)胞。其非哺乳動(dòng)物配方使它適用于無(wú)血清應(yīng)用,不需要失效或?qū)γ敢种苿?。此試劑可使?xì)胞被快速分離,形成單細(xì)胞懸浮物,保持高細(xì)胞活力,并使傳代時(shí)的變異減至**小。新疆進(jìn)口胰酶牌子