PBS緩沖液是實(shí)驗(yàn)室中常用的緩沖液之一,不管是免疫組化實(shí)驗(yàn)還是細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn),都經(jīng)常會(huì)用到PBS緩沖液。以下是我整理的一些PBS緩沖液的配置方法。PBS緩沖液的配制:方法一:含0.05%吐溫-20的pH7.4的磷酸鹽緩沖液(簡(jiǎn)稱為PBS-T)配制方法為:1.稱取磷酸二氫鉀(KH2PO4),磷酸氫二鈉(Na2HPO4·12H2O),氯化鈉(NaCl),氯化鉀(KCl),吐溫-20,加水;2.PBS:PhosphateBufferedSaline;3.PBS1L配方pH7.4:磷酸二氫鉀(KH2PO4):0.27g;4.磷酸氫二鈉(Na2HPO4):1.42g;5.氯化鈉(NaCl):8g;6.氯化鉀(KCl)0.2g;7.加去離子水約800mL充分?jǐn)嚢枞芙猓缓蠹尤霛恹}酸調(diào)pH至7.4,***定容到1L;磷酸緩沖液,它的緩沖能力怎么理解?重慶有酚紅平衡鹽溶液包括
方法二:母液的配制:0.2MNa2HPO4:稱取71.6gNa2HPO4-12H2O,溶于1000ml水0.2MNaH2PO4:稱取2gNaH2PO4-2H2O,溶于1000ml水各種濃度PB(pH=7.4)的配制:先配0.2MPB(pH=7.4,100ml):取19ml0.2mol/L的NaH2PO4,81ml0.2mol/L的Na2HPO4,即可。然后只需將0.2MPB(pH=7.4)按相應(yīng)比例適當(dāng)稀釋即可,如:0.1MPB(PH=7.4):取500ml0.2MPB,加水稀釋至1000ml即可。如:0.01MPB(PH=7.4):取50ml0.2MPB,加水稀釋至1000ml即可。0.02MPB(PH=7.4):取100ml0.2MPB,加水稀釋至1000ml即可。若需要NaCl的話,加入NaCl至0.9%(g/100ml)即可。江蘇平衡鹽溶液價(jià)目表由于 HBSS 反應(yīng)性低,常用于大氣條件下。
方法三:用于細(xì)胞培養(yǎng)的PBS需含有氯化鉀稱取8gNaC1、0.2gKCI、1.44gNa2HPO4和0.24gKH2PO4,溶于800ml蒸餾水中,用HCI調(diào)節(jié)溶液的pH值至7.4,***加蒸餾水定容至1L即可0.01M。方法四:PBS緩沖液稱取8gNaC1、0.2gKCI、1.44gNa2HPO4和0.24gKH2PO4,溶于900ml雙蒸水中,用鹽酸調(diào)pH值至7.4,加水定容至1L,常溫保存?zhèn)溆谩?
另:其它各種另PH值的0.2MPB(100ml)配方:pH0.2MNaH2PO4(ml)0.2MNa2HPO4(ml)5.793.56.55.89285.990106.087.712.36.185156.281.518.56.377.522.56.473.526.56.568.531.56.662.537.56.756.543.56.851496.945557.038627.133677.228727.323777.419ml81ml7.516847.613877.710.50.57.88.591.57.97938.05.394.7
平衡鹽溶液(BSS)是從Ringer生理鹽水發(fā)展起來(lái)的,主要由無(wú)機(jī)鹽和葡萄糖組成。BSS中的無(wú)機(jī)離子是細(xì)胞生命的必要成分,在維持滲透壓、緩沖作用和調(diào)節(jié)溶液pH方面也起著重要作用。另外,Ca2+、Mg2+能為酶系統(tǒng)的活化提供條件,也是細(xì)胞膜的重要組成成分。葡萄糖等為細(xì)胞代謝提供能量。作為核酸分子的合成也需要S,P等作為基質(zhì)。BSS內(nèi)還含有少量的酚磺酞(酚紅),作為pH變化的指示劑,溶液變酸性時(shí)呈黃色,變堿性時(shí)呈紫紅色,中性時(shí)呈桃紅色,以此來(lái)觀察和判定培養(yǎng)液pH的變化。在細(xì)胞培養(yǎng)中,BSS主要有如下用途:①作為配制培養(yǎng)基的基礎(chǔ)溶液:如用Hanks液配制水解乳蛋白培養(yǎng)基等;②配制各種試液:如配“胰酶”消化液;③用于洗滌組織和細(xì)胞。目前**常用的BSS是Hanks液、Earle液和PBS等。(一)BSS的配制要求1.要防止鈣的沉淀BSS配制時(shí)應(yīng)將其中的CaCl2單獨(dú)配制,并將平衡鹽溶液配成濃縮液,使其在稀釋前不讓Ca2+與P042-和C032-接觸,以免產(chǎn)生不溶解的CaP04和CaCO3。避免產(chǎn)生CaC03的方法是將NaHC03單獨(dú)配制,使用時(shí)現(xiàn)加。2.要有良好的緩沖作用Hanks液和Earle液都需一定量的C02平衡。因此應(yīng)將瓶蓋(橡皮塞)蓋緊,以防瓶中CO2逃逸,致使溶液pH增高。pH調(diào)節(jié)液?jiǎn)为?dú)滅菌時(shí)。 平衡鹽溶液是生物學(xué)中經(jīng)常使用的緩沖鹽溶液,用于分子克隆、細(xì)胞培養(yǎng)及其檢測(cè)等實(shí)驗(yàn)。
酸堿平衡鹽溶液是什么呢?
1.磷酸鹽緩沖液磷酸鹽緩沖液是一種常用的酸堿平衡鹽溶液。它由二氫磷酸(H2PO4-)和氫磷酸根離子(HPO42-)組成,其pH值可在2.1-7.4范圍內(nèi)調(diào)節(jié)。磷酸鹽緩沖液可用于生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中維持細(xì)胞培養(yǎng)基和DNA電泳緩沖劑的pH值穩(wěn)定。
2.Tris-HCl緩沖液Tris-HCl緩沖液是由三羥甲基氨基甲烷(Tris)和氯化氫(HCl)組成的緩沖體系。其pH值可在7.0-9.0范圍內(nèi)調(diào)節(jié)。Tris-HCl緩沖液可用于生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中維持DNA電泳緩沖劑的pH值穩(wěn)定。 磷酸鹽緩沖液是一種平衡鹽溶液。安徽DPBS平衡鹽溶液介紹
在細(xì)胞培養(yǎng)中有些情況下可以用生理鹽水代替PBS,但不建議替換。重慶有酚紅平衡鹽溶液包括
HBSS緩沖液和PBS的主要區(qū)別在于它們的成分和用途。??12 ?成分差異?:?HBSS?:主要成分包括NaCl、KCl、KH2PO4、Na2HPO4、NaHCO3、葡萄糖等,有時(shí)還包含CaCl2、MgCl2等。它還含有碳酸氫鹽成分和酚紅作為pH指示劑,適用于細(xì)胞分離或培養(yǎng)中維持滲透壓、保持pH穩(wěn)定、提供簡(jiǎn)單營(yíng)養(yǎng)等作用。?PBS?:主要成分包括NaCl、KCl、Na2HPO4、KH2PO4,有時(shí)也稱為Dulbecco's Phosphate-Buffered Saline (DPBS),與HBSS相比,PBS不含有碳酸氫鹽成分,也不含CaCl2、MgCl2等。 ?用途差異?:?HBSS?:常用于細(xì)胞分離或培養(yǎng)中,用于組織塊的漂洗、細(xì)胞的洗滌、細(xì)胞或組織的運(yùn)輸、其他試劑的配制以及作為細(xì)胞計(jì)數(shù)的稀釋液等。?PBS?:主要用于生物學(xué)、生物化學(xué)研究中作為漂洗液、凍存液和培養(yǎng)液,特別是在胚胎學(xué)方面的研究。綜上所述,HBSS和PBS在成分和用途上存在明顯差異,選擇使用哪一種緩沖液應(yīng)根據(jù)具體的實(shí)驗(yàn)需求和細(xì)胞類型來(lái)決定。重慶有酚紅平衡鹽溶液包括