6.磷酸酶EDTA相對不溶。可以用磁力攪拌器攪拌,或?qū)⑵渲糜?度的冰箱中,溶解后過濾并**。7.可配備2-3倍血漿酶,節(jié)省時間和過濾器。使用時,請對PBS消毒。8.將儲存溶液儲存在-20°C的冰箱中,然后將溶液儲存在4°C。使用時,請勿將其放在27°C的水浴中,因為這會使自由基酶迅速無法使用。使用前放置一次。是的,因為添加的數(shù)量很少,因此通常不會凍結(jié)細胞。9.在消化過程中,向培養(yǎng)瓶中加入適量的胰酶。個人經(jīng)驗,一般在10cm培養(yǎng)皿中加。加入后,立即搖動培養(yǎng)皿蓋住胰酶。一旦充滿,用負壓吸引多余的胰酶排出,將其加入37度培養(yǎng)箱中進行消化。10.請注意,過量的胰酶對細胞有害,而過量的EDTA也會影響粘附,因此無需將細胞浸入血漿酶中進行消化。11.磷酸酶37具有**佳的消化作用,并具有在37度以下消化的能力。在消化過程中,甚至不需要將一些易于消化的細胞放入培養(yǎng)箱中。請注意,它不能消化太長時間。四、實驗所需試劑清單:序列產(chǎn)品名貨號CAS備注11000ul藍吸頭FT-10002氫氧化鈉JT86501310-73-23PBSHC14884EDTABSH-59-55螯合樹脂chelex100SS6072以上為EDTA-胰蛋白酶的配制,實驗請選用高質(zhì)量試劑。胰酶PH的變化是肉眼可觀察到的。江蘇重組胰酶市場報價
淡黃色的胰酶溶液能放心使用嗎?能,對于胰酶呈黃色的問題,不同品牌也都對此現(xiàn)象進行了測試實驗。變色的胰酶同樣能很好的用于細胞的解離,請放心使用。細胞消化時,胰酶不去除對細胞的影響?細胞消化時,如果消化液中只有胰酶,不含EDTA,不去除是沒有問題的。如果消化液中含有胰酶和EDTA,比較好去除。EDTA是一種化學(xué)螯合劑,主要作用在于能螯合Ca、Mg離子,使細胞分離。但EDTA不能被血清中和,消化后要徹底清洗去除,否則細胞易脫壁。胰酶胰酶和EDTA聯(lián)合使用可提高消化效率,所以常二者合用。胰酶的保存中國臺灣國產(chǎn)胰酶供應(yīng)商胰蛋白酶屬于其中一種活性成分,主要用于促進消化吸收。
一、EDTA-胰蛋白酶的配制實驗簡介:EDTA-胰蛋白酶的配制實驗所需的EDTA是乙二胺四乙酸,一種金屬螯合劑。它通常與胰蛋白酶結(jié)合使用。原因是鈣和鎂等金屬離子會降低胰酶的活性,因此在使用胰蛋白酶消化液時應(yīng)添加EDTA。它可以螯合這些離子并消除胰酶的**作用。二、EDTA-胰蛋白酶的配制實驗所需材料及試劑:PBS,氫氧化鈉,EDTA,三、EDTA-胰蛋白酶的配制實驗步驟:1.磷酸酶的質(zhì)量/體積比為%,即將。注意,盡量不要用水溶解,因為必須保持滲透壓。%%,可根據(jù)細胞消化的難度進行調(diào)整。不需要EDTA,可以省略易于消化的細胞。EDTA對細胞粘附有影響,因此應(yīng)大量使用。如果影響粘附,則必須將其用于消化,在用完全培養(yǎng)基終止消化后,離心并棄去上清液,然后添加完全培養(yǎng)基以進行培養(yǎng)以除去EDTA。如果不影響附著力,則不要離心。。用磷酸酶稀釋PBS。4.請注意,血清可以阻止血漿酶的作用,但不能阻止EDTA。對于某些細胞,有必要在消化后停止離心。5.當(dāng)pH約為8時,磷酸酶和EDTA**易溶解。在制備過程中,您可以先滴幾滴氫氧化鈉以將pH調(diào)整為8。請注意,磷酸酶會使溶液變酸,因此您應(yīng)隨時溶解時測量pH值。調(diào)整。請注意,不應(yīng)添加過量的氫氧化鈉,否則電池將無法承受堿的作用。
在組織細胞的體外培養(yǎng)和原代細胞培養(yǎng)中的組織細胞分散(將組織塊制備成單個細胞懸液)以及傳代細胞培養(yǎng)中,貼壁生長細胞的消化分散均要使用組織細胞消化液。常用的消化液為胰蛋白酶(Trypsin),EDTA等。胰蛋白酶是一種絲氨酸水解酶,它能把多肽鏈中賴氨酸和精氨酸殘基中的羧基側(cè)切段,水解細胞間的蛋白質(zhì),破壞細胞間的連接,從而使組織或貼壁細胞離散成單個細胞。胰酶分散細胞的活性與組織或細胞的特性、胰酶濃度、溫度和作用時間有關(guān),在℃時,胰酶的作用能力**強,因此使用胰酶時,應(yīng)把握好濃度、溫度和時間,以免消化過度造成細胞損傷。一般常用胰酶的工作濃度為,而半貼壁細胞或?qū)σ让该舾械募毎2捎玫蜐舛龋ǎ┑囊让高M行細胞消化。由于EDTA能夠螯合Ca2+和Mg2+,從而破壞細胞連接促進細胞的解離,因此在胰酶溶液中常常會加入一定量的EDTA混合使用,以增強解離效果。但是對于EDTA可能會干擾后續(xù)的測試分析時,推薦選擇不含EDTA的消化液。本產(chǎn)品含有(Trypsin),溶于無鈣鎂平衡鹽溶液中,經(jīng)過濾除菌,可以直接用于培養(yǎng)細胞和組織的消化。為改良型,除了具有方便快速、穩(wěn)定安全、細胞狀態(tài)好等特點之外,消化時間更短,消化效果媲美進口產(chǎn)品,特別適用于難消化的細胞。 在使用胰酶細胞消化液的過程中要特別注意避免消化液被細菌污染。
胰酶和雙抗怎么保存?
胰酶和雙抗怎么保存?
胰酶和雙抗怎么保存?
雙抗的保存:雙抗通常情況下在-20°C保存一年。由于該試劑在4°C下長期存放是不穩(wěn)定的,分裝后在-20°C下避光保存。青霉素在2-8°C存放時間不應(yīng)超過4天,鏈霉素相對穩(wěn)定一點,在2-8°C可以存放30天左右。雙抗從凍融后基本成分已開始降解。胰酶的保存:胰酶可在-20°C下保存一年。隨著時間延長,胰酶的消化能力減弱。胰酶可分裝凍存,在使用前從-20°C冰箱取出。盡量避免在4C長期保存。 細胞消化時,胰酶不去除對細胞的影響?陜西國產(chǎn)胰酶報價
胰酶用0.05%還是0.25%的?需不需要含酚紅的?江蘇重組胰酶市場報價
產(chǎn)品簡介產(chǎn)品簡介:產(chǎn)品編號產(chǎn)品名稱產(chǎn)品包裝產(chǎn)品價格C0201胰酶細胞消化液100ml碧云天生產(chǎn)的胰酶細胞消化液(Trypsin-EDTASolution)含。該消化液經(jīng)過過濾**,可以直接用于培養(yǎng)細胞的消化,或者一些**的消化。本胰酶細胞消化液具有方便快速的特點,通常室溫消化1分鐘左右就可以消化下大多數(shù)貼壁細胞。包裝清單:產(chǎn)品編號產(chǎn)品名稱包裝C0201胰酶細胞消化液100ml―說明書1份保存條件:4℃保存,一年有效。注意事項:在使用胰酶細胞消化液的過程中要特別注意避免消化液被**污染。胰酶細胞消化液消化細胞時間不宜過長,否則細胞鋪板后生長狀況會較差。為了您的安全和**,請穿實驗服并戴一次性手套操作。使用說明使用說明:1.貼壁細胞的消化:a)吸去培養(yǎng)液,用無菌的PBS、Hanks液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。b)加入少量胰酶細胞消化液,略蓋過細胞即可,室溫放置30秒至2分鐘。不同的細胞消化時間有所不同。c)顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化;或者用***吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來。此時吸除胰酶細胞消化液。加入含血清的完全細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。d)如果發(fā)現(xiàn)消化不足。江蘇重組胰酶市場報價