為什么緩沖溶液的ph值在4.75~7.25之間？

緩沖溶液的緩沖范圍在PKa±16531=4.75±1之間。水合氫離子的濃度取決于弱酸與其共扼堿的濃度比。當(dāng)加入少量強堿時，酸被中和，導(dǎo)致了氫氧根離子在溶液中很少累積。從而C（A一）的濃度增加，C（HA）的濃度減少?？梢钥吹?，雖然加入了強堿，但是溶液里的氫氧根離子變化很少，同時，濃度較大，相對的變化小，兩者比值幾乎無變化，因此根據(jù)公式，水合氫離子的濃度變化很小。所以緩沖溶液的ph值在4.75~7.25 緩沖液是一種能在加入少量酸或堿時抵抗pH改變的溶液。天津PBS緩沖液包括什么

    從中選取包被抗體濃度和酶標(biāo)抗體的稀釋度。為了進(jìn)一步節(jié)省試劑，可以此濃度為基點，縮小間距再進(jìn)一步做棋盤滴定。?2測定方法的標(biāo)準(zhǔn)化?2．1加樣?????ELISA中除了包被外，一般需進(jìn)行96孔加樣。定性測定中有時不強調(diào)加樣量的準(zhǔn)確性。例如規(guī)定為加樣1滴，如不具備相當(dāng)?shù)臈l件，要盡量使用相同口徑的滴管，保持準(zhǔn)確的加樣姿勢，使每滴液體的體積基本相同。在定量測定中，加樣量應(yīng)力求準(zhǔn)確，**好采用量程準(zhǔn)確的微量移液器。加樣時應(yīng)將液體加在孔底，不要加在孔壁上部，避免出現(xiàn)氣泡。?2．2保溫?????在ELISA中，一般在加標(biāo)本和結(jié)合物后，反應(yīng)的溫度和時間應(yīng)按規(guī)定的要求，保溫容器**好是水浴箱，可使溫度迅速平衡。各ELISA板不應(yīng)疊在一起。為避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋，或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕紗布的濕盒中。如用保溫箱，空濕盒應(yīng)預(yù)先放在其，以平衡溫度。?2．3洗滌?????洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟，但卻是決定實驗成敗的關(guān)鍵。在標(biāo)本和結(jié)合物的稀釋液和洗滌液中加入聚山梨酯一類物質(zhì)即避免非特異性吸附，在ELISA中**為常用。ELISA板的洗滌一般可采用以下方法：吸干孑L內(nèi)反應(yīng)液；將洗滌液注滿板孔；發(fā)表評論請自覺遵守互聯(lián)網(wǎng)相關(guān)的政策法規(guī)，嚴(yán)禁發(fā)布***、**、反動的言論。上海無酚紅緩沖液代理商緩沖體系來抵抗在代謝過程中出現(xiàn)的pH變化.

只要知道緩沖對的PH值，和要配制的緩沖液的pH值（及要求的緩沖液總濃度），就能按公式計算[鹽]和[酸]的量。這個算法涉及對數(shù)換算，較麻煩，前人為減少后人的計算麻煩，已為我們總結(jié)出pH值與緩沖液對離子用量的關(guān)系并列出了表格。只要我們知道要配制的緩沖液的pH，經(jīng)查表便可計算出所用緩沖劑的比例和用量。例如配制100nm pH5.8濃度為0.1M磷酸緩沖液。經(jīng)查表知pH5.8濃度為0.2M Na2HPO48.0毫升（1M=1 mol/L），而0.2M Na2HPO492.0毫升。依此可推論出配制100ml 0.1M的磷酸緩沖液需要0.1M Na2HPO48.0毫升，而0.1M Na2HPO4需要92.0毫升。計算好后，按計算結(jié)果準(zhǔn)確稱好固態(tài)化學(xué)成分，放于燒杯中，加少量蒸餾水溶解，轉(zhuǎn)移入100ml容量瓶，加蒸餾水至刻度，搖勻，就能得到所需的緩沖液。各種緩沖溶液的配制，均按表格按比例混合，某些試劑，必須標(biāo)定配成準(zhǔn)確濃度才能進(jìn)行，如醋酸、氫氧化鈉等。另外，所有緩沖溶劑的配制計量都能從以上的算式準(zhǔn)確獲得。 [2]

做ELISA確定抗原**佳包被濃度，做方陣滴定具體怎么做呢？選擇好一份已知為陽性和陰性背景的標(biāo)本，將你的抗原用1*CBPH=*PBPH=（8個條件）后加入96孔板每孔100ul。（一般包被濃度100ng抗原或抗體/孔，**優(yōu)包被條件需進(jìn)行試驗選擇）4度過夜取出后甩干，加入20%NBS封閉每孔200ul。37度2h熱封，甩去后拍干即可。將你HRP或AP標(biāo)記的抗原或二抗用酶標(biāo)稀釋液進(jìn)行稀釋（倍比稀釋4個梯度）即可。棋盤滴定就是板酶交叉,同時帶上陽性、陰性通過試驗確定**佳P/N的包被搭配E的試驗2．抗原和抗體**佳工作濃度的確定?抗原抗體反應(yīng)要求在**適比例條件下進(jìn)行，ELISA反應(yīng)試劑多，其工作濃度不同對結(jié)果影響較大，因此必須對包被抗原(抗體)和酶標(biāo)抗體(抗原)進(jìn)行**佳工作濃度的滴定和選擇，以達(dá)到**佳的測定條件。?1）方陣(棋盤)滴定法選擇包被抗原的工作濃度用包被液將抗原作一系列稀釋。緩沖液使用中的注意事項。

    如何計算緩沖溶液的有效PH范圍電離平衡常數(shù)的負(fù)對數(shù)加減1之間。即pK±1之間。例如以醋酸/醋酸鹽為共軛酸堿對的緩沖溶液的有效緩沖范圍是：PKa±1=±1之間。即。緩沖溶液是無機化學(xué)及分析化學(xué)中的重要概念，緩沖溶液是指具有能夠維持PH相對穩(wěn)定性能的溶液。pH值在一定的范圍內(nèi)不因稀釋或外加少量的酸或堿而發(fā)生***的變化，緩沖溶液依據(jù)共軛酸堿對及其物質(zhì)的量不同而具有不同的pH值和緩沖容量。擴展資料：緩沖液的pH值與該酸的電離平衡常數(shù)Ka及鹽和酸的濃度有關(guān)。弱酸的pKa值衡定，但酸和鹽的比例不同時，就會得到不同的pH值。酸和鹽濃度相等時，溶液的pH值與PKa值相同。酸和鹽濃度等比例增減時，溶液的pH值不變。酸和鹽濃度相等時，緩沖液的緩沖效率為比較高，比例相差越大，緩沖效率越低，緩沖液的一般有效緩沖范圍為pH=pKa±1,pOH=pKb±1。在絡(luò)合滴定和分光光度法等許多反應(yīng)里都要求溶液的pH值保持在一個范圍內(nèi)，以保證指示劑的變色和顯色劑的顯色等，這些條件都是通過加入一定量的緩沖溶液達(dá)到的，所以緩沖溶液是分析測試中經(jīng)常需要的一種試劑。采用電位滴定法測定外加酸或堿對不同配比同一種緩沖溶液的滴定曲線。 緩沖液（Buffer solution）通常是由弱酸及其共軛堿或弱堿及其共軛酸緩沖對所組成的溶液。天津PBS緩沖液包括什么

pH計校準(zhǔn)的正確順序是:先用pH7.0緩沖溶液校準(zhǔn),再用pH4.0或pH10.0緩沖溶液校準(zhǔn)。天津PBS緩沖液包括什么

pH標(biāo)準(zhǔn)液如何正確使用及其主要作用

pH標(biāo)準(zhǔn)液是一種能使pH值保持穩(wěn)定的溶液。如果向這種溶液中加入少量的酸或堿，或者在溶液中的化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生少量的酸或堿，以及將溶液適當(dāng)稀釋，這個溶液的pH值基本上穩(wěn)定不變，這種能對抗少量酸堿或大或稀釋，而使pH值不變化的溶液就稱為緩沖溶液。   pH標(biāo)準(zhǔn)液的如何正確使用：  1、復(fù)合電極不用時，可充分浸泡溶液中。切忌用洗滌液或其他吸水性試劑1/4浸洗。   2、使用前，檢查玻璃電極前端的球泡。正常情況下，電極應(yīng)該透明而無裂紋；球PH計標(biāo)準(zhǔn)液配制泡內(nèi)要充滿溶液，不能有氣泡存在。   3、測量濃度較大的溶液時，盡量縮短測量時間，用后仔細(xì)清洗，防止被測液粘附在電極上而污染電極。   4、清洗電極后，不要用濾紙擦拭玻璃膜，而應(yīng)用濾紙吸干，避免損壞玻璃薄膜、防止交叉污染，影響測量精度。   5.測量中注意電極的銀一氯化銀內(nèi)參比電極應(yīng)浸入到球泡內(nèi)氯化物緩沖溶液中，避免電計顯示部分出現(xiàn)數(shù)字亂跳現(xiàn)象。使用時，注意將電極輕輕甩幾下。 天津PBS緩沖液包括什么