胰蛋白酶廣泛應(yīng)用于食品加工、制藥、生化檢測和制革等多種行業(yè)。在制藥工業(yè)中,胰蛋白酶可使天然蛋白、變性蛋白、纖維蛋白和黏蛋白等水解為多肽或氨基酸,以達(dá)到***的目的。胰蛋白酶生物藥用于***呼吸道疾病,可以溶解黏痰和膿性痰,還可以***毒蛇咬傷等。由于血清中含有非特異性抑肽酶,故胰蛋白酶不會消化正常組織,而能分解膿性痰等黏性分泌物,促進(jìn)***、化療藥物向病灶滲透。在食品工業(yè)中,胰蛋白酶主要用于水解價值較高的動植物性蛋白等,以牛乳為例,利用胰蛋白酶水解其中的酪蛋白、α-乳白蛋白和β-乳球蛋白等致敏原,能生產(chǎn)低敏配方奶粉。在制革工業(yè)中,胰蛋白酶用于皮革脫灰軟化,也可以利用胰蛋白酶提取具有良好生物相容性和生物降解性的膠原蛋白。[1]胰蛋白酶消化液都由已經(jīng)過豬細(xì)小病毒檢測和支原體檢測的原料制備。西藏國產(chǎn)胰酶價格信息
(不含EDTA含酚紅)性質(zhì)、用途與生產(chǎn)工藝背景胰酶又名胰醇素、胰液素。白色或淡黃色無定形粉末。系從各種動物胰臟制取的混合物,主要是蛋白酶、脂酶、淀粉酶。溶于水呈微渾溶液。不溶于醇、醚。有引濕性,遇酸、堿及熱即喪失活力,水溶液遇酸、熱、重金屬或單寧酸時產(chǎn)生沉淀。為助消化藥,用于缺乏胰液的***癥。也用于皮革工業(yè)和紡織印染,主要用于酶法脫毛。將絞碎的豬胰漿經(jīng)***、提取、沉淀、脫脂、干燥、粉碎而得。簡介(不含EDTA含酚紅)為細(xì)胞培養(yǎng)基,1.不含EDTA含酚紅:含酚紅,(1:250)溶于HBSS溶液,不含鈣鎂。-20℃保存。胰(不含EDTA含酚紅)含,不含EDTA和酚紅,溶于無鈣鎂平衡鹽溶液中,經(jīng)過濾除菌,可以直接用于培養(yǎng)細(xì)胞和組織的消化,通常室溫消化2分鐘左右就消化下大多數(shù)貼壁細(xì)胞。使用方法(不含EDTA含酚紅)使用說明---貼壁細(xì)胞Chemicalbook的消化:a)吸去培養(yǎng)液,用無菌的PBS、Hanks液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。b)加入少量胰蛋白酶消化液,蓋過細(xì)胞即可,室溫放置1-2分鐘。不同的細(xì)胞消化時間有所不同,對于貼壁牢固的細(xì)胞可適當(dāng)延長消化時間。c)顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化。 甘肅國產(chǎn)胰酶哪家便宜消化液經(jīng)過過濾除菌,可以直接用于培養(yǎng)細(xì)胞的消化,或者一些組織的消化。
胰酶操作步驟:
(*供參考) :1. 吸取培養(yǎng)基,用無菌的PBS、Hanks液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以除去殘余的血清。2. 加入適量的胰蛋白酶消化液,略蓋過細(xì)胞即可。根據(jù)細(xì)胞的特性可以增加或減少胰酶用量,室溫放置30秒至2分鐘。(不同的細(xì)胞消化時間有所不同)3. 顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化呈白茫狀;或者用***吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來。4. 此時吸除胰酶細(xì)胞消化液。加入含血清的完全細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實驗。如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入胰酶細(xì)胞消化液重新消化。
對一般細(xì)胞0.25%胰酶(胰蛋白酶,Trypsin)配方:100mlPBS,0.25g胰酶步驟:1先配100mlPBS(1000mlPBS:8.0gNaCl,3.4785gPO4HNa2·12H2O/2.9gPO4HNa2,0.2gKCl,0.2gPO4H2K溶于1000ml蒸餾水)2稱胰酶0.25g3加入PBS中,低速攪拌〈4h冰浴中,或者4℃過夜低速攪拌0.5h冰浴中4調(diào)PH7.45仍在冰浴中6過濾,分裝,-20℃保存,4℃短期內(nèi)用完tip:低速很重要,機械攪拌對酶是一種沖擊,如果起沫,酶就變性了。低溫,防止酶失活對難消化的細(xì)胞:在上述配方中,加入0.02g的EDTA(0.02%)tip:因為EDTA可以絡(luò)合Ca2,增加消化效力胰酶使用的時候要注意什么?
6.磷酸酶EDTA相對不溶??梢杂么帕嚢杵鲾嚢瑁?qū)⑵渲糜?度的冰箱中,溶解后過濾并**。7.可配備2-3倍血漿酶,節(jié)省時間和過濾器。使用時,請對PBS消毒。8.將儲存溶液儲存在-20°C的冰箱中,然后將溶液儲存在4°C。使用時,請勿將其放在27°C的水浴中,因為這會使自由基酶迅速無法使用。使用前放置一次。是的,因為添加的數(shù)量很少,因此通常不會凍結(jié)細(xì)胞。9.在消化過程中,向培養(yǎng)瓶中加入適量的胰酶。個人經(jīng)驗,一般在10cm培養(yǎng)皿中加。加入后,立即搖動培養(yǎng)皿蓋住胰酶。一旦充滿,用負(fù)壓吸引多余的胰酶排出,將其加入37度培養(yǎng)箱中進(jìn)行消化。10.請注意,過量的胰酶對細(xì)胞有害,而過量的EDTA也會影響粘附,因此無需將細(xì)胞浸入血漿酶中進(jìn)行消化。11.磷酸酶37具有**佳的消化作用,并具有在37度以下消化的能力。在消化過程中,甚至不需要將一些易于消化的細(xì)胞放入培養(yǎng)箱中。請注意,它不能消化太長時間。四、實驗所需試劑清單:序列產(chǎn)品名貨號CAS備注11000ul藍(lán)吸頭FT-10002氫氧化鈉JT86501310-73-23PBSHC14884EDTABSH-59-55螯合樹脂chelex100SS6072以上為EDTA-胰蛋白酶的配制,實驗請選用高質(zhì)量試劑。胰酶的使用濃度是多少?貴州重組胰酶介紹
胰酶是一種復(fù)合消化酶制劑。西藏國產(chǎn)胰酶價格信息
一、EDTA-胰蛋白酶的配制實驗簡介:EDTA-胰蛋白酶的配制實驗所需的EDTA是乙二胺四乙酸,一種金屬螯合劑。它通常與胰蛋白酶結(jié)合使用。原因是鈣和鎂等金屬離子會降低胰酶的活性,因此在使用胰蛋白酶消化液時應(yīng)添加EDTA。它可以螯合這些離子并消除胰酶的**作用。二、EDTA-胰蛋白酶的配制實驗所需材料及試劑:PBS,氫氧化鈉,EDTA,三、EDTA-胰蛋白酶的配制實驗步驟:1.磷酸酶的質(zhì)量/體積比為%,即將。注意,盡量不要用水溶解,因為必須保持滲透壓。%%,可根據(jù)細(xì)胞消化的難度進(jìn)行調(diào)整。不需要EDTA,可以省略易于消化的細(xì)胞。EDTA對細(xì)胞粘附有影響,因此應(yīng)大量使用。如果影響粘附,則必須將其用于消化,在用完全培養(yǎng)基終止消化后,離心并棄去上清液,然后添加完全培養(yǎng)基以進(jìn)行培養(yǎng)以除去EDTA。如果不影響附著力,則不要離心。。用磷酸酶稀釋PBS。4.請注意,血清可以阻止血漿酶的作用,但不能阻止EDTA。對于某些細(xì)胞,有必要在消化后停止離心。5.當(dāng)pH約為8時,磷酸酶和EDTA**易溶解。在制備過程中,您可以先滴幾滴氫氧化鈉以將pH調(diào)整為8。請注意,磷酸酶會使溶液變酸,因此您應(yīng)隨時溶解時測量pH值。調(diào)整。請注意,不應(yīng)添加過量的氫氧化鈉,否則電池將無法承受堿的作用。西藏國產(chǎn)胰酶價格信息