ph值測定常用的標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液有哪幾種
ph值測定常用的標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液草酸鹽標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液酒石酸鹽標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液苯二甲酸氫鹽標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液硼酸鹽標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液氫氧化鈣標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液在一定程度上能抵抗外加少量酸、堿或稀釋,而保持溶液pH值基本不變的作用稱為緩沖作用。具有緩沖作用的溶液稱為緩沖溶液。緩沖溶液性質(zhì)a.抗酸/堿,抗稀釋作用因為緩沖溶液中具有抗酸成分和抗堿成分,所以加入少量強(qiáng)酸或強(qiáng)堿,其pH值基本上是不變的。稀釋緩沖溶液時,酸和堿的濃度比值不改變,適當(dāng)稀釋不影響其pH值。b.緩沖容量緩沖容量是衡量緩沖溶液緩沖能力大小的尺度。緩沖容量的大小與緩沖組分濃度和緩沖組分的比值有關(guān)。緩沖組分濃度越大,緩沖容量越大;緩沖組分比值為1時,緩沖容量比較大。 緩沖溶液是無機(jī)化學(xué)及分析化學(xué)中的重要概念。廣東PBS緩沖液價格
ph值緩沖液常用三種
pH酸堿度常用的三種標(biāo)準(zhǔn)溶液:pH分別為4.0、7.0和10.0。標(biāo)準(zhǔn)緩沖液(應(yīng)選擇與供試液pH值接近的標(biāo)準(zhǔn)緩沖液),目前標(biāo)準(zhǔn)溶液有7種,在我國一般使用以下3種溶液:(pH值在25℃時)。1.鄰苯二甲酸氫鉀(KHC8H4O4)pH4.003;0.05M。2.混合磷酸鹽(Na2HPO4):磷酸二氫鉀和磷酸氫二鈉混合鹽溶液pH6.864;0.025M3.硼砂(Na2B4O7·l0H2O)pH9.182;0.01M。三種標(biāo)準(zhǔn)緩沖液的配置方法:1.pH4,鄰苯二甲酸氫鉀標(biāo)準(zhǔn)緩沖液:精密稱取在115±5℃干燥2~3小時的鄰苯二甲酸氫鉀[KHC8H4O4]10.12g,加水使溶解并稀釋至1000ml。2.pH7,磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)緩沖液(pH7.4):精密稱取在115±5℃干燥2~3小時的無水磷酸氫二鈉4.303g與磷酸二氫鉀1.179g,加水使溶解并稀釋至1000ml。3.pH9,硼砂標(biāo)準(zhǔn)緩沖液:精密稱取硼砂[Na2B4O7·10H2O]3.80g(注意:避免風(fēng)化),加水使溶解并稀釋至1000ml,置聚乙烯塑料瓶中,密塞,避免與空氣中二氧化碳接觸。 河北無酚紅緩沖液價格對比如果加入的酸或堿量過多,緩沖溶液的緩沖能力會降低,pH值會發(fā)生變化。
1:50~l:800)后,按行進(jìn)行包被、洗滌。按列分別加入用稀釋液1:100稀釋的強(qiáng)陽性、弱陽性、陰性參考血清及稀釋液(作空白對照),保溫,洗滌。加工作濃度酶標(biāo)抗體,洗滌,加底物顯色,加酸終止反應(yīng)后讀取A值。選擇強(qiáng)陽性參考血清A值;為0.8左右,陰性參考血清A值<0.1的包被抗原稀釋度為工作濃度。?方陣(棋盤)法選擇包被抗體和酶標(biāo)抗體的工作濃度將抗體用包被液稀釋為10mg/L、lmg/L、/L三個濃度按行包被,每一個濃度包被三行(每行3孔),分別在每個濃度包被的***、二、三行中分別加入強(qiáng)陽性抗原,弱陽性抗原和陰性對照,將酶標(biāo)抗抗體用稀釋液稀釋為1:l000、l:5000、l:10000三個濃度,分別加入每個濃度包被的***、二、三列中。加底物顯色,加酸終止反應(yīng),分別讀取A值。以強(qiáng)陽性抗原液A值在,陰性參考A值<**適條件。據(jù)此選擇包被抗體和酶標(biāo)抗體的**佳工作濃度。?二、ELISA**適工作濃度的選擇及標(biāo)準(zhǔn)化操作1**適工作濃度的選擇?1.1間接法測抗體?????酶標(biāo)抗體工作濃度的選擇:①用IgG進(jìn)行包被,洗滌。②將酶標(biāo)IgG用稀釋液作一系列稀釋后分別加入已包被的孔中,保溫、洗滌。③加酸終止反應(yīng)后,讀取吸光度(A)。讀取A值在1.0時的酶標(biāo)抗體稀釋度,作為酶標(biāo)抗體的工作濃度。
為什么緩沖溶液的ph值在4.75~7.25之間?
緩沖溶液的緩沖范圍在PKa±16531=4.75±1之間。水合氫離子的濃度取決于弱酸與其共扼堿的濃度比。當(dāng)加入少量強(qiáng)堿時,酸被中和,導(dǎo)致了氫氧根離子在溶液中很少累積。從而C(A一)的濃度增加,C(HA)的濃度減少??梢钥吹?,雖然加入了強(qiáng)堿,但是溶液里的氫氧根離子變化很少,同時,濃度較大,相對的變化小,兩者比值幾乎無變化,因此根據(jù)公式,水合氫離子的濃度變化很小。所以緩沖溶液的ph值在4.75~7.25 在生化研究工作中,常常要用到緩沖溶液來維持實驗體系的酸堿度.
PBS緩沖液的性質(zhì)和優(yōu)點4.無毒性:PBS緩沖液是一種非常安全的緩沖液,對生物樣品和細(xì)胞沒有毒性。5.維持穩(wěn)定性:PBS緩沖液能夠維持生物樣品的穩(wěn)定性,防止樣品的變性和降解。6.pH穩(wěn)定:PBS緩沖液的pH值一般在7.2-7.4之間,非常適合細(xì)胞和生物樣品的生長和保存。7.離子平衡:PBS緩沖液中的適當(dāng)離子濃度可以提供細(xì)胞所需的離子環(huán)境,維持細(xì)胞的正常生理功能。8.易于制備:PBS緩沖液的制備非常簡單,只需要將磷酸鹽和鹽溶解在適量的水中即可。緩沖液能夠提供酶所需的適pH值,這對于酶的活性至關(guān)重要。江蘇無酚紅緩沖液采購
緩沖液的濃度會影響其緩沖能力。廣東PBS緩沖液價格
實驗室使用緩沖液時的pH計或酸度計調(diào)校方法:1、在對緩沖液使用pH計進(jìn)行校正時,需要調(diào)整儀器的斜率,并將電極上部的橡膠塞撥開,將小孔暴露在外。否則,在校正過程中會產(chǎn)生負(fù)壓,導(dǎo)致溶液無法正常進(jìn)行離子交換,從而使測量數(shù)據(jù)不準(zhǔn)確。2、將電極從燒杯中取出,用濾紙將未干的水分吸干,然后將其放入裝有混合磷酸盆的燒杯中,等待大約15分鐘,然后進(jìn)行儀器的調(diào)整,設(shè)定基準(zhǔn)點。3、然后將電極放入裝有KHC8H4O4或硼砂溶液的容器中,等待15分鐘后,觀察儀器顯示的pH數(shù)值。4、校正完成后,將橡膠塞放回原位。如果暫時不使用pH計,一定要保護(hù)好它,將其放入保護(hù)套中,以延長其壽命。此外,需要注意的是pH計屬于易碎品,需要輕拿輕放。
手持式緩沖液pH計的校準(zhǔn)方法:在溫度為25度的條件下,將測試電極插入pH值為6.86的混合磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)緩沖液中,并緩慢轉(zhuǎn)動電極。可以稍微調(diào)整校正電位器,直到顯示器上的數(shù)值與標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液的pH值相同。如果將電極插入其他緩沖溶液中,如pH值為4.01的C8H5KO4或pH為9.18的硼砂標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液中,顯示的數(shù)值與緩沖液的pH值允許有一定誤差,但誤差應(yīng)在參考值范圍內(nèi)。 廣東PBS緩沖液價格