1、細胞培養(yǎng)過程中為什么要使用胰酶呢？胰酶的作用是什么？胰酶是一種蛋白酶，酶切位點是肽鏈的Lys或Arg兩個殘基的羧基端肽鏈，通過在特定位置上降解蛋白，使細胞膜上與培養(yǎng)皿壁結合處蛋白降解，從而使兩者分離。這時，細胞由于自身內部細胞骨架的張力以及培養(yǎng)液表面張力可成為球形。圖1.胰酶酶切位點2、使用胎牛血清培養(yǎng)細胞，在使用胰酶消化時發(fā)現(xiàn)血清可以終止此過程，這是什么原因？血清終止的原理其實是競爭抑制，就是用過量的牛血清中含有的蛋白和胰酶結合，使胰酶失去消化細胞蛋白的機會。3、為什么使用了胰蛋白酶消化，細胞還是成團的，這可能是什么原因導致的？①消化時間不夠②吹打力度不夠③胰酶消化液濃度不夠④細胞密度過高之后才消化傳代⑤胰酶存儲不當，或者使用了過期胰酶變色的胰酶同樣能很好的用于細胞的解離，請放心使用。遼寧國產胰酶進貨價

常用的消化酶有:胰酶：用得**多的是胰酶。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據干細胞種類、作用溫度等因素而變化很大，從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的干細胞，在37度條件下，一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于干細胞間。配制時不能用含鈣、鎂的平衡液，否則影響活性。保存于-20度。膠原酶：膠原酶是比較少用的，一般是用原代培養(yǎng)時，從組織消化下干細胞。這種方法作用溫和，對干細胞損傷較小，但是，價格也較貴。中止同樣是用血清。胰酶的質量是影響干細胞的消化的關鍵因素之一，如果配的比較標準，消化的時候就容易消化，反之就不易消化。還要在你看到消化過頭的情況下，如果干細胞下來的比較多了，這時可以連同cmf或pbs加上營養(yǎng)液一起傳。營養(yǎng)液中有血清，胰酶遇到血清就會自動終止消化，但這樣操作對干細胞是有一定的影響的。對于容易消化的干細胞，加入pbs緩沖液洗去血清或加入胰酶，先中和血清的作用（30s），棄之，再加入適量胰酶作用10s-40s（根據細胞消化的難易程度），棄之，這樣依賴殘余的胰酶就可將干細胞消化單細胞。遼寧國產胰酶進貨價適用于貼壁細胞的消化傳代；也可用于組織細胞分離的初步消化。

胰酶消化細胞的原理胰酶消化細胞是一種用來分解細胞質和細胞間物質的化學過程它可以被看成一種簡單的動力學過程，它將細胞結合部分的物質分解為其他物質，然后這些留下的物質可以用來維持細胞的高能量水平這種過程通過將脂肪、蛋白質、糖類和其它物質分解為小的離子或者原子小分子的方式來發(fā)生。胰酶是細胞分解與吸收物質的一種關鍵分子，通常有四種類型，它們是肽酶，脂水解酶，載脂蛋白酶和糖水解酶，分別可以將蛋白質、脂肪、脂蛋白和糖類物質分解為更小的離子和分子，以便細胞可以更好地吸收物質，維持其自身的正常功能和形態(tài)。

細胞傳代消化時所用胰酶的濃度越高是越好 貼壁細胞的消化：  常用的消化方法主要有酶消化法、離子螯合劑、物理法和冷凍法。其中**常用的是酶消化法。酶消化法：貼壁干細胞酶消化傳代時通常采用兩種方式：1、加入胰酶等干細胞脫落后，再加培養(yǎng)基中止胰酶作用，離心傳代；2、加入胰酶后，鏡下觀察待干細胞開始脫落時，棄去胰酶，加入培養(yǎng)液并分瓶。但前者太麻煩，而后者有可能對干細胞施加胰酶選擇，因為總是貼壁不牢的干細胞先脫落。胰酶和胰蛋白酶不一樣，前者包括后者。

    在組織細胞的體外培養(yǎng)和原代細胞培養(yǎng)中的組織細胞分散（將組織塊制備成單個細胞懸液）以及傳代細胞培養(yǎng)中，貼壁生長細胞的消化分散均要使用組織細胞消化液。常用的消化液為胰蛋白酶(Trypsin)，EDTA等。胰蛋白酶是一種絲氨酸水解酶，它能把多肽鏈中賴氨酸和精氨酸殘基中的羧基側切段，水解細胞間的蛋白質，破壞細胞間的連接，從而使組織或貼壁細胞離散成單個細胞。胰酶分散細胞的活性與組織或細胞的特性、胰酶濃度、溫度和作用時間有關，在℃時，胰酶的作用能力**強，因此使用胰酶時，應把握好濃度、溫度和時間，以免消化過度造成細胞損傷。一般常用胰酶的工作濃度為，而半貼壁細胞或對胰酶敏感的細胞常采用低濃度（）的胰酶進行細胞消化。由于EDTA能夠螯合Ca2+和Mg2+，從而破壞細胞連接促進細胞的解離，因此在胰酶溶液中常常會加入一定量的EDTA混合使用，以增強解離效果。但是對于EDTA可能會干擾后續(xù)的測試分析時，推薦選擇不含EDTA的消化液。本產品含有(Trypsin)，溶于無鈣鎂平衡鹽溶液中，經過濾除菌，可以直接用于培養(yǎng)細胞和組織的消化。為改良型，除了具有方便快速、穩(wěn)定安全、細胞狀態(tài)好等特點之外，消化時間更短，消化效果媲美進口產品，特別適用于難消化的細胞。 胰酶細胞消化液消化細胞時間不宜過長，否則細胞鋪板后生長狀況會較差。山東EDTA胰酶哪家便宜

消化使用的胰酶是含EDTA還是不含的？遼寧國產胰酶進貨價

在組織細胞的體外培養(yǎng)和原代細胞培養(yǎng)中的組織細胞分散（將組織塊制備成單個細胞懸液）以及傳代細胞培養(yǎng)中，貼壁生長細胞的消化分散均要使用組織細胞消化液。常用的消化液為胰蛋白酶 (Trypsin) ，EDTA 等。胰蛋白酶是一種絲氨酸水解酶，它能把多肽鏈中賴氨酸和精氨酸殘基中的羧基側切段，水解細胞間的蛋白質，破壞細胞間的連接，從而使組織或貼壁細胞離散成單個細胞。胰酶分散細胞的活性與組織或細胞的特性、胰酶濃度、溫度和作用時間有關，在PH 8.0和37℃時，胰酶的作用能力**強，因此使用胰酶時，應把握好濃度、溫度和時間，以免消化過度造成細胞損傷。一般常用胰酶的工作濃度為0.25%，而半貼壁細胞或對胰酶敏感的細胞常采用低濃度（0.05%）的胰酶進行細胞消化。由于EDTA能夠螯合Ca2+和Mg2+，從而破壞細胞連接促進細胞的解離，因此在胰酶溶液中常常會加入一定量的EDTA混合使用，以增強解離效果。遼寧國產胰酶進貨價