1/2ms生長培養(yǎng)基的培養(yǎng)結(jié)果為：中雙11號油菜種子在1/2ms生長培養(yǎng)基上的萌發(fā)率為100％，培養(yǎng)9d的幼苗，表現(xiàn)為植株健壯、平均株高為，葉色濃綠，莖稈粗壯、平均莖中粗為，根系發(fā)達、平均根數(shù)為(>)、平均主根長為。如圖3所示。培養(yǎng)實例3和對比培養(yǎng)例3的培養(yǎng)結(jié)果比較：中雙11號油菜種子在1/2cs生長培養(yǎng)基和1/2ms生長培養(yǎng)基上的萌發(fā)率均為100％；在相同條件下培養(yǎng)9d時，與1/2ms生長培養(yǎng)基相比，1/2cs生長培養(yǎng)基中的幼苗長勢更佳，其株高、根的數(shù)目優(yōu)于1/2ms生長培養(yǎng)基，莖粗及平均主根長度與1/2ms生長培養(yǎng)基相近。如圖3所示。培養(yǎng)實例4：馬鈴薯無菌苗培養(yǎng)生長培養(yǎng)基配制：1/2cs基本培養(yǎng)基+蔗糖30g/l+植物凝膠8g/l，用超純水溶解，。1/2cs基本培養(yǎng)基的成分及用量如表1所示。培養(yǎng)方法：以克新18號馬鈴薯為例，將配制好的1/2cs生長培養(yǎng)基分裝于長、寬、高9cm的耐高溫培養(yǎng)盒中，選擇生長旺盛的馬鈴薯脫毒苗，于無菌環(huán)境下，根據(jù)實際需要，用手術(shù)剪刀剪取約1cm長的至少帶有1個葉芽的莖端或莖段，用彎頭鑷子將其1/3-1/2長度垂直插入培養(yǎng)基中；于溫度22-23℃、濕度50-70％、光照強度2000-3000lux、光照和黑暗交替(光照時間14h、黑暗時間10h)條件下培養(yǎng)。無血清培養(yǎng)基提供了無血清的純凈環(huán)境。遼寧減血清培養(yǎng)基進口

    7)溶液應在2℃－8℃下避光保存。具體使用方法參照培養(yǎng)基包裝袋上的說明書。2）配制可高壓**細胞培養(yǎng)基(1)根據(jù)所需將培養(yǎng)基全部倒入一容器中，用少量注射用水（20℃～30℃）將袋內(nèi)殘留培養(yǎng)基洗下，并入容器。加注射用水至總體積的95％，輕微攪拌溶解。(2)在121℃、15psi下**15分鐘。(3)待溶液冷卻至室溫，加入無菌mol/LL－谷氨酰胺溶液規(guī)定體積、無菌％（w/v）碳酸氫鈉溶液規(guī)定體積，加注射用水（20℃～30℃）至規(guī)定體積，混勻。(4)如果必要，用1mol/L氫氧化鈉溶液或1mol/L鹽酸溶液調(diào)pH至所需值。(5)溶液應在2℃－8℃下避光保存。具體使用方法參照培養(yǎng)基包裝袋上的說明書。注意事項1）細胞培養(yǎng)用水一般為三蒸水（經(jīng)石英蒸餾器蒸餾）或超純水，醫(yī)*生產(chǎn)上一般為注射用水。2）建議盡量選擇與所用量相匹配的包裝一次使用，因為包裝一旦打開，組分可能會變質(zhì)或因受潮而結(jié)團。3）溶解干粉培養(yǎng)基時先加入終體積90％－95％的培養(yǎng)用水，添加劑加完后再補足。4）如需添加的組分較多時，某一組分完全溶解后，再添加另一組分。5）待培養(yǎng)基完全溶解后再加入碳酸氫鈉，以免產(chǎn)生沉淀。6）所有成分完全溶解后，培養(yǎng)基應立即過濾或高壓**，以免產(chǎn)生沉淀或有微生物污染。7）在過濾**時。遼寧減血清培養(yǎng)基進口RPMI1640培養(yǎng)基含有多種關(guān)鍵營養(yǎng)成分，支持細胞生長。

    因為解凍時可能會有營養(yǎng)成份析出，影響培養(yǎng)效果。正常情況下于2~8℃避光保存，使用前從冰箱取出，放入室溫進行平衡。通常的液體培養(yǎng)基有效期是6個月到12個月。液體細胞培養(yǎng)基盡量避免長期貯存，其中的谷氨酰胺會隨著儲存時間的延長而慢慢分解，如果細胞生長不良，可考慮檢測培養(yǎng)基中的谷氨酰胺含量確定是否再補加谷氨酰胺。市售商業(yè)化液體細胞培養(yǎng)基有具體的有效期，對于使用干粉細胞培養(yǎng)基自行配制成液體以后，也應低溫（2~8℃）貯存。除培養(yǎng)基中如谷氨酰胺易降解之外，培養(yǎng)基中的其他成份隨著溫度的升高也可能會發(fā)生降解或是析出。5.細胞培養(yǎng)基使用過程中常見問題分析由于大多數(shù)細胞適宜的pH為，偏離此范圍可能對細胞生長產(chǎn)生有害的影響。但各種細胞對pH的要求也不完全相同，原代培養(yǎng)的細胞一般對pH變動耐受力差，無限細胞系耐受力強。因此，原代培養(yǎng)時，培養(yǎng)液中的緩沖系統(tǒng)就顯得較為重要。一般的細胞培養(yǎng)基采用的都是平衡鹽系統(tǒng)，但不同的培養(yǎng)基或是同一系列的培養(yǎng)基所用平衡鹽系統(tǒng)不同，如199系列、MEM系列均有Hanks’系統(tǒng)的培養(yǎng)基及Earle’s系統(tǒng)的培養(yǎng)基。有些培養(yǎng)基不是上述常規(guī)的平衡鹽系統(tǒng)，例如RPMI1640培養(yǎng)基、F12培養(yǎng)基。

    3)培養(yǎng)方法：將配制的1/2cs生長培養(yǎng)基分裝于長、寬、高9cm的耐高溫培養(yǎng)盒中，用移液槍吸取帶有無菌水的無菌種子，吹打在無菌濾紙上，用無菌尖頭鑷子將種子均勻點播在培養(yǎng)基上；于溫度22-24℃、濕度50-70％、光照強度1500-2000lux、光照和黑暗交替(光照時間16h、黑暗時間8h)條件下培養(yǎng)。(4)1/2cs生長培養(yǎng)基的培養(yǎng)結(jié)果為：哥倫比亞型擬南芥種子在1/2cs生長培養(yǎng)基上的萌發(fā)率為100％，培養(yǎng)16d的幼苗，表現(xiàn)為植株健壯，蓮座葉均已伸展，葉色濃綠，根系發(fā)達、平均主根長為。如圖1所示。對比培養(yǎng)例1：將1/2cs基本培養(yǎng)基替換為1/2ms基本培養(yǎng)基，其余完全同培養(yǎng)實例1，1/2ms基本培養(yǎng)基的成分及用量如表1所示。1/2ms生長培養(yǎng)基的培養(yǎng)結(jié)果為：哥倫比亞型擬南芥種子在1/2ms生長培養(yǎng)基上的萌發(fā)率為100％，培養(yǎng)16d的幼苗，表現(xiàn)為植株健壯，蓮座葉部分伸展，葉色濃綠，根系發(fā)達、平均主根長為。如圖1所示。培養(yǎng)實例1和對比培養(yǎng)例1的培養(yǎng)結(jié)果比較：哥倫比亞型擬南芥在1/2cs生長培養(yǎng)基和1/2ms生長培養(yǎng)基上的萌發(fā)率均為100％；在相同條件下培養(yǎng)16d時，與1/2ms生長培養(yǎng)基相比，1/2cs生長培養(yǎng)基中的幼苗長勢更佳，主要表現(xiàn)為蓮座葉長勢更好、根系更為發(fā)達。如圖1所示。無血清培養(yǎng)基確保了細胞的純凈生長。

    流加質(zhì)量百分比濃度為20％的葡萄糖維持殘?zhí)遣坏陀冢?，流加消泡劑消泡。實施?一種優(yōu)化的谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基，其包括發(fā)酵培養(yǎng)基a和發(fā)酵培養(yǎng)基b；所述發(fā)酵培養(yǎng)基a首先添加，然后間隔24h添加發(fā)酵培養(yǎng)基b。所述發(fā)酵培養(yǎng)基a的制備方法為：取各原料：葡萄糖100g/l，酵母浸膏25g/l，k2hpo41g/l，mgso4·7h2o70mg/l，2-羥基乙胺20mg/l，cecl35mg/l，mnso4·h2o2mg/l，feso4·7h2o2mg/l，vb15mg/l，生物素5μg/l；將各原料攪拌均勻后，調(diào)節(jié)ph為，121℃**15min，自然冷卻，制得發(fā)酵培養(yǎng)基a；所述發(fā)酵培養(yǎng)基b的制備方法為：取各原料：琥珀酸7g/l，尿素2g/l，殼聚糖50mg/l；將各原料攪拌均勻后，調(diào)節(jié)ph為，121℃**15min，自然冷卻，制得發(fā)酵培養(yǎng)基b；采用常規(guī)發(fā)酵工藝：將黃色短桿菌gdk-9按8％接種量將種子液（od600nm為）接入裝有60l發(fā)酵培養(yǎng)基a的100l發(fā)酵罐中進行發(fā)酵培養(yǎng)，發(fā)酵培養(yǎng)24h，然后添加10l發(fā)酵培養(yǎng)基b，繼續(xù)發(fā)酵培養(yǎng)24h，收集發(fā)酵液；整個發(fā)酵培養(yǎng)過程中，控制發(fā)酵溫度35℃，通風比1∶，攪拌轉(zhuǎn)速300r/min，溶氧維持在20％，流加質(zhì)量百分比濃度為20％的葡萄糖維持殘?zhí)遣坏陀冢?，流加消泡劑消泡。實施?一、cecl3稀土鹽對菌體濃度、谷氨酸含量以及糖酸轉(zhuǎn)化率的影響。無酚紅培養(yǎng)基確保了細胞實驗結(jié)果的準確性。江西RPMI1640培養(yǎng)基進貨價

MEM培養(yǎng)基含有多種必需氨基酸和維生素，適合細胞培養(yǎng)。遼寧減血清培養(yǎng)基進口

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