mgso4·7h2o20-200mg/l,2-羥基乙胺10-50mg/l,cecl31-20mg/l,mnso4·h2o1-10mg/l,feso4·7h2o1-10mg/l,vb15-50mg/l,生物素1-10μg/l;將各原料攪拌均勻后,調(diào)節(jié)ph為6-7,121℃**,自然冷卻,制得發(fā)酵培養(yǎng)基a。更推薦地,所述發(fā)酵培養(yǎng)基a的制備方法為:取各原料:葡萄糖80g/l,酵母浸膏20g/l,k2hpo42g/l,mgso4·7h2o50mg/l,2-羥基乙胺40mg/l,cecl310mg/l,mnso4·h2o3mg/l,feso4·7h2o3mg/l,vb110mg/l,生物素7μg/l;將各原料攪拌均勻后,調(diào)節(jié)ph為,121℃**15min,自然冷卻,制得發(fā)酵培養(yǎng)基a。推薦地,所述發(fā)酵培養(yǎng)基b的制備方法為:取各原料:琥珀酸1-10g/l,尿素1-5g/l,殼聚糖20-100mg/l;將各原料攪拌均勻后,調(diào)節(jié)ph,**,制得發(fā)酵培養(yǎng)基b;更推薦地,所述發(fā)酵培養(yǎng)基b的制備方法為:取各原料:琥珀酸5g/l,尿素2g/l,殼聚糖80mg/l;將各原料攪拌均勻后,調(diào)節(jié)ph為,121℃**15min,自然冷卻,制得發(fā)酵培養(yǎng)基b。與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明取得的有益效果主要包括但是并不限于以下幾個方面:本發(fā)明發(fā)酵培養(yǎng)基采用兩部分組成,發(fā)酵培養(yǎng)基a側(cè)重于菌株增殖的提升,發(fā)酵培養(yǎng)基b側(cè)重于谷氨酸的合成和分泌;前期細胞增殖時。無血清培養(yǎng)基提供了無血清的純凈環(huán)境。青海無血清培養(yǎng)基生產(chǎn)企業(yè)
第三節(jié)培養(yǎng)基的高壓**及效果驗證消毒**在醫(yī)學(xué)實踐上有著重要意義。它可切斷傳播途徑、控制***擴散造成的危害;也可殺滅物品或器皿上的**,防止醫(yī)院***;在醫(yī)學(xué)微生物檢驗的領(lǐng)域中,消毒**是保正***的病原學(xué)檢驗不受外來微生物污染的前提。(一)術(shù)語消毒(disinfection)、火菌(sterilization)、抑菌(bacteriostasis)、防腐(antisepsis)和無菌(asepsis)是常用術(shù)語。下面就術(shù)語概念加以敘述。(1)**。是用適當(dāng)?shù)奈锢砘蚧瘜W(xué)手段將物品中活的微生物殺滅或除去的方法。本法適用于制劑、原料、輔料及醫(yī)療器械等物品的**。(如外科器械、注射器、基礎(chǔ)培養(yǎng)基**等。)(2)消毒。是破壞物體上活的病原微生物的方法,但不包括**芽胞和非病原微生物。如用酒精溶液浸泡體溫計、新潔爾滅液擦拭檢查臺等。用于消毒的化學(xué)物品稱消毒劑(dis-infectant)。一般而言,消毒對象是指物體而不是機體。(3)防腐。直接使用防腐劑(antiseptics)破壞或**活的病原微牛物的方法。如外科手術(shù)前碘液擦洗皮膚、雙氧水清創(chuàng)傷口或**肥皂清冼雙手等。(4)無菌。防止***病原體進入****或物品的操作技術(shù)稱無菌操作。無菌即為不存在活的微生物。用于消毒**的物理方法有熱力、電離輻射、超聲波、過濾等。中國澳門RPMI1640培養(yǎng)基無酚紅培養(yǎng)基確保了實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。
附圖說明圖1是1/2cs和1/2ms兩種培養(yǎng)基上,哥倫比亞型擬南芥無菌苗培養(yǎng)的對比效果圖,a:無菌苗在培養(yǎng)基中生長情況;b:無菌苗蓮座葉及根系發(fā)育;c:萌發(fā)率;d主根長度;a和b中bar=;圖2是1/2cs和1/2ms兩種培養(yǎng)基上,蘭茲貝格型擬南芥無菌植株培養(yǎng)的對比效果圖,a:無菌植株在培養(yǎng)基中生長情況;b:無菌植株地上部分及根系發(fā)育;c:無菌植株花***發(fā)育(左)和花粉的亞歷山大染色(右);d:主根長度;e:株高;f:蓮座葉長度;g:成熟花粉活力;a中bar=、b中bar=、c中花***bar=、c中花粉bar=15um;圖3是1/2cs和1/2ms兩種培養(yǎng)基上,油菜無菌苗培養(yǎng)的對比效果圖,a:無菌植株在培養(yǎng)基中生長情況;b:無菌苗地上部分及根系發(fā)育;c:莖高;d:莖中粗;e:主根長;f:大于;a中bar=、b中bar=;圖4是1/2cs和1/2ms兩種培養(yǎng)基上,馬鈴薯無菌苗培養(yǎng)的對比效果圖,a:無菌植株在培養(yǎng)基中生長情況;b:無菌苗地上部分及根系發(fā)育;c:莖高;d:莖中粗;e:根數(shù);a和b中bar=;圖5是cs和ms兩種培養(yǎng)基上,哥倫比亞型擬南芥葉片及根愈傷**誘導(dǎo)的對比效果圖,a:葉片愈傷**;b:葉片愈傷**誘導(dǎo)率;c:根愈傷**;d:根愈傷**誘導(dǎo)率;a和c中bar=;圖6是cs和ms兩種培養(yǎng)基上。
cs液體培養(yǎng)基和1/2cs液體培養(yǎng)基在用不同ph超純水(ph為)配制時的ph都較為穩(wěn)定,在未調(diào)ph的情況下,可直接用于多種植物培養(yǎng)。如圖8所示。(2)以克新18號馬鈴薯無菌苗為例,觀察在未調(diào)ph和將ph調(diào)至:a、培養(yǎng)基制作方法:隨機選取超純水,測得其ph為,用于配制8種不同的液體培養(yǎng)基。第一種:1/2ms未調(diào)ph液體培養(yǎng)基,其為取1/2ms基本培養(yǎng)基置于ph為;第二種:1/2cs未調(diào)ph液體培養(yǎng)基,其為取1/2cs基本培養(yǎng)基置于ph為;第三種:ms未調(diào)ph液體培養(yǎng)基,其為取ms基本培養(yǎng)基置于ph為;第四種:cs未調(diào)ph液體培養(yǎng)基,其為取cs基本培養(yǎng)基置于ph為;第五種:1/,其為取1/2ms基本培養(yǎng)基置于ph為,調(diào)ph至;第六種:1/,其為取1/2cs基本培養(yǎng)基置于ph為,調(diào)ph至;第七種:,其為取ms基本培養(yǎng)基置于ph為,調(diào)ph至;第八種:,其為取cs基本培養(yǎng)基置于ph為,調(diào)ph至。b、培養(yǎng)方法:從培養(yǎng)實例4所述培養(yǎng)基獲得長勢**的馬鈴薯幼苗,在清水中緩苗2-3d后選取長勢一致的馬鈴薯幼苗,如圖9-a所示,置于上述8種不同液體培養(yǎng)基8d,每隔2d更新1次液體培養(yǎng)基;于溫度22-23℃、濕度50-70%、光照強度2000-3000lux、光照和黑暗交替(光照時間14h、黑暗時間10h)條件下培養(yǎng)。無酚紅培養(yǎng)基在細胞實驗中減少了干擾因素。
發(fā)酵培養(yǎng)基為:葡萄糖80g/l,酵母浸膏20g/l,k2hpo42g/l,mgso4·7h2o50mg/l,cecl30-40mg/l,mnso4·h2o3mg/l,feso4·7h2o3mg/l,vb110mg/l,生物素7μg/l;發(fā)酵工藝同實施例1,100l發(fā)酵罐中含有70l發(fā)酵培養(yǎng)基。設(shè)置cecl3的添加濃度為0,,如圖1-2所示,隨著cecl3添加量的增加,菌體濃度和谷氨酸含量均有所提升,當(dāng)添加量為10mg/l時,菌體濃度和谷氨酸含量達到峰值,然后出現(xiàn)下降趨勢,但是整個過程中,糖酸轉(zhuǎn)化率沒有明顯改變(附圖未顯示);說明cecl3稀土鹽能夠促進菌株增殖,提高谷氨酸相關(guān)合成酶的活力,提高谷氨酸的產(chǎn)量,但是過高的濃度會造成菌株增殖放緩和死亡,谷氨酸產(chǎn)量相應(yīng)下降。二、通過上述實驗確定cecl3添加量為10mg/l,在此基礎(chǔ)上,研究2-羥基乙胺對菌體濃度、谷氨酸含量以及糖酸轉(zhuǎn)化率的影響。設(shè)置2-羥基乙胺的濃度為,5,10,20,40,80,160mg/l,如圖3-4所示,隨著2-羥基乙胺添加量的增加,菌體濃度隨之增加,相應(yīng)地,谷氨酸含量和糖酸轉(zhuǎn)化率也有所提升,當(dāng)添加量為40mg/l時,菌體濃度和谷氨酸含量達到峰值,繼續(xù)增加2-羥基乙胺的濃度,產(chǎn)生明顯的抑菌效果,菌株密度下降明顯;原因是,低濃度的2-羥基乙胺可能促進磷脂酰乙醇胺細胞壁組分的合成。MEM培養(yǎng)基常用于多種哺乳動物細胞的體外培養(yǎng)。貴州培養(yǎng)基價格對比
無血清培養(yǎng)基適合于無血清環(huán)境的細胞培養(yǎng)。青海無血清培養(yǎng)基生產(chǎn)企業(yè)
c、結(jié)果為:在用未調(diào)ph液體培養(yǎng)基進行培養(yǎng)時,整體長勢從優(yōu)至弱分別為1/2cs未調(diào)ph液體培養(yǎng)基、cs未調(diào)ph液體培養(yǎng)基、1/2ms未調(diào)ph液體培養(yǎng)基、ms未調(diào)ph液體培養(yǎng)基;在用ph調(diào)至,整體長勢從優(yōu)至弱分別為1/、、1/、;不論是否調(diào)ph至,cs液體培養(yǎng)基培養(yǎng)的馬鈴薯幼苗長勢均優(yōu)于ms液體培養(yǎng)基;不論是否調(diào)ph至,1/2cs液體培養(yǎng)基培養(yǎng)的馬鈴薯幼苗長勢均優(yōu)于1/2ms液體培養(yǎng)基。如圖9和圖10所示。說明,1/2cs液體培養(yǎng)基和cs液體培養(yǎng)基應(yīng)用于植物水培時,不論是否調(diào)節(jié)ph至,均能獲得很好的培養(yǎng)效果,克服了傳統(tǒng)液體培養(yǎng)基必須調(diào)節(jié)ph后才適用于植物水培的缺點。**后說明的是,以上實施例*用以說明本發(fā)明的技術(shù)方案而非限制,盡管參照較佳實施例對本發(fā)明進行了詳細說明,本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解,可以對本發(fā)明的技術(shù)方案進行修改或者等同替換,而其不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的宗旨和范圍,則均應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的權(quán)利要求范圍當(dāng)中。青海無血清培養(yǎng)基生產(chǎn)企業(yè)