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河北MEM培養(yǎng)基包括什么

來源: 發(fā)布時間:2024-10-19

    從而使培養(yǎng)基的預(yù)熱、加熱**及冷卻過程可在同一設(shè)備內(nèi)完成。該流程的加熱和冷卻時間比噴射加熱連續(xù)**流程要長些,但由于在培養(yǎng)基的預(yù)熱過程同時也起到了**后培養(yǎng)基的冷卻,因而節(jié)約了蒸汽和冷卻水的用量。(2)蒸汽直接噴射型的連續(xù)**系統(tǒng)流程中采用了蒸汽噴射器,它使培養(yǎng)液與高溫蒸汽直接接觸,從而在短時間內(nèi)可將培養(yǎng)液急速升溫至預(yù)定的**溫度然后在該溫度下維持一段時間**,**后的培養(yǎng)基通過一膨脹閥進入真空冷卻器急速冷卻,從圖中可以看出,由于該流程中培養(yǎng)基受熱時間短,營養(yǎng)物質(zhì)的損失也就不很嚴(yán)重,同時該流程保證了培養(yǎng)基物料**先出,避免了過熱或**不徹底等現(xiàn)象。(3)由連消塔、維持罐和噴淋冷卻組成的**系統(tǒng)連續(xù)**的基本設(shè)備一般包括:①配料預(yù)熱罐,將配制好的料液預(yù)熱到60-70℃,以避免連續(xù)**時由于料液與蒸汽溫度過大而產(chǎn)生水汽撞擊聲;②連消塔,連消塔的作用主要是使高溫蒸汽與料液迅速接觸混和,并使料液的溫度很快升高到**溫度(126-132)℃;③維持罐,連消塔加熱的時間很短,光靠這段時間的**是不夠的,維持罐的作用是使料液在**溫度下保持5-7min,以達(dá)到**的目的;④冷卻管,從維持罐出來的料液要經(jīng)過冷卻排管進行冷卻。無血清培養(yǎng)基確保了細(xì)胞的純凈生長環(huán)境。河北MEM培養(yǎng)基包括什么

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    三)、試驗結(jié)果:初代培養(yǎng):使用本發(fā)明的消毒方法,消毒成功率能達(dá)到80%,誘導(dǎo)培養(yǎng)基萌芽率能達(dá)到90%,可以成功建立無菌再生體系。繼代培養(yǎng):使用本發(fā)明的增殖培養(yǎng)基,繡球組培苗增殖倍率能夠達(dá)到8~10倍,組培苗高度一致,生長健壯。生根培養(yǎng):使用本發(fā)明的生根培養(yǎng)基,繡球組培苗生根率能夠達(dá)到95%,根系發(fā)達(dá),健壯,可以成功用于移栽大棚。本發(fā)明所指ms培養(yǎng)基是murashige和skoog研制的培養(yǎng)基,其成分配方表見表1。1/2ms培養(yǎng)基是指大量元素含量為ms培養(yǎng)基的一半,其他成分用量相同。表1、ms培養(yǎng)基成分表本發(fā)明涉及的植物生長調(diào)節(jié)劑有:6-ba—6-芐氨基嘌呤;ga3—赤霉素;iba—吲哚丁酸,naa—萘乙酸。本發(fā)明中的誘導(dǎo)培養(yǎng)基、增殖培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基均為液體培養(yǎng)基。本具體實施方式的實施例均為本發(fā)明的較佳實施例,并非依此限制本發(fā)明的保護范圍,故:凡依本發(fā)明的結(jié)構(gòu)、形狀、原理所做的等效變化,均應(yīng)涵蓋于本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。江蘇RPMI1640培養(yǎng)基一般多少錢RPMI1640培養(yǎng)基在抗體生產(chǎn)和免疫研究中有重要作用。

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    文獻(xiàn)2“混合硝酸稀土對谷氨酸產(chǎn)生菌的影響,氨基酸雜志”發(fā)現(xiàn),在發(fā)酵培養(yǎng)基中添加一定量的稀土元素,能夠提高谷氨酸的產(chǎn)量。申請人之前的**技術(shù)“一種谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基制備方法”,在常規(guī)培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上進行了改進,通過添加菌體蛋白浸膏來替代酵母膏氮源,不但節(jié)約了成本,還能提高氨基酸發(fā)酵產(chǎn)率,一舉兩得。技術(shù)實現(xiàn)要素:在已有發(fā)酵培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上,申請人針對微生物發(fā)酵的特點,繼續(xù)進行了改進,以提高發(fā)酵效率,據(jù)此,提出了一種優(yōu)化的谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基。本發(fā)明是通過如下技術(shù)方案來實現(xiàn)的:一種優(yōu)化的谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基,其包括發(fā)酵培養(yǎng)基a和發(fā)酵培養(yǎng)基b;所述發(fā)酵培養(yǎng)基a首先添加,然后間隔12h以上添加發(fā)酵培養(yǎng)基b。進一步地,所述發(fā)酵培養(yǎng)基a的制備方法為:取各原料:葡萄糖,酵母浸膏,k2hpo4,mgso4·7h2o,2-羥基乙胺,cecl3,mnso4·h2o,feso4·7h2o,vb1,生物素;將各原料攪拌均勻后,調(diào)節(jié)ph,**,制得發(fā)酵培養(yǎng)基a。進一步地,所述發(fā)酵培養(yǎng)基b的制備方法為:取各原料:琥珀酸,尿素,殼聚糖;將各原料攪拌均勻后,調(diào)節(jié)ph,**,制得發(fā)酵培養(yǎng)基b。推薦地,所述發(fā)酵培養(yǎng)基a的制備方法為:取各原料:葡萄糖50-100g/l,酵母浸膏10-30g/l,k2hpo41-5g/l。

    1)、初代培養(yǎng):繡球外植體,將葉片剪去,自來水沖洗干凈。在超凈工作臺上把已經(jīng)沖洗干凈的外植體浸入75%酒精中消毒30s,用無菌水沖洗3~4次。使用白貓漂白水和無菌水按1:4的體積比配制消毒液,將外植體放入消毒液浸泡40min,其中白貓漂白水為上海白貓(集團)有限公司生產(chǎn)的“白貓”牌家用漂白水。消毒完成,將外植體接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基中培養(yǎng),建立無菌再生系統(tǒng),誘導(dǎo)培養(yǎng)環(huán)境為光照強度1500lx條件下,溫度25℃,光照時間16h;黑暗條件下,溫度23℃,光照時間8h,培養(yǎng)6~8周。其中誘導(dǎo)培養(yǎng)基為ms+~~,誘導(dǎo)培養(yǎng)基的ph值為。(2)、繼代培養(yǎng):以建立的無菌再生系統(tǒng)為對象,將無菌外植體轉(zhuǎn)接到增殖培養(yǎng)基,其中增殖培養(yǎng)基為ms+~~,培養(yǎng)環(huán)境為光照強度1500lx條件下,溫度25℃,光照時間16h;黑暗條件下,溫度23℃,光照時間8h,培養(yǎng)8~12周。每隔8~12周轉(zhuǎn)接入新的增殖培養(yǎng)基,增殖培養(yǎng)基的ph值為。(3)、生根培養(yǎng):經(jīng)過繼代培養(yǎng)的繡球組培苗,取2~3cm的頂芽,放入生根培養(yǎng)基,其中生根培養(yǎng)基為1/2ms+~~,生根培養(yǎng)基的ph值為。誘導(dǎo)培養(yǎng)環(huán)境為光照強度1500lx條件下,溫度25℃,光照時間16h;黑暗條件下,溫度23℃,光照時間8h,培養(yǎng)8~12周。。DMEM培養(yǎng)基在組織工程中有重要應(yīng)用。

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    擬南芥根愈傷**誘導(dǎo)時,培養(yǎng)6-9d在切口處開始出現(xiàn)少量顆粒狀愈傷**,培養(yǎng)20-22d獲得淡黃色松脆型愈傷**,在愈傷**周圍觀察到大量致密分布的白毛,顆粒狀愈傷**誘導(dǎo)率及愈傷**總誘導(dǎo)率均為100%。如圖5所示。培養(yǎng)實例5和對比培養(yǎng)例5的誘導(dǎo)結(jié)果比較:用上述方法進行哥倫比亞擬南芥葉片和根愈傷**誘導(dǎo)時,cs誘導(dǎo)培養(yǎng)基與ms誘導(dǎo)培養(yǎng)基的顆粒狀愈傷**誘導(dǎo)率及愈傷**總誘導(dǎo)率均為100%,但cs誘導(dǎo)培養(yǎng)基的愈傷**出愈時間比ms誘導(dǎo)培養(yǎng)基提前至少1d;在相同培養(yǎng)條件下,與ms誘導(dǎo)培養(yǎng)基相比,經(jīng)cs誘導(dǎo)培養(yǎng)基誘導(dǎo)的葉片團塊狀愈傷**更大、誘導(dǎo)的根愈傷**更多。如圖5所示。培養(yǎng)實例6:本氏***葉片及根愈傷**誘導(dǎo)培養(yǎng)實例6與培養(yǎng)實例5不同的地方在于,步驟(1)將;步驟(2)將2,;步驟(3)所取葉片為本氏***無菌苗葉片,用手術(shù)剪刀將無菌葉片剪成,用鑷子將其平鋪于誘導(dǎo)培養(yǎng)基;步驟(4)所取根為本氏***無菌苗的根,cs誘導(dǎo)培養(yǎng)基的誘導(dǎo)結(jié)果為:本氏***葉片愈傷**誘導(dǎo)時,培養(yǎng)15-18d的葉片明顯增大增厚,葉片四周產(chǎn)生大量的淡綠色致密的愈傷**,愈傷**誘導(dǎo)率為100%,且在愈傷**團塊上已開始產(chǎn)生多個嫩綠色的不定芽;本氏***根愈傷**誘導(dǎo)時,培養(yǎng)9-11d在切口處產(chǎn)生大量淡黃色致密的愈傷**。減血清培養(yǎng)基提高了細(xì)胞實驗的可靠性和重復(fù)性。安徽RPMI1640培養(yǎng)基價目表

無血清培養(yǎng)基為細(xì)胞提供了無血清的純凈環(huán)境。河北MEM培養(yǎng)基包括什么

    nh4)2so4264mg、nh4h2po4288mg、mgso4·7h2o370mg、cacl2332mg、mnso4·h2o15mg、znso4·7h2o4mg、h3bo33mg、cocl2·、cuso4·、na2moo4·、nafeedta37mg、肌醇100mg、煙酸2mg、鹽酸硫胺素7mg、鹽酸吡哆醇1mg、甘氨酸2mg。將本實施例中的廣適性植物**培養(yǎng)基命名為cs基本培養(yǎng)基。實施例二,本實施例廣適性植物**1/2培養(yǎng)基,其每1000ml培養(yǎng)基中含有:kno31331mg、(nh4)2so4132mg、nh4h2po4144mg、mgso4·7h2o185mg、cacl2166mg、mnso4·h2o15mg、znso4·7h2o4mg、h3bo33mg、cocl2·、cuso4·、na2moo4·、nafeedta37mg、肌醇100mg、煙酸2mg、鹽酸硫胺素7mg、鹽酸吡哆醇1mg、甘氨酸2mg。將本實施例中的廣適性植物**1/2培養(yǎng)基命名為1/2cs基本培養(yǎng)基。上述實施例中的cs基本培養(yǎng)基、1/2cs基本培養(yǎng)基與現(xiàn)有ms基本培養(yǎng)基及1/2ms基本培養(yǎng)基的成分對比如表1所示:表1ms、cs、1/2ms、1/2cs基本培養(yǎng)基成分表上述實施例中的cs基本培養(yǎng)基和1/2cs基本培養(yǎng)基,若應(yīng)用于植物**培養(yǎng)中的固體培養(yǎng)基制作,可根據(jù)實際需要添加包含但不限于適量***、蔗糖、葡萄糖、白糖、瓊脂、植物凝膠、卡拉膠、大量元素水溶肥等,添加量同ms培養(yǎng)基一致,調(diào)節(jié)ph至,121℃15min滅菌后搖勻分裝。河北MEM培養(yǎng)基包括什么