式中:N0—開始**(t=0)時原有活菌數(shù);Nt----經(jīng)時間t后殘存活菌數(shù)。k:意義同上;t:表示理論**時間k=()logNt/N0;比死亡速率常數(shù)K,K值大,表明微生物容易死亡。理論**時間的計算需要注意以下幾個問題:(1)K值因不同的微生物種類不同、不同的生理狀態(tài)、不同的外界環(huán)境,差別很大,實質(zhì)上,它是微生物熱阻的一種表示形式,微生物的熱阻越大,K值也越小??梢匀∧蜔嵝匝挎邨U菌的K進(jìn)行計算。(2)在計算過程中,N0,Nt如何取值?N0為**開始時培養(yǎng)基中活微生物數(shù),可以參考一般培養(yǎng)基中的活微生物數(shù)為(1-2)×107個/ml;Nt通常取,既**失敗的概率為千分之一。(3)上述**時間,通常稱之為理論**時間,只可以用于工程計算中,在實踐過程中,因蒸汽的壓力問題(不穩(wěn)定)、蒸汽的流量問題有很大差別,甚至培養(yǎng)基中的固體顆粒的大小、培養(yǎng)基的粘度等因素,都會影響**效果,實際的設(shè)計和操作計算時間可作適當(dāng)比例的延長或縮短。在實際生產(chǎn)中,通常采用經(jīng)驗數(shù)值:間歇**,121℃,20—30分鐘;連續(xù)**,137℃,15—30s,在維持罐中保溫8—20分鐘。4、**溫度的選擇在培養(yǎng)基**過程中,除了雜菌死亡,還伴隨著培養(yǎng)基成分的破壞。因此必須選擇既能達(dá)到**目的。MEM培養(yǎng)基是細(xì)胞生物學(xué)研究中的基礎(chǔ)培養(yǎng)基之一。重慶DMEM高糖培養(yǎng)基哪家好
按每個2品牌:安捷倫型號:1260Lnifntiy參考報價:20萬-50萬【原創(chuàng)】實驗室培養(yǎng)基制備質(zhì)量保證通則我正在學(xué)習(xí)這個標(biāo)準(zhǔn),對實驗室認(rèn)可很重要,有興趣的一起學(xué)習(xí),同時希望得到高人指點品牌:安捷倫型號:1260Lnifntiy參考報價:20萬-50萬【分享】微生物常識---第二講培養(yǎng)基制備技術(shù)一、玻璃器皿的清洗在制備培養(yǎng)基的過程中,首先要使用一些玻璃器皿,如試管、三角瓶、培養(yǎng)皿、燒杯和吸管等。這些器皿在使用前都要根據(jù)不同的情況,經(jīng)過一定的處理,洗刷干凈。有的還要進(jìn)行包裝,經(jīng)過**等準(zhǔn)備就緒后,才能使用。品牌:安捷倫型號:1260Lnifntiy參考報價:20萬-50萬【資料】培養(yǎng)基制備、消毒與**檔.doc培養(yǎng)基制備、消毒與**檔.doc品牌:安捷倫型號:1260Lnifntiy參考報價:20萬-50萬【求購】找培養(yǎng)基制備指南的第二部分找培養(yǎng)基制備指南的第二部分好久了,都沒找到!有的能分享不?謝謝!品牌:安捷倫型號:1260Lnifntiy參考報價:20萬-50萬IBS培養(yǎng)基制備分裝系統(tǒng)儀器簡介:MEDIACLAVE是一臺專門用于培養(yǎng)基制備及**的設(shè)備,它快速**,功能齊全。配合MEDIAJET組成一個的培養(yǎng)基平皿分裝系統(tǒng)MEDIAJET是一臺設(shè)計緊湊、自動化程度很高的平皿分裝器。江蘇RPMI1640培養(yǎng)基供應(yīng)商F12培養(yǎng)基常用于神經(jīng)細(xì)胞和其他敏感細(xì)胞系。
一般情況下應(yīng)調(diào)pH比所需值低~,因過濾**后,pH值會升高約。8)在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,建議不加或加少量的***,如血清的濃度較低則所加***的量也要相應(yīng)降低一些。9)建議用1NHCl或1NNaOH來調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH,因為用碳酸氫鈉來調(diào)對培養(yǎng)液的滲透壓影響比較大。如下圖所示:圖6-1MEM培養(yǎng)基(SLM,MD611)在pH值相同情況下所加的碳酸氫鈉、氫氧化鈉的量及所對應(yīng)的培養(yǎng)液滲透壓圖6-2199培養(yǎng)基(MD502)在pH值相同情況下所加的碳酸氫鈉、氫氧化鈉的量及所對應(yīng)的培養(yǎng)液滲透壓培養(yǎng)基**培養(yǎng)基的**方法主要有兩種,高壓**及um微孔濾膜過濾**。與過濾相比,高壓**的工作強度小,相對便宜,失敗率低,但易造成營養(yǎng)成分的流失。高壓**某些培養(yǎng)基(如MEM)可進(jìn)行高壓**,例如清大天一的MEM培養(yǎng)基中的MD605、MD609等。其中不含有L-谷氨酰胺和碳酸氫鈉,可在高壓**后加入。另外可高壓的谷氨酸鹽(如L-丙氨酰-L-谷氨酰胺)可代替L-谷氨酰胺。為保證高壓**的效果,**設(shè)備的驗證很關(guān)鍵,可高壓**的培養(yǎng)基在121℃、15psi,15分鐘的條件下完全可達(dá)到**效果及營養(yǎng)成分的**小損失,因此不需將**時間延長。過濾**大多數(shù)培養(yǎng)基采用~μm孔徑的微孔濾膜進(jìn)行過濾**,并且已成為培養(yǎng)基**的發(fā)展方向。
又能使培養(yǎng)基的破壞降低至比較低的工藝條件。許多實驗研究結(jié)果表明,培養(yǎng)基在高溫**的過程中,其營養(yǎng)成分的破壞在很大程度上可以用一級反應(yīng)來描述其反應(yīng)速度:式中—表示營養(yǎng)成分破環(huán)的速率,C:表示營養(yǎng)成分的濃度K':為反應(yīng)速度常數(shù),1/s,應(yīng)速度常數(shù)K'與溫度的關(guān)系,可以使用阿累尼烏斯公式表示之:K'=A'exp-△E'/RT……(1)式中——:反應(yīng)速度常數(shù),1/S:反應(yīng)的活化能(J/mol)R:氣體常數(shù),*J/mol*kT:反應(yīng)的***溫度,k同樣,**過程中的反應(yīng)速度常數(shù)也可以用下式表示出:K=A×exp[-E/RT]……(2)(1)、(2)式可以改寫成下列形式:lg(k,2/k,1)=E,/R×(1/T1–T2)……(3)lg(k2/k1)=E/R×(1/T1–T2)……(4)(3)(4)的意義是指:反應(yīng)的溫度從T1升高到T2,其反應(yīng)的速度常數(shù)分別從k,1增加到k,2;k1增加到k2;培養(yǎng)基的**過程實際上是營養(yǎng)成分破壞、菌體死亡的兩個平行性反應(yīng),對于平行性反應(yīng),反應(yīng)溫度的提高,其兩個平行性反應(yīng)的速度常數(shù)都增加,但增加的幅度(大?。﹨s不同,其比值可以表示為:lg(k2/k1)/lg(k,2/k,1)=E/E,……(5)實驗證明:營養(yǎng)成分為破壞的反應(yīng)的活化能E的值為E,=—*103J/mol;而菌體死亡的活化能E芽孢:E=418*103J/mol。無血清培養(yǎng)基適合于無血清環(huán)境的細(xì)胞培養(yǎng)。
cs液體培養(yǎng)基和1/2cs液體培養(yǎng)基在用不同ph超純水(ph為)配制時的ph都較為穩(wěn)定,在未調(diào)ph的情況下,可直接用于多種植物培養(yǎng)。如圖8所示。(2)以克新18號馬鈴薯無菌苗為例,觀察在未調(diào)ph和將ph調(diào)至:a、培養(yǎng)基制作方法:隨機選取超純水,測得其ph為,用于配制8種不同的液體培養(yǎng)基。第一種:1/2ms未調(diào)ph液體培養(yǎng)基,其為取1/2ms基本培養(yǎng)基置于ph為;第二種:1/2cs未調(diào)ph液體培養(yǎng)基,其為取1/2cs基本培養(yǎng)基置于ph為;第三種:ms未調(diào)ph液體培養(yǎng)基,其為取ms基本培養(yǎng)基置于ph為;第四種:cs未調(diào)ph液體培養(yǎng)基,其為取cs基本培養(yǎng)基置于ph為;第五種:1/,其為取1/2ms基本培養(yǎng)基置于ph為,調(diào)ph至;第六種:1/,其為取1/2cs基本培養(yǎng)基置于ph為,調(diào)ph至;第七種:,其為取ms基本培養(yǎng)基置于ph為,調(diào)ph至;第八種:,其為取cs基本培養(yǎng)基置于ph為,調(diào)ph至。b、培養(yǎng)方法:從培養(yǎng)實例4所述培養(yǎng)基獲得長勢**的馬鈴薯幼苗,在清水中緩苗2-3d后選取長勢一致的馬鈴薯幼苗,如圖9-a所示,置于上述8種不同液體培養(yǎng)基8d,每隔2d更新1次液體培養(yǎng)基;于溫度22-23℃、濕度50-70%、光照強度2000-3000lux、光照和黑暗交替(光照時間14h、黑暗時間10h)條件下培養(yǎng)。DMEM培養(yǎng)基適用于多種哺乳動物細(xì)胞的體外培養(yǎng)和實驗研究。云南DMEM/F12培養(yǎng)基代理商
F12培養(yǎng)基提供了豐富的營養(yǎng)支持。重慶DMEM高糖培養(yǎng)基哪家好
生產(chǎn)上一般采用冷水噴淋冷卻,冷卻到40-50℃后,輸送到預(yù)先已經(jīng)**過的罐內(nèi)。(四)、間歇**與連續(xù)**的比較1、歇**的***和缺點***是設(shè)備要求低,不需另外設(shè)置加熱、冷卻裝置;操作要求低,適于手動操作,適合于小批量生產(chǎn)規(guī)模;適合于含有大量固體物質(zhì)的培養(yǎng)基的**。缺點是培養(yǎng)基的營養(yǎng)物質(zhì)損失較多,**后培養(yǎng)基的質(zhì)量下降;需進(jìn)行反復(fù)的加熱和冷卻,能耗較高;不適合于大規(guī)模生產(chǎn)過程的**;發(fā)酵罐的利用率較低。2、連續(xù)**的***和缺點***是**溫度高,可減少培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)的損失;操作條件恒定,**質(zhì)量穩(wěn)定;易于實現(xiàn)管道化和自控操作;避免了復(fù)的加熱和冷卻,提高了熱的利用率;發(fā)酵設(shè)備利用率高。缺點是對設(shè)備的要求高,需另外設(shè)置加熱、冷卻裝置;操作較麻煩;染菌的機會較多;不適合于含大量固體物料的**;對蒸汽的要求高。由此可見,無論在理論上或者在實踐上,與間歇**過程相比,連續(xù)**的***十分明顯。因此,連續(xù)**越來越多地被用培養(yǎng)基的**。重慶DMEM高糖培養(yǎng)基哪家好