將蒸過的原料置于室溫下過夜,未被殺死的孢子便發(fā)芽生長,芽孢發(fā)育成營養(yǎng)細胞,再30min便可殺死。如此連續(xù)反復(fù)進行2-3次,亦可達到徹底**的目的。3、分批**的操作分批滅歇是在所用的發(fā)酵罐或其他培養(yǎng)裝置中進行的,它是在配制罐中配好培養(yǎng)基后,通過**管道輸入發(fā)酵罐等培養(yǎng)設(shè)備中,然后開始**。在進行培養(yǎng)基的間歇**之前,通常先將發(fā)酵罐等培養(yǎng)裝置的分空氣過濾器進行**,并且用空氣將分過濾器吹干。開始**時,應(yīng)先放去夾套或蛇管中的冷水,開啟排氣管閥,通過空氣管向發(fā)酵罐內(nèi)的培養(yǎng)基通入蒸汽進行加熱,同時,也可在夾套內(nèi)通蒸汽進行間接加熱。當(dāng)培養(yǎng)基溫度升到70℃左右時,從取樣管和放料管向罐內(nèi)通入蒸汽進一步加熱,當(dāng)溫度升至120℃,罐壓為1*105Pa(表壓)時,打開接種、補料、消泡劑、酸、堿等管道閥門進行排汽,當(dāng)然在保溫過程中,應(yīng)注意凡在培養(yǎng)基液面下的各種進口管道都應(yīng)通入蒸汽,而在液面以上的其余各管道則應(yīng)排放蒸汽,這樣才能不留死角,從而保證**徹底。保溫結(jié)束后,依次關(guān)閉各排汽、進汽閥門,待罐內(nèi)壓力低于空氣壓力后,向罐內(nèi)通入無菌空氣,在夾套或蛇管中通冷水降溫,使培養(yǎng)基的溫度降到所需的溫度,進行下一步的發(fā)酵和培養(yǎng)。無酚紅培養(yǎng)基在敏感細胞系的培養(yǎng)中表現(xiàn)優(yōu)越。湖南基礎(chǔ)培養(yǎng)基哪家好
由于培養(yǎng)基的間歇**不需要專門的**設(shè)備,投資少,對設(shè)備要求簡單,對蒸汽的要求也比較低,且**效果可靠,因此,間歇**是中小型生產(chǎn)工廠經(jīng)常采用的一種培養(yǎng)基**方法。(三)、培養(yǎng)基的連續(xù)**1、定義:連續(xù)**也叫連消,將配制好的并經(jīng)預(yù)熱(60~75℃)的培養(yǎng)基用泵連續(xù)輸入由直接蒸汽加熱的加熱塔,使在短時間內(nèi)達到**溫度(126~132℃)。然后進入維持罐(或維持管),使在**溫度下維持3~7分鐘后再進入冷卻管,使其冷卻至接種溫度并直接進入已事先**(空罐**)過的發(fā)酵罐內(nèi)。其溫度一般以126~132℃為宜,總蒸汽壓力要求達到~MPa以上。培養(yǎng)基采用連續(xù)**時,需在培養(yǎng)基進入發(fā)酵罐前,直接用蒸汽進行空罐**(空消),用無菌空氣保壓,待培養(yǎng)基流入罐后,開始冷卻。**時對培養(yǎng)基的加熱可采用各種加熱器。培養(yǎng)基的冷卻方式有噴淋冷卻式、真空冷卻式、薄板換熱器式幾種方式,其過程均包括加熱、維持和冷卻階段。2、連續(xù)**的流程:(1)由熱交換器組成的**系統(tǒng)流程中采用了薄板換熱器作為培養(yǎng)液的加熱和冷卻器,蒸汽在薄板換熱器的加熱段使培養(yǎng)液的溫度升高,經(jīng)維持段保溫一定時間后,培養(yǎng)基在薄板換熱器的冷卻段進行冷卻。青海Ham's F12培養(yǎng)基進口使用減血清培養(yǎng)基能減少實驗中的血清干擾。
又能使培養(yǎng)基的破壞降低至比較低的工藝條件。許多實驗研究結(jié)果表明,培養(yǎng)基在高溫**的過程中,其營養(yǎng)成分的破壞在很大程度上可以用一級反應(yīng)來描述其反應(yīng)速度:式中—表示營養(yǎng)成分破環(huán)的速率,C:表示營養(yǎng)成分的濃度K':為反應(yīng)速度常數(shù),1/s,應(yīng)速度常數(shù)K'與溫度的關(guān)系,可以使用阿累尼烏斯公式表示之:K'=A'exp-△E'/RT……(1)式中——:反應(yīng)速度常數(shù),1/S:反應(yīng)的活化能(J/mol)R:氣體常數(shù),*J/mol*kT:反應(yīng)的***溫度,k同樣,**過程中的反應(yīng)速度常數(shù)也可以用下式表示出:K=A×exp[-E/RT]……(2)(1)、(2)式可以改寫成下列形式:lg(k,2/k,1)=E,/R×(1/T1–T2)……(3)lg(k2/k1)=E/R×(1/T1–T2)……(4)(3)(4)的意義是指:反應(yīng)的溫度從T1升高到T2,其反應(yīng)的速度常數(shù)分別從k,1增加到k,2;k1增加到k2;培養(yǎng)基的**過程實際上是營養(yǎng)成分破壞、菌體死亡的兩個平行性反應(yīng),對于平行性反應(yīng),反應(yīng)溫度的提高,其兩個平行性反應(yīng)的速度常數(shù)都增加,但增加的幅度(大?。﹨s不同,其比值可以表示為:lg(k2/k1)/lg(k,2/k,1)=E/E,……(5)實驗證明:營養(yǎng)成分為破壞的反應(yīng)的活化能E的值為E,=—*103J/mol;而菌體死亡的活化能E芽孢:E=418*103J/mol。
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3)擬南芥葉片愈傷**的誘導(dǎo)方法:用手術(shù)剪刀剪開長勢良好的無菌葉片,用鑷子將其取出擺放在步驟(1)的誘導(dǎo)培養(yǎng)基中,使傷口接觸培養(yǎng)基;于溫度23-25℃、濕度50-70%、光照強度1500-2500lux、光照和黑暗交替(光照時間16h、黑暗時間8h)條件下培養(yǎng)。(4)擬南芥根愈傷**的誘導(dǎo)方法:用鑷子取出無菌苗的根,用手術(shù)剪刀剪開后平鋪于步驟(2)的誘導(dǎo)培養(yǎng)基中,培養(yǎng)條件同步驟(3)。(5)cs誘導(dǎo)培養(yǎng)基的誘導(dǎo)結(jié)果為:擬南芥葉片愈傷**誘導(dǎo)時,培養(yǎng)6-8d在切口處出現(xiàn)顆粒狀愈傷**,培養(yǎng)24-26d獲得嫩綠色致密的團塊狀愈傷**,顆粒狀愈傷**誘導(dǎo)率及愈傷**總誘導(dǎo)率均為100%;擬南芥根愈傷**誘導(dǎo)時,培養(yǎng)5-7d在切口處開始出現(xiàn)少量顆粒狀愈傷**,培養(yǎng)20-22d獲得較大體積的淡黃色松脆型愈傷**,且在愈傷**周圍觀察到大量致密分布的白毛,顆粒狀愈傷**誘導(dǎo)率及愈傷**總誘導(dǎo)率均為100%。如圖5所示。對比培養(yǎng)例5:將cs基本培養(yǎng)基替換為ms基本培養(yǎng)基,其余完全同培養(yǎng)實例5,ms基本培養(yǎng)基的成分及用量如表1所示。ms誘導(dǎo)培養(yǎng)基的誘導(dǎo)結(jié)果為:擬南芥葉片愈傷**誘導(dǎo)時,培養(yǎng)7-10d在切口處出現(xiàn)顆粒狀愈傷**,培養(yǎng)24-26d獲得嫩綠色致密的團塊狀愈傷**,顆粒狀愈傷**誘導(dǎo)率及愈傷**總誘導(dǎo)率均為100%。MEM培養(yǎng)基常用于多種哺乳動物細胞的體外培養(yǎng)。北京基礎(chǔ)培養(yǎng)基供應(yīng)商家
F12培養(yǎng)基能夠支持細胞的持續(xù)分裂。湖南基礎(chǔ)培養(yǎng)基哪家好
二、基本原理麥芽汁培養(yǎng)基和馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基被***用于培養(yǎng)酵母菌品牌:安捷倫型號:1260Lnifntiy參考報價:20萬-50萬:培養(yǎng)基性能測試實用指南SN/:培養(yǎng)基性能測試實用指南品牌:安捷倫型號:1260Lnifntiy參考報價:20萬-50萬Systec培養(yǎng)基制備器產(chǎn)品描述SystecMediaPrep培養(yǎng)基制備器可精確便捷地對微生物培養(yǎng)基進行快速制備和**。Systec培養(yǎng)基制備器,不同型號可用于制備10-120升的培養(yǎng)基*操作簡單,安全可靠溫度和壓力嚴(yán)格控制鎖定裝載艙口和外部蓋品牌:Systec型號:MediaPrep-120參考報價:面議轉(zhuǎn)2433:實驗室培養(yǎng)基制備質(zhì)量保證通則:實驗室培養(yǎng)基制備質(zhì)量保證通則.pdf品牌:安捷倫型號:1260Lnifntiy參考報價:20萬-50萬培養(yǎng)基的制備及**1.掌握微生物實驗室常用玻璃器皿的清洗及包扎方法。2.掌握培養(yǎng)基的配置方法。3.掌握干熱**和高壓蒸汽**的操作方法。品牌:安捷倫型號:1260Lnifntiy參考報價:20萬-50萬培養(yǎng)基生產(chǎn)新理念:一鍵式制備德國systec發(fā)明一款專門用于培養(yǎng)基**制備的特殊**鍋――培養(yǎng)基制備器。自動分裝:培養(yǎng)基制備后通過硅膠管道連接分裝系統(tǒng)進行全自動分裝,整個分裝系統(tǒng)由微電腦主機精確控制,并內(nèi)置紫外燈**,保證分裝真正無菌狀態(tài)。湖南基礎(chǔ)培養(yǎng)基哪家好