PBS緩沖液，是生物化學(xué)研究中使用**為***的一種緩沖液，主要成分為Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和KCl，一般作為溶劑，起溶解保護試劑的作用。由于Na2HPO4和KH2PO4有二級解離，緩沖的pH值范圍很廣，而NaCl和KCl主要作用為增加鹽離子濃度。如有需要PBS還可以補加1 mmol/L CaCl2和0.5 mmol/L MgCl2，以提供二價陽離子。

配制方法播報稱取8.0g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4、0.24g KH2PO4溶于800mL蒸餾水中，用HCl調(diào)節(jié)溶液至7.4，***加蒸餾水定容至1L即可得0.01M PBS緩沖液。作用播報PBS是磷酸緩沖鹽溶液的簡稱，不僅偽狂犬病毒要用它稀釋，一般的有活性的生物制劑都要用它來稀釋。原因就是它具有鹽平衡、可調(diào)整的適宜pH緩沖作用，蒸餾水不具有鹽平衡作用，可以破壞生物蛋白的結(jié)構(gòu)及生物特性；生理鹽水不具有調(diào)整pH的作用，對完整的、具有活性的物質(zhì)不能保證其在**適條件下參與生物反應(yīng)，所以使用PBS是優(yōu)先。在細(xì)胞培養(yǎng)中，它通常用于洗滌傳代培養(yǎng)中的細(xì)胞，以及在計數(shù)細(xì)胞時作為稀釋溶液。 [2]PBS也不是***的，有的生物活性物質(zhì)需要的條件比PBS還要高，就需要在平衡緩沖液中加入更多的成分，維持比較好的條件保證生物活性物質(zhì)保持其**完整的特性 [1]。 緩沖液能夠提供酶所需的適pH值，這對于酶的活性至關(guān)重要。湖北無酚紅緩沖液包括

    磷酸緩沖液的緩沖pH值范圍非常***，可配置各種pH值的酸性、堿性和中性緩沖液，配制酸性緩沖液可直接用NaH2PO4或KH2PO4，pH范圍在1-5；堿性緩沖液可直接用Na2HPO4或K2HPO4，pH范圍在9-12；中性緩沖液則用等濃度的NaH2PO4和Na2HPO4或者等濃度的KH2PO4和K2HPO4溶液混合，pH在。通常所說的磷酸緩沖液的濃度是指溶液中含有的所有的磷酸根離子的濃度，而不是鈉離子（Na+）或者鉀離子（K+）的濃度。正是因為如此，在配制中性緩沖液時，用等濃度的NaH2PO4和Na2HPO4或者等濃度的KH2PO4和K2HPO4溶液混合，并不影響磷酸根離子的濃度，所得的緩沖液濃度仍是等濃度的NaH2PO4和Na2HPO4或者等濃度的KH2PO4和K2HPO4溶液原來的濃度，但是緩沖液中的鈉離子（Na+）或者鉀離子（K+）的濃度已經(jīng)發(fā)生變化。 湖北無酚紅緩沖液包括pH計校準(zhǔn)的正確順序是:先用pH7.0緩沖溶液校準(zhǔn),再用pH4.0或pH10.0緩沖溶液校準(zhǔn)。

緩沖液的作用和使用注意事項

一、緩沖液的概念緩沖液（Buffersolution）通常是由弱酸及其共軛堿或弱堿及其共軛酸緩沖對所組成的溶液，能夠在加入一定量其他物質(zhì)時減緩pH的改變。以生物實驗中**常用的一種緩沖液PBS為例，是由Na2HPO4、KH2PO4組成的緩沖對，在PH5.8-8.0范圍內(nèi)有較強的緩沖能力。二、緩沖液的作用緩沖溶液的作用是在有限的范圍內(nèi)調(diào)整溶液的pH值，使待測溶液的酸度符合分析方法所規(guī)定的范圍。例如，苯酚在堿性介質(zhì)及鐵**鉀存在下，可與4-氨基安替比林反應(yīng)生成橙紅色的安替比林染料，為了防止芳香胺類的干擾以pH在10士0.2時**為適宜。為此，就需要在待測溶液中加入氨一氯化錢緩沖溶液調(diào)整和控制待測溶液的pH為10.0士0.2。

緩沖液認(rèn)識作用（二）同時，我們?nèi)梭w的正常生理環(huán)境的維持離不開緩沖溶液，認(rèn)識學(xué)習(xí)緩沖溶液有利于我們深入認(rèn)識人體復(fù)雜化學(xué)反應(yīng)的機制。緩沖溶液對維持著人體正常的血液p H范圍。其中碳酸-碳酸氫鈉是血漿中**主要的緩沖對，此對緩沖機制與肺的呼吸功能及腎的排泄和重吸收功能密切相關(guān)。正常人體代謝產(chǎn)生的二氧化碳進(jìn)入血液后與水結(jié)合成碳酸,碳酸與血漿中的碳酸氫根離子—組成共軛酸堿對，所以緩沖溶液在醫(yī)學(xué)檢驗中有著重要的意義。 [4]緩沖液（Buffer solution）通常是由弱酸及其共軛堿或弱堿及其共軛酸緩沖對所組成的溶液。

做ELISA確定抗原**佳包被濃度，做方陣滴定具體怎么做呢？選擇好一份已知為陽性和陰性背景的標(biāo)本，將你的抗原用1*CBPH=*PBPH=（8個條件）后加入96孔板每孔100ul。（一般包被濃度100ng抗原或抗體/孔，**優(yōu)包被條件需進(jìn)行試驗選擇）4度過夜取出后甩干，加入20%NBS封閉每孔200ul。37度2h熱封，甩去后拍干即可。將你HRP或AP標(biāo)記的抗原或二抗用酶標(biāo)稀釋液進(jìn)行稀釋（倍比稀釋4個梯度）即可。棋盤滴定就是板酶交叉,同時帶上陽性、陰性通過試驗確定**佳P/N的包被搭配E的試驗2．抗原和抗體**佳工作濃度的確定?抗原抗體反應(yīng)要求在**適比例條件下進(jìn)行，ELISA反應(yīng)試劑多，其工作濃度不同對結(jié)果影響較大，因此必須對包被抗原(抗體)和酶標(biāo)抗體(抗原)進(jìn)行**佳工作濃度的滴定和選擇，以達(dá)到**佳的測定條件。?1）方陣(棋盤)滴定法選擇包被抗原的工作濃度用包被液將抗原作一系列稀釋。在生化實驗或研究工作中要慎重地選擇緩沖體系,因為有時影響實驗結(jié)果的因素并不是緩沖液的pH值。福建EBSS緩沖液有哪些

為什么緩沖溶液可以維持PH值的穩(wěn)定呢？湖北無酚紅緩沖液包括

    從中選取包被抗體濃度和酶標(biāo)抗體的稀釋度。為了進(jìn)一步節(jié)省試劑，可以此濃度為基點，縮小間距再進(jìn)一步做棋盤滴定。?2測定方法的標(biāo)準(zhǔn)化?2．1加樣?????ELISA中除了包被外，一般需進(jìn)行96孔加樣。定性測定中有時不強調(diào)加樣量的準(zhǔn)確性。例如規(guī)定為加樣1滴，如不具備相當(dāng)?shù)臈l件，要盡量使用相同口徑的滴管，保持準(zhǔn)確的加樣姿勢，使每滴液體的體積基本相同。在定量測定中，加樣量應(yīng)力求準(zhǔn)確，**好采用量程準(zhǔn)確的微量移液器。加樣時應(yīng)將液體加在孔底，不要加在孔壁上部，避免出現(xiàn)氣泡。?2．2保溫?????在ELISA中，一般在加標(biāo)本和結(jié)合物后，反應(yīng)的溫度和時間應(yīng)按規(guī)定的要求，保溫容器**好是水浴箱，可使溫度迅速平衡。各ELISA板不應(yīng)疊在一起。為避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋，或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕紗布的濕盒中。如用保溫箱，空濕盒應(yīng)預(yù)先放在其，以平衡溫度。?2．3洗滌?????洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟，但卻是決定實驗成敗的關(guān)鍵。在標(biāo)本和結(jié)合物的稀釋液和洗滌液中加入聚山梨酯一類物質(zhì)即避免非特異性吸附，在ELISA中**為常用。ELISA板的洗滌一般可采用以下方法：吸干孑L內(nèi)反應(yīng)液；將洗滌液注滿板孔；發(fā)表評論請自覺遵守互聯(lián)網(wǎng)相關(guān)的政策法規(guī)，嚴(yán)禁發(fā)布***、**、反動的言論。湖北無酚紅緩沖液包括