只要知道緩沖對(duì)的PH值,和要配制的緩沖液的pH值(及要求的緩沖液總濃度),就能按公式計(jì)算[鹽]和[酸]的量。這個(gè)算法涉及對(duì)數(shù)換算,較麻煩,前人為減少后人的計(jì)算麻煩,已為我們總結(jié)出pH值與緩沖液對(duì)離子用量的關(guān)系并列出了表格。只要我們知道要配制的緩沖液的pH,經(jīng)查表便可計(jì)算出所用緩沖劑的比例和用量。例如配制100nm pH5.8濃度為0.1M磷酸緩沖液。經(jīng)查表知pH5.8濃度為0.2M Na2HPO48.0毫升(1M=1 mol/L),而0.2M Na2HPO492.0毫升。依此可推論出配制100ml 0.1M的磷酸緩沖液需要0.1M Na2HPO48.0毫升,而0.1M Na2HPO4需要92.0毫升。計(jì)算好后,按計(jì)算結(jié)果準(zhǔn)確稱好固態(tài)化學(xué)成分,放于燒杯中,加少量蒸餾水溶解,轉(zhuǎn)移入100ml容量瓶,加蒸餾水至刻度,搖勻,就能得到所需的緩沖液。各種緩沖溶液的配制,均按表格按比例混合,某些試劑,必須標(biāo)定配成準(zhǔn)確濃度才能進(jìn)行,如醋酸、氫氧化鈉等。另外,所有緩沖溶劑的配制計(jì)量都能從以上的算式準(zhǔn)確獲得。 [2]緩沖液(Buffer solution)通常是由弱酸及其共軛堿或弱堿及其共軛酸緩沖對(duì)所組成的溶液。福建HBSS緩沖液哪家便宜
ph值測定常用的標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液有哪幾種
ph值測定常用的標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液草酸鹽標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液酒石酸鹽標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液苯二甲酸氫鹽標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液硼酸鹽標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液氫氧化鈣標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液在一定程度上能抵抗外加少量酸、堿或稀釋,而保持溶液pH值基本不變的作用稱為緩沖作用。具有緩沖作用的溶液稱為緩沖溶液。緩沖溶液性質(zhì)a.抗酸/堿,抗稀釋作用因?yàn)榫彌_溶液中具有抗酸成分和抗堿成分,所以加入少量強(qiáng)酸或強(qiáng)堿,其pH值基本上是不變的。稀釋緩沖溶液時(shí),酸和堿的濃度比值不改變,適當(dāng)稀釋不影響其pH值。b.緩沖容量緩沖容量是衡量緩沖溶液緩沖能力大小的尺度。緩沖容量的大小與緩沖組分濃度和緩沖組分的比值有關(guān)。緩沖組分濃度越大,緩沖容量越大;緩沖組分比值為1時(shí),緩沖容量比較大。 湖北HBSS緩沖液大概價(jià)格多少一種溶液是否是緩沖溶液,可以通過在溶液中加入少量的酸或堿,觀察pH值的變化來判斷。
磷酸緩沖液的緩沖pH值范圍非常***,可配置各種pH值的酸性、堿性和中性緩沖液,配制酸性緩沖液可直接用NaH2PO4或KH2PO4,pH范圍在1-5;堿性緩沖液可直接用Na2HPO4或K2HPO4,pH范圍在9-12;中性緩沖液則用等濃度的NaH2PO4和Na2HPO4或者等濃度的KH2PO4和K2HPO4溶液混合,pH在。通常所說的磷酸緩沖液的濃度是指溶液中含有的所有的磷酸根離子的濃度,而不是鈉離子(Na+)或者鉀離子(K+)的濃度。正是因?yàn)槿绱耍谂渲浦行跃彌_液時(shí),用等濃度的NaH2PO4和Na2HPO4或者等濃度的KH2PO4和K2HPO4溶液混合,并不影響磷酸根離子的濃度,所得的緩沖液濃度仍是等濃度的NaH2PO4和Na2HPO4或者等濃度的KH2PO4和K2HPO4溶液原來的濃度,但是緩沖液中的鈉離子(Na+)或者鉀離子(K+)的濃度已經(jīng)發(fā)生變化。
3.高溫高壓**后,4℃保存。SolutionI(質(zhì)粒提取用)組份濃度:25mMTris-HCl(),10mMEDTA,50mMGlucose配制量:1L配制方法:1.量取下列溶液,置于1L燒杯中。2.高溫高壓**后,4℃保存。3.使用前每50ml的SolutionI中加入2ml的RNaseA(20mg/ml)。SolutionII(質(zhì)粒提取用)組份濃度:200mMNaOH,1%(W/V)SDS配制量:500ml配制方法:1.量取下列溶液,置于500ml燒杯中10%SD50ml2NNaOH50ml2.加**水定容至500ml,充分混勻3.室溫保存,此溶液保存時(shí)間比較好不要超過一個(gè)月注意:SDS易產(chǎn)生氣泡,不要?jiǎng)×覕嚢鑃olutionIII(質(zhì)粒提取用)組份濃度:3MKOAc,5MCH3COOH配制量:500ml配制方法:1.稱量下列試劑,置于500ml燒杯中。2.加入300ml去離子水后攪拌溶解。3.加去離子水將溶液定容至500ml。4.高溫高壓**后,4℃保存。MEDTA()組份濃度:MEDTA配制量:1L配制方法:1.稱取gNa2EDTA·2H2O,置于1L燒杯中。2.加入約800ml的去離子水,充分?jǐn)嚢琛?.用NaOH調(diào)節(jié)pH值至(約20gNaOH)。注意:pH值至,EDTA才能完全溶解。4.加去離子水將溶液定容至1L。5.適量分成小份后,高溫高壓**。6.室溫保存。1MDTT組份濃度:1MDTT配制量:20ml配制方法:1.稱取gDTT,加入到50ml塑料離心管內(nèi)。2.加20ml的MNaOAc()。在生化研究工作中,常常需要使用緩沖溶液來維持實(shí)驗(yàn)體系的酸堿度。
所有操作均應(yīng)在通風(fēng)櫥中進(jìn)行,與苯酚接觸過的皮膚部位應(yīng)用大量水清洗,并用肥皂和水洗滌,忌用乙醇。3.苯酚平衡:因?yàn)樵谒嵝詐H條件下DNA分配于有機(jī)相,因此使用苯酚前必須對(duì)苯酚進(jìn)行平衡使其pH值達(dá)到,苯酚平衡操作方法如下:①液化苯酚應(yīng)貯存于-20℃,此時(shí)的苯酚呈結(jié)晶狀態(tài)。從冰柜中取出的苯酚首先在室溫下放置使其達(dá)到室溫,然后在68℃水浴中使苯酚充分融解。②加入羥基喹啉(8-Quinolinol)至終濃度。該化合物是一種還原劑、RNA酶的不完全抑制劑及金屬離子的弱螯合劑,同時(shí)因其呈黃色,有助于方便識(shí)別有機(jī)相。③加入等體積的1MTris-HCl(),使用磁力攪拌器攪拌15分鐘,靜置使其充分分層后,除去上層水相。④重復(fù)操作步驟③。⑤加入等體積的MTris-HCl(),使用磁力攪拌器攪拌15分鐘,靜置使其充分分層后,除去上層水相。⑥重復(fù)操作步驟⑤,稍微殘留部分上層水相。⑦使用pH試紙確認(rèn)有機(jī)相的pH值大于。⑧將苯酚置于棕色玻璃瓶中4℃避光保存。苯酚/氯仿/異戊醇(25:24:1)配制方法:1.說明:從核酸樣品中除去蛋白質(zhì)時(shí)常常使用苯酚/氯仿/異戊醇(25:24:1)。氯仿可使蛋白質(zhì)變性并有助于液相與有機(jī)相的分離,而異戊醇則有助于消除抽提過程中出現(xiàn)的氣泡。緩沖液使用中的注意事項(xiàng)。北京緩沖液技術(shù)指導(dǎo)
在生物化學(xué)研究中,為什么要使用緩沖液?在使用緩沖液時(shí)應(yīng)注意那些問題?福建HBSS緩沖液哪家便宜
酶活性實(shí)驗(yàn)中緩沖液的作用在?酶活性實(shí)驗(yàn)中,?緩沖液的主要作用是?維持實(shí)驗(yàn)環(huán)境的pH穩(wěn)定?,為酶提供一個(gè)**適的pH環(huán)境,從而確保酶的活性得到**佳發(fā)揮。緩沖液通過其抗酸抗堿能力,對(duì)抗溶液中H+濃度的變化,從而對(duì)溶液的酸度起到調(diào)節(jié)和控制的作用緩沖液的選擇與作用?提供**適pH值?:緩沖液能夠提供酶所需的**適pH值,這對(duì)于酶的活性至關(guān)重要。不同的酶有不同的**適pH值,通過選擇合適的緩沖液可以確保酶在**佳條件下進(jìn)行催化反應(yīng)。?3?維持pH穩(wěn)定?:緩沖液能夠抵抗外來的酸或堿的影響,保持溶液的pH值相對(duì)穩(wěn)定,從而確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。這對(duì)于酶活性實(shí)驗(yàn)尤為重要,因?yàn)槊傅幕钚詫?duì)pH變化非常敏感。?4?提供金屬離子?:在某些情況下,緩沖液還能提供酶所需的金屬離子或其他必要的離子,進(jìn)一步優(yōu)化酶的反應(yīng)條件。 福建HBSS緩沖液哪家便宜