5)微量元素:硒是**常見的。①無蛋白無血清細胞培養(yǎng)基(proteinfreemidium,PFM)這類培養(yǎng)基完全不含有動物來源蛋白,但仍有部份添加物是植物蛋白的小水解片段或合成多肽片段,以及類固醇***和脂類前體等,以替代動物***、生長因子的作用。其特點是完全沒有蛋白或蛋白含量極低,有利于生物制品的分離純化。④化學組份限定無血清細胞培養(yǎng)基(Chemicallydefinedmedia,CDM)此類培養(yǎng)基是目前**安全、**為理想的無血清細胞培養(yǎng)基,所有成份的濃度都完全明確,即使其所添加的少量蛋白,也是可經過純化處理,成份明確、濃度確定的蛋白。這類培養(yǎng)基較為理想地減少了生產的可變性,提高了生產工藝的重復性,并有效降低了純化成本。嚴格意義上來說,個性化細胞培養(yǎng)基不在細胞培養(yǎng)基的傳統(tǒng)分類之列,其具體是指一類根據細胞特性、細胞培養(yǎng)工藝特點、使用者需求習慣而量身定制的細胞培養(yǎng)基,主要目的是提高細胞產率、產品質量、產品安全性和降低血清的使用等。個性化細胞培養(yǎng)基可能是無血清培養(yǎng)基,也可能是低血清培養(yǎng)基,**終是為滿足某一種或某一類生物制品的生產需求。2.培養(yǎng)基的基本組分細胞培養(yǎng)基必須含有充分的營養(yǎng)物質。MEM培養(yǎng)基是細胞生物學研究中的基礎培養(yǎng)基之一。天津MEM a培養(yǎng)基一般多少錢
將未發(fā)生霉變的帶有胚的一半種子用于愈傷**誘導實驗;b、**消毒:于無菌環(huán)境下,將挑選的種子置于無菌三角瓶中,用無菌水清洗3-5次,75%酒精搖動清洗5min,無菌水清洗3-5次,5%naclo浸泡30min(期間每隔5-10min搖動30s),清水洗3-5次,種子表面的無菌水可用干燥的無菌濾紙吸去。(2)配制誘導培養(yǎng)基:cs基本培養(yǎng)基+,用超純水溶解,。cs基本培養(yǎng)基的成分及用量如表1所示。(3)愈傷**的誘導方法:用彎頭鑷子將無菌種子的缺口一端傾斜插入cs水稻成熟胚愈傷**誘導培養(yǎng)基,胚貼于培養(yǎng)基表面;于溫度24-26℃、濕度50-70%、光照強度1500-2500lux、光照和黑暗交替(光照時間16h、黑暗時間8h)條件下培養(yǎng)。(4)cs誘導培養(yǎng)基的誘導結果為:水稻成熟胚愈傷**誘導時,經cs誘導培養(yǎng)基誘導培養(yǎng)12-14d產生大量淡黃色結構致密的團狀愈傷**,出愈率為100%。如圖7所示。對比培養(yǎng)例7:將cs基本培養(yǎng)基替換為ms基本培養(yǎng)基,其余完全同培養(yǎng)實例7,ms基本培養(yǎng)基的成分及用量如表1所示。ms誘導培養(yǎng)基的誘導結果為:水稻成熟胚愈傷**誘導時,經ms誘導培養(yǎng)基誘導培養(yǎng)12-14d產生大量淡黃色結構致密的團狀愈傷**,出愈率為100%。如圖7所示。甘肅F12培養(yǎng)基價格無血清培養(yǎng)基確保了實驗結果的高度準確性。
培養(yǎng)實例2和對比培養(yǎng)例2的培養(yǎng)結果比較:蘭茲貝格型擬南芥種子在1/2cs生長培養(yǎng)基和1/2ms生長培養(yǎng)基上的萌發(fā)率均為100%;在相同條件下培養(yǎng)28d時,與1/2ms生長培養(yǎng)基相比,1/2cs生長培養(yǎng)基中的幼苗長勢更佳,在平均株高、蓮座葉大小、根長、花朵數量等方面均優(yōu)于1/2ms生長培養(yǎng)基;并且,采用上述培養(yǎng)方法,不論是1/2cs生長培養(yǎng)基還是1/2ms生長培養(yǎng)基,均能獲得形態(tài)完整的花粉,且花粉活力高達%,其特點在于選擇了蘭茲貝格型擬南芥作為培養(yǎng)對象,且選擇了高度適中的培養(yǎng)盒進行培養(yǎng),克服了傳統(tǒng)培養(yǎng)方法無法獲得擬南芥整個生育期無菌苗的缺點,所獲無菌花***可直接用于花*離體培養(yǎng)等研究內容。如圖2所示。培養(yǎng)實例3:油菜無菌苗培養(yǎng)與培養(yǎng)實例1不同的地方在于:步驟(1)所用種子為中雙11號油菜種子,其余完全同培養(yǎng)實例1。1/2cs生長培養(yǎng)基的培養(yǎng)結果為:中雙11號油菜種子在1/2cs生長培養(yǎng)基上的萌發(fā)率為100%,培養(yǎng)9d的幼苗,表現為植株健壯、平均株高為,葉色濃綠,莖稈粗壯、平均莖中粗為,根系發(fā)達、平均根數為(>)、平均主根長為。如圖3所示。對比培養(yǎng)例3:將1/2cs基本培養(yǎng)基替換為1/2ms基本培養(yǎng)基,其余完全同培養(yǎng)實例3,1/2ms基本培養(yǎng)基的成分及用量如表1所示。
第三節(jié)培養(yǎng)基的高壓**及效果驗證消毒**在醫(yī)學實踐上有著重要意義。它可切斷傳播途徑、控制***擴散造成的危害;也可殺滅物品或器皿上的**,防止醫(yī)院***;在醫(yī)學微生物檢驗的領域中,消毒**是保正***的病原學檢驗不受外來微生物污染的前提。(一)術語消毒(disinfection)、火菌(sterilization)、抑菌(bacteriostasis)、防腐(antisepsis)和無菌(asepsis)是常用術語。下面就術語概念加以敘述。(1)**。是用適當的物理或化學手段將物品中活的微生物殺滅或除去的方法。本法適用于制劑、原料、輔料及醫(yī)療器械等物品的**。(如外科器械、注射器、基礎培養(yǎng)基**等。)(2)消毒。是破壞物體上活的病原微生物的方法,但不包括**芽胞和非病原微生物。如用酒精溶液浸泡體溫計、新潔爾滅液擦拭檢查臺等。用于消毒的化學物品稱消毒劑(dis-infectant)。一般而言,消毒對象是指物體而不是機體。(3)防腐。直接使用防腐劑(antiseptics)破壞或**活的病原微牛物的方法。如外科手術前碘液擦洗皮膚、雙氧水清創(chuàng)傷口或**肥皂清冼雙手等。(4)無菌。防止***病原體進入****或物品的操作技術稱無菌操作。無菌即為不存在活的微生物。用于消毒**的物理方法有熱力、電離輻射、超聲波、過濾等。MEM培養(yǎng)基在細胞培養(yǎng)中表現出良好的穩(wěn)定性。
無芽孢:E=209—250*103J/mol。顯然,(5)式的比值〉1,說明提高溫度對于第二個平行反應,即菌體死亡的反應是有利的。提高溫度,雖然兩個平行性反應的反應速度常數都提高了,但是,達到同樣的**效果,所需要的時間卻縮短了,由于***個反應也就是營養(yǎng)成分破壞的反應速度常速增加的少,因此,有利于減少培養(yǎng)基在**過程中營養(yǎng)成分的破壞。換言之,高溫短時**對于培養(yǎng)基營養(yǎng)成分是有利的。通常所說的高溫短時**可以提高生產效益,其理論根據就在于此。結論1:當**溫度上升時,微生物殺死速率的提高要超過培養(yǎng)基成分的破壞速率的增加。要減少營養(yǎng)成分的破壞,可升高溫度**。結論2:在**時選擇較高的溫度、較短的時間,這樣便既可達到需要的**程度,同時又可減少營養(yǎng)物質的損失。(二)、影響**效果的因素(1)微生物種類:不同的微生物k值不同。(2)初始菌量:在保持N值不變的前提下,t與初始菌量N0的對數成正比。(3)培養(yǎng)基成份:油脂、蛋白質增加微生物的耐熱性。(4)傳熱與混合狀況:影響受熱均勻度。(5)培養(yǎng)基中固體顆粒的存在影響熱穿透。(6)蒸汽中空氣的存在降低蒸汽分壓和**溫度。(7)pH:酸性pH下可加快微生物熱死速率三、培養(yǎng)基的工業(yè)**。無血清培養(yǎng)基適合于無血清環(huán)境的細胞培養(yǎng)。甘肅F12培養(yǎng)基價格
RPMI1640培養(yǎng)基在免疫細胞培養(yǎng)中表現出色。天津MEM a培養(yǎng)基一般多少錢
MEM低血清培養(yǎng)基的平衡鹽系統(tǒng)也不是常規(guī)的平衡鹽系統(tǒng),該平衡鹽系統(tǒng)的緩沖能力強于常規(guī)平衡鹽系統(tǒng)的緩沖能力。細胞培養(yǎng)過程中pH值下降產生的原因有很多。在細胞生長非??鞎r,pH值通常下降得很快,此時可以通過及時傳代、提高傳代比例或降低血清量等方法進行解決。此外,培養(yǎng)瓶蓋擰得過緊、NaHCO3緩沖系統(tǒng)緩沖能力不夠、培養(yǎng)液中鹽濃度不正確、**、酵母或***污染等也能導致pH值通常下降得很快。這時,可以通過以下幾種方法解決:1)增加培養(yǎng)液中NaHCO3濃度或減少培養(yǎng)箱內CO2濃度。NaHCO3含量在;2)改用不依賴CO2培養(yǎng)液;3)適當松開瓶蓋。在培養(yǎng)液中加HEPES緩沖液,使終濃度為10~25mM;4)在CO2培養(yǎng)環(huán)境中改用基于Earle’s鹽配制的培養(yǎng)液,在大氣培養(yǎng)環(huán)境中培養(yǎng)改用Hanks’鹽配制的培養(yǎng)液;5)如果是污染造成的則丟棄培養(yǎng)物或用*****。酚紅在細胞培養(yǎng)基中用作pH值的指示劑。一般情況下,可以通過酚紅的指示作用判斷培養(yǎng)基的pH值,但低血清或是無血清細胞培養(yǎng)基中酚紅的含量與普通細胞培養(yǎng)基中的酚紅含量不同,不能通過肉眼觀察或通過經驗來判定pH值,建議使用pH計進行測定。酚紅通常對含血清的細胞培養(yǎng)基生產的生物制品質量并不會產生明顯影響,也可通過純化技術去除。天津MEM a培養(yǎng)基一般多少錢