該酶標IsC的工作濃度應為1/1?600。?????棋盤滴定法選擇包被抗原工作濃度:①用包被液將抗原由1:50開始作比倍稀釋后進行包被,洗滌。②將強陽性參考血清、弱陽性參考血清和陰性參考血清用稀釋液作1:100稀釋,加樣,保溫、洗滌。③加按工作濃度稀釋的酶標IsC抗體,保溫、洗滌。④加底物顯色。加酸終止反應后讀取A值。⑤選擇強陽性參考血清的A值為0.8左右、陰性參考血清的A值小于0.1的包被抗的稀釋度作為工作濃度,從中選取**適工作濃度。?1.2夾心法測抗原?????在夾心ELISA法中,可用棋盤滴定法同時選擇包被抗體和酶標抗體的工作濃度。①抗體免*球蛋白用包被緩沖液稀釋至蛋白濃度為10.0、1.0和0.1微克/毫升,分別在ELISA板上進行包被,每一濃度包括3個縱行,洗滌。②在1個橫行各包被孔中加入強陽性抗原液,另1橫行加入弱陽性抗原液,第3橫行加入陰性對照液,保溫、洗滌。③將酶標抗體用稀釋液稀釋成3個濃度,例如1:1?000、1:5?000和1:25000。分別加入每個包被濃度的1個縱行中,保溫、洗滌。④加底物顯色。加酸終止反應后,讀取A值。⑤以強陽性抗原的A值在0.8左右、陰性參考的A值小于0.1的條件作**適條件,據(jù)此選擇包被抗體和酶抗體的工作濃度。如果加入的酸或堿量過多,緩沖溶液的緩沖能力會降低,pH值會發(fā)生變化。河北PBS緩沖液供應商家
pH緩沖液的使用方法和配制保存
pH緩沖液是確保pH測量值精確的重要因素。標準緩沖液用于校準pH傳感器和檢查其性能。pH緩沖液的緩沖能力是其重要的屬性。即使將外部物質(zhì)加入緩沖液中,這一屬性仍可使pH緩沖液保持恒定的pH值。pH緩沖液使用方法:首先取少量校正液潤洗小量杯,然后加入適量校正液(液面高度沒過電極的感應探頭即可)。按照電子pH測試筆使用說明書進行校正。由于校正液是高精密的液體,是電子ph測試筆精確度的保障,因此用過的校正液不能再倒回瓶中,以免影響校正液精度,帶入細菌等,造成校正液無法繼續(xù)使用。 湖北EBSS緩沖液哪家便宜酸和鹽濃度等比例增減時,溶液的pH值不變。
ph值緩沖液常用三種
pH酸堿度常用的三種標準溶液:pH分別為4.0、7.0和10.0。標準緩沖液(應選擇與供試液pH值接近的標準緩沖液),目前標準溶液有7種,在我國一般使用以下3種溶液:(pH值在25℃時)。1.鄰苯二甲酸氫鉀(KHC8H4O4)pH4.003;0.05M。2.混合磷酸鹽(Na2HPO4):磷酸二氫鉀和磷酸氫二鈉混合鹽溶液pH6.864;0.025M3.硼砂(Na2B4O7·l0H2O)pH9.182;0.01M。三種標準緩沖液的配置方法:1.pH4,鄰苯二甲酸氫鉀標準緩沖液:精密稱取在115±5℃干燥2~3小時的鄰苯二甲酸氫鉀[KHC8H4O4]10.12g,加水使溶解并稀釋至1000ml。2.pH7,磷酸鹽標準緩沖液(pH7.4):精密稱取在115±5℃干燥2~3小時的無水磷酸氫二鈉4.303g與磷酸二氫鉀1.179g,加水使溶解并稀釋至1000ml。3.pH9,硼砂標準緩沖液:精密稱取硼砂[Na2B4O7·10H2O]3.80g(注意:避免風化),加水使溶解并稀釋至1000ml,置聚乙烯塑料瓶中,密塞,避免與空氣中二氧化碳接觸。
如何計算緩沖溶液的有效PH范圍電離平衡常數(shù)的負對數(shù)加減1之間。即pK±1之間。例如以醋酸/醋酸鹽為共軛酸堿對的緩沖溶液的有效緩沖范圍是:PKa±1=±1之間。即。緩沖溶液是無機化學及分析化學中的重要概念,緩沖溶液是指具有能夠維持PH相對穩(wěn)定性能的溶液。pH值在一定的范圍內(nèi)不因稀釋或外加少量的酸或堿而發(fā)生***的變化,緩沖溶液依據(jù)共軛酸堿對及其物質(zhì)的量不同而具有不同的pH值和緩沖容量。擴展資料:緩沖液的pH值與該酸的電離平衡常數(shù)Ka及鹽和酸的濃度有關。弱酸的pKa值衡定,但酸和鹽的比例不同時,就會得到不同的pH值。酸和鹽濃度相等時,溶液的pH值與PKa值相同。酸和鹽濃度等比例增減時,溶液的pH值不變。酸和鹽濃度相等時,緩沖液的緩沖效率為比較高,比例相差越大,緩沖效率越低,緩沖液的一般有效緩沖范圍為pH=pKa±1,pOH=pKb±1。在絡合滴定和分光光度法等許多反應里都要求溶液的pH值保持在一個范圍內(nèi),以保證指示劑的變色和顯色劑的顯色等,這些條件都是通過加入一定量的緩沖溶液達到的,所以緩沖溶液是分析測試中經(jīng)常需要的一種試劑。采用電位滴定法測定外加酸或堿對不同配比同一種緩沖溶液的滴定曲線。 PBS緩沖液可以用于分子克隆和細胞培養(yǎng)等實驗。
PBS溶液又稱磷酸鹽緩沖溶液,一般選擇Na2HPO4和KH2PO4配制,因為鈉鹽溶解的較慢。根據(jù)不同pH的溶液,稱量不同質(zhì)量的磷酸鹽,也可以用pH計調(diào)溶液的pH。PBS一般用作支持電解質(zhì)。
配置方法播報編輯采用去離子水、KH2PO4和Na2HPO4·2H2O配制PBS溶液,按以下步驟進行:(1) 配制1/15mol/L KH2PO4,即每升水中溶解9.078克KH2PO4;(2) 配制1/15mol/LNa2HPO4·2H2O,即每升水中溶解11.876克Na2HPO4·2H2O;(3) 將18.2%(體積分數(shù))KH2PO4溶液和81.8%Na2HPO4·2H2O混合; 緩沖體系來抵抗在代謝過程中出現(xiàn)的pH變化.內(nèi)蒙古有酚紅緩沖液哪家好
酶活性實驗中緩沖液的作用。河北PBS緩沖液供應商家
1MTris-HCl(,,)組份濃度:1MTris-HCl配制量:1L配制方法:1.稱量gTris置于1L燒杯中。2.加入約800ml的去離子水,充分攪拌溶解。3.按下表量加入濃鹽酸調(diào)節(jié)所需要的pH值。4.將溶液定容至1L。5.高溫高壓**后,室溫保存。注意:應使溶液冷卻至室溫后再調(diào)定pH值,因為Tris溶液的pH值隨溫度的變化差異很大,溫度每升高1℃,溶液的pH值大約降低。10&timeTEBuffer(,,)組份濃度:100mMTris-HCl,10mMEDTA配制量:1L配制方法:1.量取下列溶液,置于1L燒杯中。2.向燒杯中加入約800ml的去離子水,均勻混合。3.將溶液定容至1L后,高溫高壓**。4.室溫保存。MTris-HCl()組份濃度:MTris-HCl配制量:1L配制方法:1.稱量gTris置于1L燒杯中。2.加入約800ml的去離子水,充分攪拌溶解。3.用濃鹽酸調(diào)節(jié)pH值至。4.將溶液定容至1L。5.高溫高壓**后,室溫保存。注意:應使溶液冷卻至室溫后再調(diào)定pH值,因為Tris溶液的pH值隨溫度的變化差異很大,溫度每升高1℃,溶液的pH值大約降低。3M醋酸鈉()組份濃度:3M醋酸鈉配制量:100ml配制方法:1.稱量NaAc·3H2O置于100-200ml燒杯中,加入月40ml的去離子水攪拌溶解2.加入冰醋酸調(diào)節(jié)pH值至3.加去離子水將溶液定容至100ml4高溫高壓**后,室溫保存。河北PBS緩沖液供應商家