久久成人国产精品二三区,亚洲综合在线一区,国产成人久久一区二区三区,福利国产在线,福利电影一区,青青在线视频,日本韩国一级

四川EDTA胰酶介紹

來源: 發(fā)布時(shí)間:2024-11-20

1、胰酶是,就是說PBS,注意,盡量不要用水來溶,因?yàn)橐3譂B透壓。2、EDTA的工作液溶度是-,根據(jù)細(xì)胞消化的難易程度自己調(diào)整。EDTA并不是必須的,容易消化的細(xì)胞可不加。EDTA對(duì)細(xì)胞貼壁性有影響,因此使用時(shí)要甚重。如果影響貼壁,但消化時(shí)必須要用,那么在用完全培養(yǎng)基終止消化后,可離心棄上清,再加完全培養(yǎng)基培養(yǎng),可去除EDTA。如果對(duì)貼壁沒影響,那么可不離心。3、EDTA的濃度也是質(zhì)量體積比。和胰酶一起溶于PBS。4、注意,血清可終止胰酶的作用,但不能終止EDTA的作用,對(duì)有些細(xì)胞來說,終止消化后的離心是必要的。5、胰酶和EDTA在pH為8左右的時(shí)候**易溶解,在配制時(shí)可先滴幾滴NaOH將pH調(diào)至8,注意,胰酶可使溶液變酸,所以要邊溶邊測(cè)pH,隨時(shí)調(diào)整。注意,不可加過量NaOH,否則過堿,細(xì)胞會(huì)受不了。6、胰酶EDTA相對(duì)比較難溶,可用磁力攪拌器,或放入4度冰箱過夜,待溶解后過濾**。7、可配2-3乘的胰酶,這樣比較節(jié)約時(shí)間和濾器,用的時(shí)候?qū)ι?*PBS即可。8、儲(chǔ)存液放在-20度冰箱凍存,使用液放在4度,用的時(shí)候不要放在27度水浴鍋溫浴,因?yàn)檫@樣會(huì)讓胰酶很快失效,使用前放在室溫下一會(huì)。胰酶細(xì)胞消化液具有方便快速的特點(diǎn),通常室溫消化1分鐘左右就可以消化下大多數(shù)貼壁細(xì)胞。四川EDTA胰酶介紹

四川EDTA胰酶介紹,胰酶

    (不含EDTA含酚紅)性質(zhì)、用途與生產(chǎn)工藝背景胰酶又名胰醇素、胰液素。白色或淡黃色無定形粉末。系從各種動(dòng)物胰臟制取的混合物,主要是蛋白酶、脂酶、淀粉酶。溶于水呈微渾溶液。不溶于醇、醚。有引濕性,遇酸、堿及熱即喪失活力,水溶液遇酸、熱、重金屬或單寧酸時(shí)產(chǎn)生沉淀。為助消化藥,用于缺乏胰液的***癥。也用于皮革工業(yè)和紡織印染,主要用于酶法脫毛。將絞碎的豬胰漿經(jīng)***、提取、沉淀、脫脂、干燥、粉碎而得。簡(jiǎn)介(不含EDTA含酚紅)為細(xì)胞培養(yǎng)基,1.不含EDTA含酚紅:含酚紅,(1:250)溶于HBSS溶液,不含鈣鎂。-20℃保存。胰(不含EDTA含酚紅)含,不含EDTA和酚紅,溶于無鈣鎂平衡鹽溶液中,經(jīng)過濾除菌,可以直接用于培養(yǎng)細(xì)胞和組織的消化,通常室溫消化2分鐘左右就消化下大多數(shù)貼壁細(xì)胞。使用方法(不含EDTA含酚紅)使用說明---貼壁細(xì)胞Chemicalbook的消化:a)吸去培養(yǎng)液,用無菌的PBS、Hanks液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。b)加入少量胰蛋白酶消化液,蓋過細(xì)胞即可,室溫放置1-2分鐘。不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同,對(duì)于貼壁牢固的細(xì)胞可適當(dāng)延長(zhǎng)消化時(shí)間。c)顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化。 廣西重組胰酶進(jìn)貨價(jià)0.25%胰酶細(xì)胞消化液(含有EDTA,含酚紅)消化細(xì)胞時(shí)間不宜過長(zhǎng)。

四川EDTA胰酶介紹,胰酶

    產(chǎn)品簡(jiǎn)介產(chǎn)品簡(jiǎn)介:產(chǎn)品編號(hào)產(chǎn)品名稱產(chǎn)品包裝產(chǎn)品價(jià)格C0201胰酶細(xì)胞消化液100ml碧云天生產(chǎn)的胰酶細(xì)胞消化液(Trypsin-EDTASolution)含。該消化液經(jīng)過過濾**,可以直接用于培養(yǎng)細(xì)胞的消化,或者一些**的消化。本胰酶細(xì)胞消化液具有方便快速的特點(diǎn),通常室溫消化1分鐘左右就可以消化下大多數(shù)貼壁細(xì)胞。包裝清單:產(chǎn)品編號(hào)產(chǎn)品名稱包裝C0201胰酶細(xì)胞消化液100ml―說明書1份保存條件:4℃保存,一年有效。注意事項(xiàng):在使用胰酶細(xì)胞消化液的過程中要特別注意避免消化液被**污染。胰酶細(xì)胞消化液消化細(xì)胞時(shí)間不宜過長(zhǎng),否則細(xì)胞鋪板后生長(zhǎng)狀況會(huì)較差。為了您的安全和**,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。使用說明使用說明:1.貼壁細(xì)胞的消化:a)吸去培養(yǎng)液,用無菌的PBS、Hanks液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。b)加入少量胰酶細(xì)胞消化液,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置30秒至2分鐘。不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。c)顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化;或者用***吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來。此時(shí)吸除胰酶細(xì)胞消化液。加入含血清的完全細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。d)如果發(fā)現(xiàn)消化不足。

細(xì)胞消化胰酶的配制對(duì)一般細(xì)胞0.25%胰酶(胰蛋白酶,Trypsin)配方:100mlPBS,0.25g胰酶步驟:1先配100mlPBS(1000mlPBS:8.0gNaCl,3.4785gPO4HNa2·12H2O/2.9gPO4HNa2,0.2gKCl,0.2gPO4H2K溶于1000ml蒸餾水)2稱胰酶0.25g3加入PBS中,低速攪拌〈4h冰浴中,或者4℃過夜低速攪拌0.5h冰浴中4調(diào)PH7.45仍在冰浴中6過濾,分裝,-20℃保存,4℃短期內(nèi)用完tip:低速很重要,機(jī)械攪拌對(duì)酶是一種沖擊,如果起沫,酶就變性了。低溫,防止酶失活對(duì)難消化的細(xì)胞:在上述配方中,加入0.02g的EDTA(0.02%)tip:因?yàn)镋DTA可以絡(luò)合Ca2+,增加消化效力胰酶PH的變化是肉眼可觀察到的。

四川EDTA胰酶介紹,胰酶

品名:0.25%胰蛋白酶溶液,1X分類:細(xì)胞消化試劑規(guī)格:100ML用途:消化試劑,如胰蛋白酶,被用于將粘附細(xì)胞從其附著的表面或底物上分離和降解,以及將組織進(jìn)行游離,以開展原代細(xì)胞培養(yǎng)。產(chǎn)品包括2種常用濃度的γ照射豬胰蛋白酶(1:250)以及一種新型非哺乳動(dòng)物豬胰蛋白酶替代品,稱為ThermoScientificHyQTaseTM.HyQTase是一種蛋白水解酶和膠原水解酶的混合超濾溶液,可以快速消化,同時(shí)不損傷細(xì)胞。其非哺乳動(dòng)物配方使它適用于無血清應(yīng)用,不需要失效或?qū)γ敢种苿?。此試劑可使?xì)胞被快速分離,形成單細(xì)胞懸浮物,保持高細(xì)胞活力,并使傳代時(shí)的變異減至**小。胰酶濃度:常用0.25%胰酶+0.02%EDTA作為消化液。青海進(jìn)口胰酶是什么

適用于貼壁細(xì)胞的消化傳代;也可用于組織細(xì)胞分離的初步消化。四川EDTA胰酶介紹

    ①制備粗酶液稱取定量粗胰酶,其胰蛋白酶活性為,胰淀粉酶活性為,胰脂肪酶活性為。將其用pH值為、濃度為0.2mol/L的乙酸-乙酸鈉緩沖液溶解,然后進(jìn)行真空過濾,收集濾液并用磷酸緩沖液進(jìn)行稀釋,使胰蛋白酶活性為3-10U/mg,備用。②制備反膠束將AOT置于100℃烘箱中干燥至恒重,放入干燥器中冷卻至室溫。然后稱取,加入10L異辛烷,在攪拌下使其形成均勻的分散液,再加入定量蒸餾水,在200r/min的轉(zhuǎn)速下處理2h,獲得濃度為。使用時(shí)用異辛烷稀釋10倍。③萃取將稀釋10倍的AOT-異辛烷反膠束置于萃取器中,按照AOT異辛烷反膠束:粗酶溶液體積比為(2-3):1的比例加入粗酶溶液萃取3-4次,,在300-400r/min的轉(zhuǎn)速下萃取5-10min。如此每次萃取完成后,均進(jìn)行離心分離,離心機(jī)轉(zhuǎn)速為4000-6000r/min,時(shí)間10-15min收集、合并離心上層清液,進(jìn)行反萃取,下層萃余液用于制備胰脂肪酶。④反萃取將荷載胰蛋白酶的AOT-異辛烷反膠束置于萃取器中,在攪拌下加入等體積的反萃取液進(jìn)行反萃取15-20min萃取液為0.。如此反萃取3次,每次萃取完成后,均進(jìn)行離心分離,離心機(jī)轉(zhuǎn)速為4000-6000r/min,時(shí)間為15-20min。分別收集、合并離心上層清液和下層反萃取液,前者再生后可再次萃取胰蛋白酶。 四川EDTA胰酶介紹