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三、緩沖液使用中的注意事項(xiàng)在實(shí)際工作中有些分析人員由于不大了解緩沖溶液的作用機(jī)理,當(dāng)所配制和使用的緩沖溶液與規(guī)定的數(shù)值不相符時(shí),為使緩沖溶液達(dá)到要求,就用鹽酸或氫氧化鈉等強(qiáng)酸、強(qiáng)堿進(jìn)行調(diào)節(jié),以為這樣做可以使緩沖溶液盡快達(dá)到所需要的pH值,然而,結(jié)果卻適得其反,這樣的溶液pH值雖然調(diào)對(duì)了,可是它的緩沖體系卻被破壞了,作用也就失去了,緩沖溶液一般都是由弱酸及其弱酸鹽或是弱堿及其弱堿鹽組成的一對(duì)共軛體。使用緩沖溶液的注意事項(xiàng):不少緩沖溶液都含有易揮發(fā)組分,如,氨-氯化銨中的氨酷酸-醋酸鈉中的醋酸?,F(xiàn)在,不少實(shí)驗(yàn)室引入了定量加液器,用定量加液器加試劑,具有簡(jiǎn)便準(zhǔn)確誤差恒定的特點(diǎn),特別是在做成批樣品時(shí)更顯出它的優(yōu)越性,不少同志也喜歡用它來加緩沖液,但是,應(yīng)注意緩沖液不能長(zhǎng)久存放在定量加液器中,因該器皿不密閉,易造成氨的揮發(fā)(醋酸-醋酸鈉緩沖液中的醋酸也同理),從而,導(dǎo)致溶液失效,正確的做法是緩沖液應(yīng)適量配制,使用后及時(shí)密閉并置于低溫中保存。緩沖液濃度和溫度的影響。浙江有酚紅緩沖液進(jìn)貨價(jià)
當(dāng)往某些溶液中加入一定量的酸和堿時(shí),有阻礙溶液pH變化的作用,稱為緩沖作用,這樣的溶液叫做緩沖溶液。弱酸及其鹽的混合溶液(如HAc與NaAc),弱堿及其鹽的混合溶液(如NH3.H2O與NH4Cl)等都是緩沖溶液。由弱酸HA及其鹽NaA所組成的緩沖溶液對(duì)酸的緩沖作用,是由于溶液中存在足夠量的堿A-的緣故。當(dāng)向這種溶液中加入一定量的強(qiáng)酸時(shí),H離子基本上被A-離子消耗:所以溶液的pH值幾乎不變;當(dāng)加入一定量強(qiáng)堿時(shí),溶液中存在的弱酸HA消耗OH-離子而阻礙pH的變化。四川無酚紅緩沖液價(jià)目表酸和鹽濃度等比例增減時(shí),溶液的pH值不變。
所有操作均應(yīng)在通風(fēng)櫥中進(jìn)行,與苯酚接觸過的皮膚部位應(yīng)用大量水清洗,并用肥皂和水洗滌,忌用乙醇。3.苯酚平衡:因?yàn)樵谒嵝詐H條件下DNA分配于有機(jī)相,因此使用苯酚前必須對(duì)苯酚進(jìn)行平衡使其pH值達(dá)到,苯酚平衡操作方法如下:①液化苯酚應(yīng)貯存于-20℃,此時(shí)的苯酚呈結(jié)晶狀態(tài)。從冰柜中取出的苯酚首先在室溫下放置使其達(dá)到室溫,然后在68℃水浴中使苯酚充分融解。②加入羥基喹啉(8-Quinolinol)至終濃度。該化合物是一種還原劑、RNA酶的不完全抑制劑及金屬離子的弱螯合劑,同時(shí)因其呈黃色,有助于方便識(shí)別有機(jī)相。③加入等體積的1MTris-HCl(),使用磁力攪拌器攪拌15分鐘,靜置使其充分分層后,除去上層水相。④重復(fù)操作步驟③。⑤加入等體積的MTris-HCl(),使用磁力攪拌器攪拌15分鐘,靜置使其充分分層后,除去上層水相。⑥重復(fù)操作步驟⑤,稍微殘留部分上層水相。⑦使用pH試紙確認(rèn)有機(jī)相的pH值大于。⑧將苯酚置于棕色玻璃瓶中4℃避光保存。苯酚/氯仿/異戊醇(25:24:1)配制方法:1.說明:從核酸樣品中除去蛋白質(zhì)時(shí)常常使用苯酚/氯仿/異戊醇(25:24:1)。氯仿可使蛋白質(zhì)變性并有助于液相與有機(jī)相的分離,而異戊醇則有助于消除抽提過程中出現(xiàn)的氣泡。
PBS緩沖液密度和水接近嗎?PBS緩沖液的密度與水接近。?PBS緩沖液,主要成分為Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和KCl,這些成分的密度與水的密度相近。PBS緩沖液的作用主要是提供一個(gè)穩(wěn)定的pH環(huán)境,用于保護(hù)生物化學(xué)研究中的試劑和細(xì)胞等,同時(shí)保持實(shí)驗(yàn)條件的穩(wěn)定性。由于PBS緩沖液的主要成分與水的密度相近,它在水溶液中的行為也與水相似,這使得PBS成為生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用的溶液之一。此外,PBS緩沖液可以調(diào)整其成分以適應(yīng)不同的pH值需求,從而在***的pH范圍內(nèi)提供穩(wěn)定的緩沖能力?12??偟膩碚f,PBS緩沖液的密度與水非常接近,這種特性使得PBS在生物化學(xué)研究中得到***應(yīng)用,因?yàn)樗軌蛱峁┮粋€(gè)類似于水的環(huán)境,同時(shí)保持實(shí)驗(yàn)條件的穩(wěn)定性。?PBS緩沖液的密度與水接近。?PBS緩沖液,主要成分為Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和KCl,這些成分的密度與水的密度相近。PBS緩沖液的作用主要是提供一個(gè)穩(wěn)定的pH環(huán)境,用于保護(hù)生物化學(xué)研究中的試劑和細(xì)胞等,同時(shí)保持實(shí)驗(yàn)條件的穩(wěn)定性。由于PBS緩沖液的主要成分與水的密度相近,它在水溶液中的行為也與水相似,這使得PBS成為生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用的溶液之一。此外,PBS緩沖液可以調(diào)整其成分以適應(yīng)不同的pH值需求。 在生物體中有三種主要的pH緩沖體系.
制備PBS緩沖液的方法制備PBS緩沖液非常簡(jiǎn)單,以下是制備1升10×PBS緩沖液的方法:13.將800ml的去離子水加入大容量燒杯中。14.將8g的氯化鈉(NaCl)和0.2g的磷酸二氫鉀(KH2PO4)加入燒杯中,用玻璃棒攪拌均勻。15.用去離子水將溶液補(bǔ)足至1升,繼續(xù)攪拌至完全溶解。16.用蓋子或保鮮膜覆蓋燒杯,將燒杯放入冰箱中冷藏保存。注:若需要使用1×PBS緩沖液,只需取10×PBS緩沖液適量稀釋即可。
制備PBS緩沖液的方法制備PBS緩沖液非常簡(jiǎn)單,以下是制備1升10×PBS緩沖液的方法:13.將800ml的去離子水加入大容量燒杯中。14.將8g的氯化鈉(NaCl)和0.2g的磷酸二氫鉀(KH2PO4)加入燒杯中,用玻璃棒攪拌均勻。15.用去離子水將溶液補(bǔ)足至1升,繼續(xù)攪拌至完全溶解。16.用蓋子或保鮮膜覆蓋燒杯,將燒杯放入冰箱中冷藏保存。注:若需要使用1×PBS緩沖液,只需取10×PBS緩沖液適量稀釋即可。 緩沖溶液在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中有著重要的意義。廣西無酚紅緩沖液技術(shù)指導(dǎo)
Pbs緩沖也是磷酸鹽緩沖生理鹽水,屬于等張液對(duì)于細(xì)胞并無毒性作用。浙江有酚紅緩沖液進(jìn)貨價(jià)
生物緩沖液pH計(jì)校正及使用方法
生物緩沖液在實(shí)驗(yàn)分析中經(jīng)常被用到,它的作用是穩(wěn)定溶液的pH值。然而,很多人在實(shí)驗(yàn)中會(huì)遇到無法調(diào)節(jié)緩沖液pH值的情況,這是為什么呢?如何解決這個(gè)問題呢?下面我將詳細(xì)介紹。首先,從目前使用的pH計(jì)來看,國(guó)產(chǎn)的pH計(jì)或酸度計(jì),校正緩沖液時(shí)需要注意以下兩種情況:
1、購買市場(chǎng)上配置好的標(biāo)準(zhǔn)溶液,在聚乙烯瓶中密封儲(chǔ)存。如果在室溫條件下保存1-2個(gè)月后,若出現(xiàn)渾濁、沉淀或發(fā)霉等情況,就不能繼續(xù)使用了。已經(jīng)使用過的校正緩沖液也不能再倒回去使用。2、購買緩沖劑并自己配置。大部分廠家生產(chǎn)的緩沖劑都是干燥型的pH緩沖劑,使用時(shí)需要將其溶解在之前煮沸15-30分鐘的去離子水中,然后倒入250ml容量瓶中,稀釋至刻度,充分搖勻即可。 浙江有酚紅緩沖液進(jìn)貨價(jià)