TMB的氧化產(chǎn)物聯(lián)苯醌在波長450nm處有比較大消光系數(shù),如果HRP量少,H:O:和TMB過量時,則形成藍(lán)色的陽離子根。降低pH,即可使藍(lán)色的陽離子根轉(zhuǎn)變?yōu)辄S色的聯(lián)苯醌,使用硫酸作為終止劑可使產(chǎn)物穩(wěn)定90min。因此,450nm和492 nm兩個波長是目前ELISA測定常用的。各種酶標(biāo)儀都配有放置濾光片的可自動轉(zhuǎn)換的部件,可以同時安裝6~8片濾光片,所配備的濾光片均應(yīng)包括上述兩個波長,有的酶標(biāo)儀以490nm濾光片替代492nm濾光片,影響不大。除了這兩個基本濾光片外,考慮到雙波長比色的需要,還應(yīng)有620nm或630nm或650nm和405nm波長的濾光片,其他濾光片可根據(jù)自己的需要選擇。有時,有的實(shí)驗(yàn)室希望用酶標(biāo)儀作微量生化測定,故酶標(biāo)儀生產(chǎn)廠家對其生產(chǎn)的酶標(biāo)儀擴(kuò)展了紫外檢測功能,此時需要一個340 nm波長濾光片。此時,酶標(biāo)儀的測定波長范圍就成為340—750nm或800nm。安徽檢測快速酶標(biāo)儀樣品檢測波長100-400nm稱為紫外光,400-780nm之間的光稱為可見光,大于780nm稱為紅外光。
酶標(biāo)儀基于濾光方式的不同可分為濾光片式的酶標(biāo)儀和光柵式酶標(biāo)儀。濾光片式酶標(biāo)儀采用濾光片來進(jìn)行波長的選擇,酶標(biāo)儀內(nèi)置濾光片輪,可選擇試驗(yàn)所需的不同波長的濾光片來進(jìn)行分光,光源發(fā)出的全波譜光經(jīng)過濾光片后,大部分被過濾,只剩下濾光片本身允許的波長通過,這樣就可就通過濾光片來獲得特定的波長。濾光片輪一般包含4-6塊濾光片,通過選擇不同的濾光片可獲得不同的波長,但是獲得的波長都是固定的,受到一定的限制,不能獲得任意所需的波長,而且更換濾光片價格比較昂貴。一般波長固定的濾光片有405,450,490,630nm。
可見光和紫外光酶標(biāo)儀分別采用鎢燈及氘燈作為光源。湖南檢測快速酶標(biāo)儀質(zhì)保
酶標(biāo)儀實(shí)際上就是一臺變相光電比色計(jì)或分光光度計(jì),其基本工作原理與主要結(jié)構(gòu)和光電比色計(jì)基本相同。光源燈發(fā)出的光波經(jīng)過濾光片或單色器變成一束單色光,進(jìn)入塑料微孔板中的待測標(biāo)本。該單色光一部分被標(biāo)本吸收,另一部分則透過標(biāo)本照射到光電檢測器上,光電檢測器將這一待測標(biāo)本不同而強(qiáng)弱不同的光信號轉(zhuǎn)換成相應(yīng)的電信號,電信號經(jīng)前置放大,對數(shù)放大,模數(shù)轉(zhuǎn)換等信號處理后送入微處理器進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和計(jì)算,由顯示器和打印機(jī)顯示結(jié)果。微處理機(jī)還通過控制電路控制機(jī)械驅(qū)動機(jī)構(gòu)X方向和Y方向的運(yùn)動來移動微孔板,從而實(shí)現(xiàn)自動進(jìn)樣檢測過程。
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