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性能參數(shù)表達(dá)區(qū)間及表達(dá)系統(tǒng)(Source)CynomolgusCD27Ligand/CD70ProteinisexpressedfromHEK293withHistagattheN-terminal.ItcontainsGln39-Pro194.[Accession|G7PYU6-1]分子量大?。∕olecularWeight)TheproteinhasapredictedMWof18.4kDa.Duetoglycosylation,theproteinmigratesto60-90kDabasedonTris-BisPAGEresult.(Endotoxin)Lessthan1EUperugbytheLALmethod.純度(Purity)>95%asdeterminedbyTris-BisPAGE活性(Activity)ELISAData:ImmobilizedCynomolgusCD27Ligand,HisTagat2μg/ml(100μl/well)ontheplate.DoseresponsecurveforCynomolgus/RhesusmacaqueCD27,hFcTagwiththeEC50of70.8ng/mldeterminedbyELISA.制劑(Formulation)Lyophilizedfrom0.22μmfilteredsolutioninPBS(pH7.4).Normally8%trehaloseisaddedasprotectantbeforelyophilization.重構(gòu)方法(Reconstitution)Centrifugetubesbeforeopening.Reconstitutingtoaconcentrationmorethan100μg/mlisrecommended.Dissolvethelyophilizedproteinindistilledwater.泛素化反應(yīng)可以修飾蛋白質(zhì),調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)降解。泛素化還影響蛋白質(zhì)體事件,如蛋白質(zhì)定位、活性和功能。Recombinant Mouse FABP1
牛纖維蛋白原:止血中的關(guān)鍵成分及生物醫(yī)學(xué)應(yīng)用摘要牛纖維蛋白原(Fibrinogen,F(xiàn)g),也稱為凝血因子I,是一種在血液凝固過程中發(fā)揮關(guān)鍵作用的血漿糖蛋白。本文討論了牛纖維蛋白原的結(jié)構(gòu)特性、提取方法以及各種生物醫(yī)學(xué)應(yīng)用,突出其在研究和中的重要性。引言牛纖維蛋白原是一種分子量較大的糖蛋白(約340 kDa),由肝臟的肝細(xì)胞合成。它在血液凝固的然后一步中起著主要作用,在那里它被轉(zhuǎn)化為不溶性的纖維蛋白網(wǎng),穩(wěn)定了血凝塊。該分子由兩個(gè)相同的半部分組成,每個(gè)半部分包含三個(gè)多肽鏈(α、β和γ),通過二硫鍵連接。結(jié)構(gòu)特性纖維蛋白原的結(jié)構(gòu)完整性對(duì)其功能至關(guān)重要。每個(gè)分子的一半包含三個(gè)鏈(α、β、γ),具有不同的分子量(α約63.5 kDa,β約56 kDa,γ約47 kDa)和大約4%的碳水化合物。這些鏈通過二硫鍵相互連接,這對(duì)于維持蛋白質(zhì)的構(gòu)象和活性至關(guān)重要。提取和純化已經(jīng)開發(fā)了各種方法來提取和純化血漿中的牛纖維蛋白原。傳統(tǒng)方法包括鹽析、色譜法和乙醇沉淀。鹽析,特別是使用硫酸銨,是一種常見的方法,因其簡(jiǎn)單有效而受到青睞。然而,通過這些方法獲得的纖維蛋白原純度可能會(huì)有所不同,需要進(jìn)一步的純化步驟,如離子交換色譜法,以實(shí)現(xiàn)更高程度的純化。HIV gag peptide (199-207)α-凝血酶(α-Thrombin)在凝血過程中起著非常重要的作用,能夠促使纖維蛋白凝塊的產(chǎn)生。
Cas9核酸酶是一種向?qū)NA(guideRNA,gRNA)引導(dǎo)的核酸內(nèi)切酶,可催化雙鏈DNA的裂解。NLS-Cas9-EGFP在Cas9核酸酶的基礎(chǔ)上進(jìn)行改造,它在N端包含一個(gè)核定位信號(hào)(NLS),在C端包含一個(gè)EGFP和一個(gè)6X(His)序列。當(dāng)Cas9以NLS序列表達(dá)時(shí),Cas9RNP復(fù)合物在進(jìn)入細(xì)胞后立即定位到細(xì)胞核。不需要體內(nèi)轉(zhuǎn)錄或翻譯,提高了效率。此外,與其他系統(tǒng)相比,EGFP標(biāo)簽可作為追蹤或分類轉(zhuǎn)染細(xì)胞的報(bào)告器,通過熒光細(xì)胞分選(FACS)富集所需基因組編輯的細(xì)胞群。它降低了在基因組編輯應(yīng)用中與單細(xì)胞克隆和基因分型相關(guān)的人工和成本。產(chǎn)品特點(diǎn)如下:無(wú)DNA:沒有外部DNA添加;高切割效率:NLS確保Cas9蛋白高效進(jìn)入細(xì)胞核;低脫靶效應(yīng):Cas9核酸酶的瞬時(shí)表達(dá)提高了切割的特異性;節(jié)省時(shí)間:無(wú)需轉(zhuǎn)錄和翻譯;減少勞動(dòng)力:通過基于EGFP的FACS富集細(xì)胞群以進(jìn)行所需的基因組編輯。C端His標(biāo)簽增加了融合蛋白檢測(cè)方法的選擇??蓱?yīng)用于:通過體外DNA切割篩選高效和特異性靶向gRNA。通過電穿孔或注射與特定gRNA結(jié)合時(shí)的體內(nèi)基因編輯。通過基于EGFP的FACS富集細(xì)胞群以進(jìn)行所需的基因組編輯。儲(chǔ)存條件-25~-15℃保存,有效期1年。
RecombinantBiotinylatedHumanMSLN/MesothelinProtein,hFc-AviTag分子別名(Synonyms)Mesothelin;CAK1;MSLN;MPFSMRP表達(dá)區(qū)間及表達(dá)系統(tǒng)(Source)BiotinylatedHumanMSLN/MesothelinProteinisexpressedfromHEK293withhFctagandAvitagattheC-Terminus.ItcontainsGlu296-Gly580.[Accession|Q13421-2]分子量大?。∕olecularWeight)TheproteinhasapredictedMWof61.1kDa.Duetoglycosylation,theproteinmigratesto70-80kDabasedonSDS-PAGEresult.(Endotoxin)Lessthan1EUperμgbytheLALmethod.純度(Purity)>95%asdeterminedbySDS-PAGEandHPLC.活性(Activity)ELISAData:ImmobilizedAnti-MSLNAntibody,hFcTagat1μg/ml(100μl/well)ontheplate.DoseresponsecurveforBiotinylatedHumanMSLN,hFcTagwiththeEC50of18.4ng/mldeterminedbyELISA.內(nèi)分泌腺衍生的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(EG-VEGF),也稱為(PK1),是分泌蛋白的原蛋白蛋白家族的成員。
大腸桿菌系統(tǒng)通常是小分子細(xì)胞質(zhì)蛋白或結(jié)構(gòu)域表達(dá)的宿主。用大腸桿菌生產(chǎn)蛋白質(zhì),由于只需要簡(jiǎn)單的培養(yǎng)基和條件,因此費(fèi)用低且方便。此外,除了無(wú)細(xì)胞表達(dá),它是速度的系統(tǒng),大腸桿菌倍增時(shí)間(約20min)比酵母(2h)、昆蟲細(xì)胞和哺乳動(dòng)物細(xì)胞都快。一般來說,在大腸桿菌中表達(dá)重組蛋白包括:1.將一個(gè)編碼目標(biāo)蛋白的質(zhì)粒導(dǎo)入宿主菌;2.培養(yǎng)細(xì)胞至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期;3.誘導(dǎo)蛋白表達(dá)。選擇合適的表達(dá)載體合適的宿主選定后,相應(yīng)的有許多工程化克隆位點(diǎn)和用于驅(qū)動(dòng)蛋白表達(dá)的非編碼序列的載體可用。啟動(dòng)子通常是可誘導(dǎo)的,以在細(xì)胞生長(zhǎng)到合適的密度前阻止目標(biāo)蛋白表達(dá)。大部分載體還提供目標(biāo)蛋白與一系列蛋白標(biāo)簽構(gòu)建融合蛋白的選擇。常用的大腸桿菌表達(dá)載體分為以下兩大類:E.coliRNA聚合酶轉(zhuǎn)錄的載體AFGF在調(diào)節(jié)細(xì)胞存活,細(xì)胞分裂,血管生成,細(xì)胞分化和細(xì)胞遷移中起重要作用。Recombinant Human CA9/Carbonic Anhydrase IX (His-Avi Tag)
然而,在肝臟中,IL-28A誘導(dǎo)的Th1細(xì)胞因子反應(yīng)有助于T細(xì)胞介導(dǎo)的肝炎的炎癥。Recombinant Mouse FABP1
3C蛋白酶是切割小RNA病毒科非結(jié)構(gòu)蛋白的關(guān)鍵酶,在病毒復(fù)制過程中發(fā)揮著重要作用。鼻病毒屬于小RNA病毒科,其中的人鼻病毒3C蛋白酶基因編碼區(qū)全長(zhǎng)552bp,編碼的蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量約為22000Da。人鼻病毒3C蛋白酶具有高度的酶切特異性,能特異切割位于Gln-Gly之間的肽鍵,識(shí)別位點(diǎn)為L(zhǎng)eu-Glu-Val-Leu-Phe-Gln↓Gly-Pro。本公司將人鼻病毒3C蛋白酶的編碼區(qū)基因,在大腸桿菌中進(jìn)行重組表達(dá),純化后獲得了高純度的重組3C蛋白酶,該蛋白酶能特異切割含有3C酶切位點(diǎn)的融合蛋白,具有良好的生物學(xué)活性。同時(shí),本公司生產(chǎn)的3C蛋白酶帶有GST和MAT標(biāo)簽蛋白,有利于后期將其從酶切體系中去除。產(chǎn)品性質(zhì):中文別名(Chinesesynonym):3C蛋白酶英文別名(Englishsynonym):3CProtease來源(Source):大腸桿菌表達(dá)標(biāo)簽(label):GST-3CProtease-MAT純度(Purity):經(jīng)SDS-PAGE及HPLC分析,純度>95%分子量(Molecularweight):47.38kDa比活性(Specificactivity):500U/ml緩沖液組分(Buffer):50mMTris-HCl,150mMNaCl,1mMEDTA,1mMDTT,pH7.0酶活定義(UnitDefinition):在緩沖液中切割100μg被檢測(cè)的融合蛋白,反應(yīng)條件為4℃16小時(shí),切割率≥90%運(yùn)輸和保存方法:干冰運(yùn)輸;保存于-20℃。Recombinant Mouse FABP1