N-糖苷酶F(PNGaseF)酶活定義(UnitDefinition)1個酶活力單位指在10μL的反應體系中,37℃條件下1小時從10μg變性RNaseB中除去超過95%的碳水化合物所需要的酶量。儲存條件-15~-25℃保存,有效期1年。使用說明變性條件下蛋白質去糖基化1)在水中加入1μLBuffer1和目標糖蛋白(1-20μg),至終體積10μL;2)100℃溫度下煮沸10min使其變性,冰上冷卻,離心10秒;3)加入2μL的Buffer2、2μL的10%NP-40、6μL去離子水,總反應體積20μL;4)加入0.2~0.5μL的PNGase,輕輕混勻。在37℃孵育1-3h。非變性條件下蛋白質去糖基化1)在水中加入2μL的Buffer2和目標糖蛋白(1-20μg)至體積為20μL。2)加入0.5~1μL的PNGaseF,輕輕混勻。3)37°C孵育4-24h。注意:在變性條件下大多數底物能夠更好的去糖基化,在非變性條件下可能需要增加PNGaseF的量和延長孵育時間。SUMO蛋白酶識別完整的含有100個氨基酸的SUMO標簽蛋白,并能高效地把SUMO從融合蛋白上切割下來。Recombinant Mouse IL-2R gamma/CD132 Protein,His Tag
糖苷內切酶H是一種重組糖苷酶,能夠對N-糖蛋白中的高甘露糖和某些雜合型寡聚糖的殼二糖結構進行切割,去除糖蛋白中的N-連接高甘露糖。糖苷內切酶H克隆自褶皺鏈霉菌(Streptomycesplicatus)。并在酵母中重組表達。本產品帶his標簽,常應用于抗體及其相關蛋白完全去糖基化。另外,我司還提供其他類型的糖苷酶,包括糖苷內切酶S(Cat#20413ES),酵母重組表達的N-糖苷酶F(比活性:750000U/mL),酵母重組表達的N-糖苷酶F(比活性:100000U/mL)。儲存條件-15~-25℃保存,有效期1年。使用說明變性條件下蛋白質去糖基化1)在水中加入1μLBuffer1和目標糖蛋白(1-20μg),至終體積10μL;2)100℃溫度下煮沸10min使其變性,冰上冷卻,離心10秒;3)加入2μL的Buffer2,8μL去離子水,總反應體積20μL;4)加入1-2μL的EndoH,輕輕混勻。在37℃孵育1-3h。5)65℃下熱失活10分鐘。非變性條件下蛋白質去糖基化1)在水中加入2μL的Buffer2和目標糖蛋白(1-20μg)至終體積為20μL。2)加入2~5μL的EndoH,輕輕混勻。3)37°C孵育4-24h。注意:在變性條件下大多數底物能夠更好的去糖基化,在非變性條件下可能需要增加EndoH的量和延長孵育時間。Recombinant Human PD-1/PDCD1 Protein,hFc Tag重組腸激酶(rEK)是一種高純度的重組牛腸激酶輕鏈片段,氨基酸序列與牛腸激酶輕鏈一致,有著酶切位點。
RecombinantHumanACE2/ACEHProtein,hFcTag性能參數,分子別名(Synonyms)ACE2;ACEH;ACE-2表達區(qū)間及表達系統(tǒng)(Source)HumanACE2/ACEHProteinisexpressedfromHEK293withhFctagattheC-Terminus.ItcontainsGln18-Ser740.[Accession|Q9BYF1-1]分子量大小(MolecularWeight)TheproteinhasapredictedMWof109.2kDa.Duetoglycosylation,theproteinmigratesto115-130kDabasedonSDS-PAGEresult.Endotoxin)Lessthan1EUperμgbytheLALmethod.純度(Purity)>95%asdeterminedbySDS-PAGEandHPLC.活性(Activity)ELISAData:ImmobilizedSARS-COV-2SpikeS(B.1.1.529/Omicron)Trimer,HisTagat1μg/ml(100μl/well)ontheplate.DoseresponsecurveforHumanACE2,hFcTagwiththeEC50of13.7ng/mldeterminedbyELISA.制劑(Formulation)Lyophilizedfrom0.22μmfilteredsolutioninPBS(pH7.4).Normally8%trehaloseisaddedasprotectantbeforelyophilization.重構方法(Reconstitution)Centrifugethetubebeforeopening.Reconstitutingtoaconcentrationmorethan100μg/mlisrecommended.Dissolvethelyophilizedproteinindistilledwater.
α-凝血酶(α-Thrombin)是一種高度特異性的絲氨酸蛋白酶,由凝血酶原(Prothrombin,II因子)經蛋白水解活化而來。它在凝血過程中起著非常重要的作用,不僅能夠促使纖維蛋白凝塊的產生,還負責提供反饋信號來尋找前輔因子:V因子和VIII因子。也可以用作血管收縮劑。在體內,活化的X因子(FactorXa)切割凝血酶原,釋放出活性肽并將凝血酶切割成具有催化活性的α-凝血酶。α-凝血酶由一條輕鏈(Achain)(Mw~6,000)和一條重鏈(Bchain)(Mw~31,000)通過二硫鍵連接而成。某些情況下,α-凝血酶會發(fā)生自溶生成β-凝血酶和γ-凝血酶。β-凝血酶由對α-凝血酶A鏈水解并切割含有B鏈糖基化位點的小片段(B1,B2)組合而成。除了用于凝血研究之外,α-凝血酶還常用來位點特異性切割融合蛋白。基因重組時將凝血酶識別位點插入在目的蛋白與利于后續(xù)純化和/或表達的多肽或者蛋白之間,通過凝血酶切割表達的重組子即可釋放目的蛋白。凝血酶本身可通過親和層析技術快速去除。本品是由勻質化的人凝血酶原經由Xa因子,Va因子和磷脂活化而得,經SDS-PAGE檢測確保凝血酶原的完全活化,并以NIH凝血酶的標準品為參考,提供的酶活力不少于3091NIHU/mg。UbcH3還有兩個泛素結合位點UBS1(來自aa 205-215)和UBS2(來自aa 216-225),以及一個c端酸性尾部結構域。
大腸桿菌系統(tǒng)通常是小分子細胞質蛋白或結構域表達的宿主。用大腸桿菌生產蛋白質,由于只需要簡單的培養(yǎng)基和條件,因此費用低且方便。此外,除了無細胞表達,它是速度的系統(tǒng),大腸桿菌倍增時間(約20min)比酵母(2h)、昆蟲細胞和哺乳動物細胞都快。一般來說,在大腸桿菌中表達重組蛋白包括:1.將一個編碼目標蛋白的質粒導入宿主菌;2.培養(yǎng)細胞至對數生長期;3.誘導蛋白表達。選擇合適的表達載體合適的宿主選定后,相應的有許多工程化克隆位點和用于驅動蛋白表達的非編碼序列的載體可用。啟動子通常是可誘導的,以在細胞生長到合適的密度前阻止目標蛋白表達。大部分載體還提供目標蛋白與一系列蛋白標簽構建融合蛋白的選擇。常用的大腸桿菌表達載體分為以下兩大類:E.coliRNA聚合酶轉錄的載體α-凝血酶(α-Thrombin)可以啟動XIII因子和血小板,或者用作血管收縮劑。Recombinant Cynomolgus EPHA5 Protein,His Tag
隨著年齡的增長,人體合成透明質酸的能力會逐漸下降,導致皮膚中透明質酸的含量降低。Recombinant Mouse IL-2R gamma/CD132 Protein,His Tag
重組型TEV蛋白酶(rTEV)是經過基因工程改造和純化后的重組蛋白酶,不僅保持天然TEV酶的功能活性,且在廣譜的溫度范圍內表現(xiàn)出更強的穩(wěn)定性和特異性。rTEV是一種用來切除融合蛋白上親和標簽的常用工具酶,具有很強的位點特異性,嚴格識別七氨基酸序列EXXYXQ↓(G/S),切割位點在谷氨酰胺和甘氨酸/絲氨酸之間。普遍應用的七氨基酸序列為:Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln↓-Gly。rTEV在pH7.0,30℃時可達活性,但在pH6.0-8.5和溫度4-30℃范圍內皆有活性(見表1),使得反應條件的選擇可根據目的蛋白的情況而靈活變動。另外rTEV切割后也能利用其N端的6×His標簽,通過Ni-NTA樹脂去除,以達到純化目的蛋白的目的。產品性質來源(Source)大腸桿菌外觀(Appearance)無色透明液體比活力(SpecificActivity)5U/μL活性定義(UnitDefinition)在1×rTEVBuffer(50mMTris,pH8.0,0.1mMEDTA,1mMDTT)中,30℃反應1h,剪切>85%的3μg底物所需要的酶量定義為一個活性單位。純化(Purification)Ni柱親和純化純度(Purity)≥95%(bySDS-PAGE)產品組分運輸與保存方法冰袋運輸。Recombinant Mouse IL-2R gamma/CD132 Protein,His Tag