Endo H糖苷內(nèi)切酶H:結(jié)構(gòu)、功能及其在糖生物學(xué)中的應(yīng)用摘要Endo H糖苷內(nèi)切酶H(Endo H)是一種專門切割N-連接糖鏈的內(nèi)切酶,用于糖生物學(xué)和蛋白質(zhì)工程領(lǐng)域。本文將探討Endo H的結(jié)構(gòu)特性、催化機(jī)制、以及其在研究和臨床應(yīng)用中的潛力。引言N-連接糖基化是一種在真核細(xì)胞中普遍存在的蛋白質(zhì)修飾方式,涉及將糖鏈添加到蛋白質(zhì)的天冬酰胺殘基上。Endo H作為一種內(nèi)切酶,能夠特異性地識(shí)別并切割N-連接糖鏈中的β-N-乙酰葡糖胺苷鍵,從而在蛋白質(zhì)工程和生物制藥中發(fā)揮重要作用。Endo H的結(jié)構(gòu)特性Endo H通常來(lái)源于流感嗜血桿菌(Hemophilus influenzae),其分子質(zhì)量約為50 kDa。該酶由兩個(gè)結(jié)構(gòu)域組成:一個(gè)負(fù)責(zé)識(shí)別糖鏈的催化結(jié)構(gòu)域和一個(gè)有助于酶穩(wěn)定性的非催化結(jié)構(gòu)域。催化機(jī)制Endo H的催化機(jī)制涉及對(duì)N-連接糖鏈的特異性識(shí)別和切割。酶的活性位點(diǎn)含有多個(gè)氨基酸殘基,這些殘基與糖鏈的特定結(jié)構(gòu)相互作用,導(dǎo)致酶對(duì)底物的高特異性。Endo H催化的糖苷鍵斷裂是一水解反應(yīng),需要水分子的參與。使用全長(zhǎng)A2AR蛋白進(jìn)行藥物篩選:全長(zhǎng)A2AR蛋白可以用于ELISA、SPR親和分析,以篩選和優(yōu)化潛在的A2AR調(diào)節(jié)劑。Recombinant Cynomolgus Adiponectin/Acrp30 Protein,His Tag
牛纖維蛋白原:止血中的關(guān)鍵成分及生物醫(yī)學(xué)應(yīng)用摘要牛纖維蛋白原(Fibrinogen,F(xiàn)g),也稱為凝血因子I,是一種在血液凝固過(guò)程中發(fā)揮關(guān)鍵作用的血漿糖蛋白。本文討論了牛纖維蛋白原的結(jié)構(gòu)特性、提取方法以及各種生物醫(yī)學(xué)應(yīng)用,突出其在研究和中的重要性。引言牛纖維蛋白原是一種分子量較大的糖蛋白(約340 kDa),由肝臟的肝細(xì)胞合成。它在血液凝固的然后一步中起著主要作用,在那里它被轉(zhuǎn)化為不溶性的纖維蛋白網(wǎng),穩(wěn)定了血凝塊。該分子由兩個(gè)相同的半部分組成,每個(gè)半部分包含三個(gè)多肽鏈(α、β和γ),通過(guò)二硫鍵連接。結(jié)構(gòu)特性纖維蛋白原的結(jié)構(gòu)完整性對(duì)其功能至關(guān)重要。每個(gè)分子的一半包含三個(gè)鏈(α、β、γ),具有不同的分子量(α約63.5 kDa,β約56 kDa,γ約47 kDa)和大約4%的碳水化合物。這些鏈通過(guò)二硫鍵相互連接,這對(duì)于維持蛋白質(zhì)的構(gòu)象和活性至關(guān)重要。提取和純化已經(jīng)開發(fā)了各種方法來(lái)提取和純化血漿中的牛纖維蛋白原。傳統(tǒng)方法包括鹽析、色譜法和乙醇沉淀。鹽析,特別是使用硫酸銨,是一種常見的方法,因其簡(jiǎn)單有效而受到青睞。然而,通過(guò)這些方法獲得的纖維蛋白原純度可能會(huì)有所不同,需要進(jìn)一步的純化步驟,如離子交換色譜法,以實(shí)現(xiàn)更高程度的純化。Recombinant Human PLA2G1B Protein,hFc Tagα-凝血酶的多面性質(zhì)在其臨床使用中提出了挑戰(zhàn),特別是在平衡其止血效果與血栓形成風(fēng)險(xiǎn)之間。
分子特性的重要性:牛凝血酶的高比活度和純度使其成為科研中理想的工具酶,有助于提高實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。在醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用:牛凝血酶在血液學(xué)研究、藥物篩選和疾病模型構(gòu)建中具有廣泛的應(yīng)用,對(duì)于理解血液凝固機(jī)制和開發(fā)新型抗凝血藥物具有重要意義。安全性與穩(wěn)定性:牛凝血酶的穩(wěn)定性好,2~8℃條件下可保存3年,室溫下可保存1年,且在生產(chǎn)過(guò)程中進(jìn)行了病毒滅活處理,保證了科研使用的安全性。結(jié)論牛凝血酶(高活力,>2000 IU/mg)因其高效性和專一性,在生物醫(yī)學(xué)研究中具有不可替代的作用。深入研究其分子特性和生物學(xué)功能,將有助于推動(dòng)相關(guān)疾病的診斷。未來(lái)方向未來(lái)的研究可以集中在以下幾個(gè)方面:牛凝血酶在新型抗凝血藥物開發(fā)中的應(yīng)用。牛凝血酶在疾病模型,特別是血栓性疾病研究中的應(yīng)用。牛凝血酶作為分子生物學(xué)工具酶的進(jìn)一步優(yōu)化和改進(jìn)。
Coronavirusesarecommonlycomprisedoffourstructuralproteins:Spikeprotein(S),Envelopeprotein(E),Membraneprotein(M)andNucleocapsidprotein(N).TheSARS-CoV-2Sproteinisaglycoproteinthatmediatesmembranefusionandviralentry.TheSproteinishomotrimeric,witheach~180-kDamonomerconsistingoftwosubunits,S1andS2.TheRBDofSARS-CoV-2bindsametallopeptidase,angiotensin-convertingenzyme2(ACE-2).產(chǎn)品性質(zhì)別名SproteinRBD;SglycoproteinRBD;SpikeproteinRBDAccessionQHD43416.1表達(dá)區(qū)間及表達(dá)系統(tǒng)RecombinantSARS-CoV-2SpikeRBD(OmicronBA.4/BA.5/BA.5.1.3/BA.5.2)ProteinisexpressedfromExpi293withHistagattheC-terminal.ItcontainsArg319-Phe541(G339D,S371F,S373P,S375F,T376A,D405N,R408S,K417N,N440K,L452R,S477N,T478K,E484A,F486V,Q498R,N501Y,Y505H).跨膜蛋白在宿主細(xì)胞中的表達(dá)水平通常有點(diǎn)低,研發(fā)困難,對(duì)蛋白表達(dá)生產(chǎn)平臺(tái)技術(shù)要求極高。
Name:4-1BBR/TNFRSF9,Human同義:Tnfrsf9,CD137抗原,T細(xì)胞抗原ILA描述:4-1bb受體,也稱tnfrsf9是tnf超家族受體的一個(gè)成員。它主要表達(dá)在各種T細(xì)胞表面,但也存在于B細(xì)胞、單核細(xì)胞和各種轉(zhuǎn)化細(xì)胞系中。4-1bb受體結(jié)合到4-1bbl,為T淋巴細(xì)胞提供共同刺激信號(hào)。4-1b受體的信號(hào)傳遞與抗原表達(dá)過(guò)程和細(xì)胞毒性T細(xì)胞的生成有關(guān)。物種:人類資料來(lái)源:E。大腸桿菌生物活性:與標(biāo)準(zhǔn)相比具有完全生物活性。利用人外周血單核細(xì)胞產(chǎn)生的IL8的抑制作用決定了其生物活性。在4-1bb配體和4-1bb受體中,大約90%的IING都是用1g濃度進(jìn)行的。格斯序列縮短:分子式:C終端:分子量:測(cè)量的分子量:大約17.7kda,一個(gè)含有166個(gè)氨基酸的非糖化多肽鏈。Purity:>97%bySDS-PAGEandHPLCanalyses.配方:用10mmPb,PH8.0,150mm納克爾過(guò)濾濃縮液凍干.重建:我們建議在開瓶前先將此瓶簡(jiǎn)單離心,以便將其放在底部。在無(wú)菌蒸餾水或含有0.1%BSA的水緩沖液中再形成濃度為0.1-1.0毫克/毫升。庫(kù)存解決方案應(yīng)分配到工作參數(shù)中,并在20℃處儲(chǔ)存。應(yīng)在適當(dāng)?shù)木彌_解決方案中進(jìn)一步稀釋。水平:Lal法測(cè)定的Rhu4-1b受體小于1歐盟/克。儲(chǔ)藏:無(wú)菌過(guò)濾白干凍干粉。全長(zhǎng)跨膜蛋白CB1,即受體1(Cannabinoid Receptor 1),是一種G蛋白偶聯(lián)受體(GPCR)。Recombinant Human CNTF
全長(zhǎng)跨膜蛋白A2AR,也就是腺苷受體A2aR(ADORA2A),是一種七次跨膜蛋白,屬于G蛋白偶聯(lián)受體。Recombinant Cynomolgus Adiponectin/Acrp30 Protein,His Tag
抑肽酶(Aprotinin),一種絲氨酸蛋白酶抑制劑,廣泛應(yīng)用于生物技術(shù)領(lǐng)域。本研究探討了利用大腸桿菌(E. coli)表達(dá)系統(tǒng)生產(chǎn)重組抑肽酶的方法,及其在科研和工業(yè)生產(chǎn)中的優(yōu)勢(shì)。引言抑肽酶,又稱胰蛋白酶抑制劑,是一種小分子蛋白,能有效抑制胰蛋白酶、糜蛋白酶等絲氨酸蛋白酶的活性。在生物制藥、細(xì)胞培養(yǎng)和分子生物學(xué)研究中,抑肽酶的使用對(duì)于防止非特異性蛋白水解至關(guān)重要。傳統(tǒng)的抑肽酶主要來(lái)源于動(dòng)物,如牛肺,但存在外源病毒污染的風(fēng)險(xiǎn)。因此,利用大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)進(jìn)行重組抑肽酶的生產(chǎn),可以提供一種無(wú)動(dòng)物源、高純度、質(zhì)量穩(wěn)定的替代品。材料與方法基因克隆與表達(dá)載體構(gòu)建:人源Ⅲ型膠原蛋白基因被克隆并構(gòu)建到適合大腸桿菌表達(dá)的質(zhì)粒載體中。大腸桿菌表達(dá)菌株的構(gòu)建:通過(guò)轉(zhuǎn)化,將構(gòu)建好的質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌宿主菌中,構(gòu)建表達(dá)菌株。發(fā)酵培養(yǎng):利用發(fā)酵罐進(jìn)行大腸桿菌的擴(kuò)大培養(yǎng),以提升重組抑肽酶的產(chǎn)量。蛋白純化:通過(guò)多次柱純化獲得高純度的重組抑肽酶。Recombinant Cynomolgus Adiponectin/Acrp30 Protein,His Tag