T4UvsX重組酶的保存和純化是實驗室工作流程中的重要環(huán)節(jié)，確保了酶的穩(wěn)定性和活性。以下是根據(jù)搜索結(jié)果提供的信息：保存條件：-T4UvsX重組酶通常在-20°C的條件下保存，可以保持3年的有效期。-某些產(chǎn)品說明中提到，該制品不含甘油，可用于建立凍干體系，這可能對長期保存和運輸有額外的好處。-建議避免反復(fù)凍融，因為這可能會影響酶的活性。純化過程：-T4UvsX重組酶是由大腸桿菌表達(dá)和純化的。這意味著科學(xué)家首先將T4噬菌體的uvsX基因克隆到適合在大腸桿菌中表達(dá)的質(zhì)粒載體中。-然后將這個質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到大腸桿菌宿主細(xì)胞中，使其表達(dá)T4UvsX蛋白。-接下來，通過一系列生化步驟從大腸桿菌細(xì)胞中提取和純化T4UvsX蛋白，這些步驟可能包括細(xì)胞裂解、離心、層析等技術(shù)。注意事項：-T4UvsX重組酶的保存液中甘油含量為20%，建議單獨分裝保存，以避免反復(fù)凍融。-該酶無核酸酶活性，這表明它在催化反應(yīng)時不會切割DNA鏈，而是促進(jìn)DNA鏈的重組。-本產(chǎn)品用于科研用途，不應(yīng)用于臨床診斷。應(yīng)用：-T4UvsX重組酶主要用于等溫擴(kuò)增技術(shù)，如重組酶聚合酶擴(kuò)增（RPA），這是一種快速、靈敏的核酸檢測技術(shù)。通過遵循這些保存和純化指南，研究人員可以確保T4UvsX重組酶在實驗中的有效性和可靠性。FnCas12a特異性識別并剪切帶PAM序列的雙鏈DNA（dsDNA）靶標(biāo)，其PAM序列為5'-TTN-3'，與Cas9的PAM序列不同。Recombinant Human CD24 Protein,His-Avi Tag

pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶是一種經(jīng)過改造的高活性Tn5轉(zhuǎn)座酶，與ProteinA融合，形成一種新型融合酶，應(yīng)用于CUT&Tag技術(shù)中，用于研究蛋白質(zhì)與基因組DNA的相互作用。這種融合酶具備以下特點：1.**高活性**：pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶是超高活性的突變形式，體外轉(zhuǎn)座效率比野生型高1000倍。2.**ProteinA融合**：pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶的N端結(jié)構(gòu)域為ProteinA的一部分，可以與免疫球蛋白的Fc區(qū)相互作用，特別是與大多數(shù)哺乳動物的IgG結(jié)合。3.**Tn5轉(zhuǎn)座酶活性**：C端結(jié)構(gòu)域為Tn5轉(zhuǎn)座酶，能夠特異性識別轉(zhuǎn)座子兩端反向重復(fù)的ME序列(MosaicEnd)，并在形成轉(zhuǎn)座復(fù)合體后隨機(jī)插入靶DNA中。4.**應(yīng)用廣**：適用于CUT&Tag技術(shù)、高通量測序建庫、ATAC-seq等，特別適用于早期胚胎發(fā)育、干細(xì)胞、以及表觀遺傳學(xué)等研究領(lǐng)域。5.**操作簡便**：pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶的使用簡化了實驗步驟，可以在一步反應(yīng)中實現(xiàn)DNA片段化和接頭連接，從細(xì)胞到二代測序文庫的轉(zhuǎn)化過程需9小時。6.**低細(xì)胞投入量**：CUT&Tag技術(shù)允許從低至60個細(xì)胞的樣本中獲得結(jié)果，甚至可以應(yīng)用于單細(xì)胞水平的研究。7.**高質(zhì)量結(jié)果**：pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶的使用可以保證DNA片段化，同時獲得的蛋白純度高、核酸殘留低。Recombinant Mouse ALK Protein,hFc Tag與其他Cas12蛋白相比，F(xiàn)nCas12a蛋白的分子量較小，大約在400-700個氨基酸之間。

1stStrandcDNASynthesisKit(RNaseH-)主要用于從RNA模板合成鏈cDNA，而不是直接用于線性RNA的放大。然而，合成的cDNA可以作為模板用于后續(xù)的線性RNA放大過程，這通常涉及以下幾個步驟：1.**cDNA合成**：使用1stStrandcDNASynthesisKit(RNaseH-)按照試劑盒的說明進(jìn)行操作，從線性RNA模板合成鏈cDNA。2.**第二鏈cDNA合成**：在某些情況下，可能需要合成雙鏈cDNA。這可以通過使用DNA聚合酶和第二鏈合成試劑來完成，從而獲得完整的雙鏈cDNA。3.**線性RNA放大**：一旦獲得了cDNA，可以使用體外轉(zhuǎn)錄(IVT,InVitroTranscription)技術(shù)來放大RNA。這通常涉及以下步驟：-使用含有RNA聚合酶啟動子序列的特定引物對cDNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增。-使用含有RNA聚合酶識別位點的引物進(jìn)行體外轉(zhuǎn)錄反應(yīng)，以合成大量RNA拷貝。4.**RNA純化**：體外轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的RNA需要通過適當(dāng)?shù)姆椒ǎㄈ缰鶎游龌虺恋恚┻M(jìn)行純化，以去除DNA模板、未反應(yīng)的核苷酸和其他雜質(zhì)。5.**RNA質(zhì)量檢測**：使用凝膠電泳或生物分析儀檢測RNA的質(zhì)量和大小，確保RNA的完整性和純度。

磁珠法質(zhì)粒小量抽提試劑盒中的磁珠分離通常涉及以下步驟：1.**裂解細(xì)胞**：-首先，使用裂解液（含有SDS等成分）裂解細(xì)菌細(xì)胞，釋放出質(zhì)粒DNA。2.**結(jié)合磁珠**：-將磁珠加入到裂解后的混合物中，磁珠表面通常修飾有能夠特異性結(jié)合核酸的配體，使得質(zhì)粒DNA吸附于磁珠表面。3.**磁分離**：-將含有磁珠和質(zhì)粒DNA的混合物置于磁分離架上。磁分離架產(chǎn)生磁場，使得磁珠迅速聚集在管壁或管底。4.**未結(jié)合物質(zhì)**：-在磁珠固定后，小心移除上清液，避免擾動磁珠。上清液中含有未吸附的蛋白質(zhì)、RNA和其他細(xì)胞碎片。5.**洗滌磁珠**：-向磁珠中加入洗滌液，輕輕混勻以去除殘留的雜質(zhì)，然后再次使用磁分離架分離磁珠和洗滌液。6.**重復(fù)洗滌**：-根據(jù)試劑盒的說明，可能需要進(jìn)行多次洗滌以確保高度純化。每次洗滌后都需洗滌液。7.**干燥磁珠**（如果需要）：-在某些情況下，可能需要去除洗滌后的殘留液體，讓磁珠在磁場作用下干燥，但要注意不要使磁珠完全干燥，以免影響DNA的洗脫。8.**洗脫質(zhì)粒DNA**：-使用洗脫液（通常是低鹽或高pH的緩沖液）將質(zhì)粒DNA從磁珠上洗脫。洗脫液可以破壞磁珠與DNA之間的結(jié)合力，釋放DNA。。

轉(zhuǎn)座酶是一類能夠催化轉(zhuǎn)座子（一種可移動的DNA序列）在基因組中從一個位置移動到另一個位置的酶。轉(zhuǎn)座子可以在DNA分子上“跳躍”，在新的位置上插入自己的拷貝，而原始位置的轉(zhuǎn)座子則可能被切除或保留。轉(zhuǎn)座酶的作用是轉(zhuǎn)座過程中的關(guān)鍵因素，它們可以被分為兩類：1.**復(fù)制型轉(zhuǎn)座酶**：在復(fù)制型轉(zhuǎn)座過程中，轉(zhuǎn)座子首先被復(fù)制，然后復(fù)制的拷貝到新的基因組位置，原始的轉(zhuǎn)座子留在原位。這種機(jī)制通常涉及到“復(fù)制-粘貼”的過程。2.**剪切型轉(zhuǎn)座酶**：在剪切型轉(zhuǎn)座過程中，轉(zhuǎn)座子從原始位置被切除，然后到新的基因組位置。這涉及到“剪切-粘貼”的過程。轉(zhuǎn)座酶的活性和轉(zhuǎn)座子的移動可以對基因組的結(jié)構(gòu)和功能產(chǎn)生重要影響，包括：-**基因突變**：轉(zhuǎn)座子的插入可能破壞基因的正常功能，導(dǎo)致突變。-**基因組多樣性**：轉(zhuǎn)座活動增加了基因組的多樣性，有助于物種適應(yīng)環(huán)境變化。-**基因調(diào)控**：轉(zhuǎn)座子的插入可能激起或抑制某些基因的表達(dá)。-**新基因產(chǎn)生**：在某些情況下，轉(zhuǎn)座子的移動可以導(dǎo)致新基因的產(chǎn)生。

跨膜蛋白的表達(dá)與制備需要采用合適的表達(dá)載體、宿主細(xì)胞、培養(yǎng)條件和純化工藝等方法，優(yōu)化表達(dá)和純化過程。Recombinant Human CD24 Protein,His-Avi Tag

pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶是一種經(jīng)過特殊改造的融合蛋白，由ProteinA和高活性的Tn5轉(zhuǎn)座酶組成，具有以下主要應(yīng)用：1.**高通量測序建庫**：pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶可以用于快速構(gòu)建用于高通量測序的DNA文庫，通過其轉(zhuǎn)座酶活性實現(xiàn)DNA片段化，同時加上測序接頭，簡化了傳統(tǒng)DNA測序建庫的多步過程。2.**CUT&Tag技術(shù)**：這是一種新興的蛋白質(zhì)與DNA相互作用研究方法，pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶利用ProteinA與特定抗體結(jié)合，將轉(zhuǎn)座酶帶到目標(biāo)蛋白附近進(jìn)行DNA切割和標(biāo)簽添加，實現(xiàn)對蛋白質(zhì)結(jié)合位點的高通量測序分析。CUT&Tag技術(shù)具有高特異性、低背景噪音、高靈敏度、良好重復(fù)性等優(yōu)點，適用于表觀遺傳學(xué)、干細(xì)胞等領(lǐng)域的研究。3.**ATAC-seq**：pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶也可用于ATAC-seq實驗，這是一種研究染色質(zhì)可及性的方法，通過轉(zhuǎn)座酶在沒有核酸酶消化的情況下切割染色質(zhì)DNA，然后在切割位點加上測序接頭，進(jìn)行后續(xù)的測序分析。4.**轉(zhuǎn)錄組測序快速建庫**：有研究開發(fā)了基于Tn5轉(zhuǎn)座酶的轉(zhuǎn)錄組測序快速建庫方法，例如SHERRY方法，它利用Tn5轉(zhuǎn)座酶直接作用于RNA/DNA雜交鏈，簡化了建庫過程，適用于單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組測序，提高了樣本的利用率和測序速度。