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Recombinant Cynomolgus EPHA2 Protein

來源: 發(fā)布時間:2024-07-15

磁珠法質(zhì)粒小量抽提試劑盒通過一系列優(yōu)化的步驟來確保從細菌細胞中提取高質(zhì)量和高純度的質(zhì)粒DNA。以下是這一過程的一般步驟:1.**細胞培養(yǎng)**:-首先,將含有質(zhì)粒的大腸桿菌在適宜的培養(yǎng)基中培養(yǎng)至適宜密度(通常是OD600約0.6-1.2)。2.**裂解細胞**:-使用試劑盒提供的裂解液(含有SDS和可能的其他裂解成分)破壞細菌細胞壁和膜,釋放出細胞內(nèi)容物。3.**吸附磁珠**:-將磁珠加入裂解后的混合物中,磁珠表面修飾有能夠特異性結(jié)合核酸的配體,使得質(zhì)粒DNA吸附于磁珠表面。4.**磁分離**:-利用磁力架將吸附有質(zhì)粒DNA的磁珠從溶液中分離出來,去除未結(jié)合的蛋白質(zhì)和其他細胞碎片。5.**洗滌雜質(zhì)**:-經(jīng)過幾次洗滌步驟,使用試劑盒提供的洗滌液去除吸附在磁珠表面的蛋白質(zhì)、RNA和其他雜質(zhì)。6.**去除洗滌液**:-磁分離后,小心地移除洗滌液,避免磁珠干燥或吸入磁珠,以確保純度。7.**洗脫質(zhì)粒**:-使用試劑盒提供的洗脫液(通常是低鹽或高pH的緩沖液)將質(zhì)粒DNA從磁珠上洗脫下來。8.**收集質(zhì)粒**:-洗脫后的質(zhì)粒DNA通常在室溫或4°C下保存,避免多次凍融,以維持DNA的完整性。

CB1受體分布于大腦和外周神經(jīng)系統(tǒng)中,與多種生理功能有關(guān),包括疼痛感知、食欲調(diào)節(jié)、情緒調(diào)節(jié)。Recombinant Cynomolgus EPHA2 Protein,His-Avi Tag

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T4UvsX重組酶是一種來源于T4噬菌體的酶,屬于RecA/Rad51家族的同源體。這種重組酶在雙鏈DNA斷裂的修復以及復制叉重新啟動的過程中扮演著重要角色。T4UvsX重組酶能夠與其他DNA結(jié)合蛋白或輔助因子協(xié)同作用,與單鏈DNA形成核酸蛋白復合物。該復合物通過尋找與目標DNA互補的區(qū)域進行雜交,以完成鏈置換反應,且此酶本身不具有核酸酶活性。產(chǎn)品應用方面,T4UvsX重組酶主要用于等溫擴增技術(shù),如重組酶聚合酶擴增(RPA)技術(shù)。它在實驗中與T4UvsY重組酶、BsuDNA聚合酶(大片段)、T4基因32蛋白(gp32)等組分一同使用,以優(yōu)化RPA擴增反應。T4UvsX重組酶的保存條件為-20℃,可保存3年,或者-20℃儲存有效期為2年,避免反復凍融。其儲存液通常包含Tris-HCl、KCl、DTT、EDTA和甘油等成分,以保持酶的穩(wěn)定性和活性。熱失活處理為60℃孵育10分鐘。在使用T4UvsX重組酶時,需要注意其保存液中甘油含量較高,建議單獨分裝保存,并且在操作時穿著實驗服并佩戴一次性手套,以確保安全。此外,該產(chǎn)品供科研使用,不應用于臨床診斷。Recombinant Human PLD4 Protein,His Tag由于Cas9 NLS系統(tǒng)不涉及DNA的整合,因此降低了外源DNA整合至細胞基因組的風險 。

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T4UvsX重組酶的保存和純化是實驗室工作流程中的重要環(huán)節(jié),確保了酶的穩(wěn)定性和活性。以下是根據(jù)搜索結(jié)果提供的信息:保存條件:-T4UvsX重組酶通常在-20°C的條件下保存,可以保持3年的有效期。-某些產(chǎn)品說明中提到,該制品不含甘油,可用于建立凍干體系,這可能對長期保存和運輸有額外的好處。-建議避免反復凍融,因為這可能會影響酶的活性。純化過程:-T4UvsX重組酶是由大腸桿菌表達和純化的。這意味著科學家首先將T4噬菌體的uvsX基因克隆到適合在大腸桿菌中表達的質(zhì)粒載體中。-然后將這個質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到大腸桿菌宿主細胞中,使其表達T4UvsX蛋白。-接下來,通過一系列生化步驟從大腸桿菌細胞中提取和純化T4UvsX蛋白,這些步驟可能包括細胞裂解、離心、層析等技術(shù)。注意事項:-T4UvsX重組酶的保存液中甘油含量為20%,建議單獨分裝保存,以避免反復凍融。-該酶無核酸酶活性,這表明它在催化反應時不會切割DNA鏈,而是促進DNA鏈的重組。-本產(chǎn)品供科研用途,不應用于臨床診斷。應用:-T4UvsX重組酶主要用于等溫擴增技術(shù),如重組酶聚合酶擴增(RPA),這是一種快速、靈敏的核酸檢測技術(shù)。通過遵循這些保存和純化指南,研究人員可以確保T4UvsX重組酶在實驗中的有效性和可靠性。

pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶是一種經(jīng)過特殊改造的融合蛋白,由ProteinA和高活性的Tn5轉(zhuǎn)座酶組成,具有以下主要應用:1.**高通量測序建庫**:pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶可以用于快速構(gòu)建用于高通量測序的DNA文庫,通過其轉(zhuǎn)座酶活性實現(xiàn)DNA片段化,同時加上測序接頭,簡化了傳統(tǒng)DNA測序建庫的多步過程。2.**CUT&Tag技術(shù)**:這是一種新興的蛋白質(zhì)與DNA相互作用研究方法,pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶利用ProteinA與特定抗體結(jié)合,將轉(zhuǎn)座酶帶到目標蛋白附近進行DNA切割和標簽添加,實現(xiàn)對蛋白質(zhì)結(jié)合位點的高通量測序分析。CUT&Tag技術(shù)具有高特異性、低背景噪音、高靈敏度、良好重復性等優(yōu)點,適用于表觀遺傳學、干細胞等領(lǐng)域的研究。3.**ATAC-seq**:pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶也可用于ATAC-seq實驗,這是一種研究染色質(zhì)可及性的方法,通過轉(zhuǎn)座酶在沒有核酸酶消化的情況下切割染色質(zhì)DNA,然后在切割位點加上測序接頭,進行后續(xù)的測序分析。4.**轉(zhuǎn)錄組測序快速建庫**:有研究開發(fā)了基于Tn5轉(zhuǎn)座酶的轉(zhuǎn)錄組測序快速建庫方法,例如SHERRY方法,它利用Tn5轉(zhuǎn)座酶直接作用于RNA/DNA雜交鏈,簡化了建庫過程,適用于單細胞轉(zhuǎn)錄組測序,提高了樣本的利用率和測序速度。

跨膜蛋白的多功能性使它們成為理想的藥物作用靶點,例如四次跨膜蛋白CD20、Claudin18.2。

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重組酶聚合酶擴增技術(shù)(RecombinasePolymeraseAmplification,簡稱RPA)是一種核酸擴增技術(shù),能夠在等溫條件下快速檢測特定DNA序列。這項技術(shù)以其快速、靈敏度高、特異性強、對設(shè)備要求低等優(yōu)點,在臨床快速診斷、食品檢測、防控、工業(yè)應用、現(xiàn)場實時檢測等領(lǐng)域具有廣泛的應用潛力。**技術(shù)原理**:RPA技術(shù)主要依賴于幾種關(guān)鍵的酶和蛋白質(zhì):-**重組酶**:能夠識別并結(jié)合到單鏈核酸(寡核苷酸引物)上。-**單鏈DNA結(jié)合蛋白(SSB)**:與被置換的單鏈DNA結(jié)合,防止其重新結(jié)合形成雙鏈。-**鏈置換DNA聚合酶**:在引物定位同源序列后,進行鏈延伸,實現(xiàn)DNA的指數(shù)增長。RPA的工作原理是,重組酶與引物結(jié)合形成的蛋白-DNA復合物能在雙鏈DNA中尋找同源序列。一旦引物定位了同源序列,就會發(fā)生鏈交換反應形成并啟動DNA合成,對模板上的目標區(qū)域進行指數(shù)式擴增。整個過程進行得非???,一般可在十分鐘之內(nèi)獲得可檢出水平的擴增產(chǎn)物。**技術(shù)優(yōu)勢**:-**快速性**:RPA可以在37-42°C的等溫條件下快速完成核酸的擴增,通常在10到30分鐘內(nèi)即可完成。-**靈敏度和特異性**:RPA能夠檢測低至單拷貝的核酸模板,并具有高特異性。

使用體外轉(zhuǎn)錄技術(shù)合成gRNA,確保gRNA的質(zhì)量和純度,這對后續(xù)實驗的成功至關(guān)重要 。Recombinant Cynomolgus EPHA2 Protein,hFc Tag

全長A2aR蛋白可應用于免疫、ELISA、SPR(表面等離子共振)、BLI(生物層干涉)和細胞實驗等場景。Recombinant Cynomolgus EPHA2 Protein,His-Avi Tag

BloodDirectPCRMasterMix(2×)適合血液樣本的PCR擴增主要通過以下幾個方面:1.**抗血液抑制劑能力**:該預混合溶液含有的DNA聚合酶和其他成分能夠抵抗血液樣本中的PCR抑制劑,如膽酸鹽、血紅素、蛋白質(zhì)等。2.**優(yōu)化的緩沖體系**:預混合溶液中的緩沖體系經(jīng)過特別優(yōu)化,以適應血液樣本中的特定條件,包括pH、離子強度和Mg2+濃度,從而提高PCR擴增的效率和特異性。3.**高保真DNA聚合酶**:包含的DNA聚合酶具有高保真度,能夠在復制DNA時減少錯誤,保證擴增結(jié)果的準確性。4.**快速擴增速度**:一些BloodDirectPCRMasterMix產(chǎn)品具有快速擴增的特點,可以縮短PCR實驗的時間。5.**寬泛的GC含量適應性**:該產(chǎn)品可以用于擴增不同GC含量的基因,包括高GC和低GC區(qū)域,提高了PCR的適用性。6.**直接使用血液樣本**:無需對血液樣本進行DNA提取或純化,可以直接將抗凝血樣品或干血斑樣品加入PCR反應中。7.**兼容性**:兼容多種抗凝劑,如EDTA、肝素或檸檬酸鈉,適用于不同來源的血液樣本。8.**簡化的操作流程**:由于省去了DNA提取的步驟,BloodDirectPCRMasterMix簡化了實驗操作流程,減少了實驗時間和潛在的污染風險。Recombinant Cynomolgus EPHA2 Protein,His-Avi Tag