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Recombinant Cynomolgus ANXA1 Protein

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2024-11-09

5'-3'外切核酸酶活性是指DNA聚合酶能夠從DNA鏈的5'端向3'端切除核苷酸的能力。這種活性通常用于修復(fù)受損的DNA或去除錯(cuò)誤配對(duì)的核苷酸。具體來(lái)說(shuō),5'-3'外切核酸酶活性可以在DNA合成過(guò)程中切除前方的核苷酸,幫助錯(cuò)誤或不需要的序列,從而確保DNA的正確復(fù)制和修復(fù)。在DNA聚合酶中,5'-3'外切核酸酶活性與聚合酶活性相輔相成。聚合酶在合成新鏈時(shí),5'-3'外切酶活性可以在發(fā)現(xiàn)錯(cuò)誤時(shí)進(jìn)行修正,確保合成的DNA鏈的準(zhǔn)確性。例如,E.coliDNA聚合酶I具有這種外切酶活性,可以在合成過(guò)程中去除錯(cuò)誤的核苷酸,從而提高DNA的保真度。需要注意的是,BstDNAPolymerase,LargeFragment不具有5'-3'外切核酸酶活性,這使得它在某些應(yīng)用中更為穩(wěn)定,特別是在等溫?cái)U(kuò)增反應(yīng)中,如LAMP(環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增)和RCA(滾環(huán)擴(kuò)增)等。泛素分子可以通過(guò)其內(nèi)部的賴氨酸殘基(如Lys48)與其他泛素分子形成多聚泛素鏈。Recombinant Cynomolgus ANXA1 Protein,His Tag

Recombinant Cynomolgus ANXA1 Protein,His Tag,標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

在PCR產(chǎn)物的克隆中,Lambda核酸外切酶(λExonuclease)有其特定的應(yīng)用和優(yōu)勢(shì),但它不能完全替代其他酶。以下是一些替代酶和它們的特點(diǎn):1.**ExonucleaseIII(ExoIII)**:-ExoIII具有3'→5'外切脫氧核糖核酸酶活性,尤其適合雙鏈DNA的平末端、5'-突出末端或切口,從DNA鏈的3'-端釋放5'-單磷酸核苷酸,產(chǎn)生單鏈DNA片段。-與Lambda核酸外切酶相比,ExoIII對(duì)具有3'-突出末端的DNA有活性,而Lambda核酸外切酶則對(duì)5'-磷酸化的雙鏈DNA有更高的活性。2.**TaqDNA聚合酶**:-在平端克隆中,可以使用TaqDNA聚合酶和dATP進(jìn)行“3'dA加尾”,以提高連接效率。-這種方法通過(guò)在PCR產(chǎn)物的3'端添加突出的腺嘌呤(dA),增加了與載體連接的可能性,從而提高克隆效率。3.**TOPO克隆載體**:-TOPO克隆載體含有共價(jià)連接的DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶I,可同時(shí)作為限制性內(nèi)切酶和連接酶。-與傳統(tǒng)PCR克隆載體相比,TOPO克隆載體具有更短的連接反應(yīng)時(shí)間、更高的克隆效率以及更簡(jiǎn)單的分子克隆實(shí)驗(yàn)方案。綜上所述,雖然Lambda核酸外切酶在特定情況下非常有用,但它不能完全替代其他酶。每種酶都有其獨(dú)特的特性和應(yīng)用場(chǎng)景,選擇合適的酶取決于具體的克隆需求和實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。Recombinant Human TIE2 Protein,His TagMultiplex Probe qPCR Mix 是一種濃縮預(yù)混液,含有抗體技術(shù)修飾的熱啟動(dòng)酶Hotstart Taq DNA聚合酶。

Recombinant Cynomolgus ANXA1 Protein,His Tag,標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

T7EndonucleaseI(T7EI)是一種特殊的DNA內(nèi)切酶,具有以下特點(diǎn):1.**識(shí)別錯(cuò)配DNA**:T7EI能夠識(shí)別并切割不完全配對(duì)的DNA、十字型結(jié)構(gòu)DNA、Holliday結(jié)構(gòu)或交叉DNA以及異源雙鏈DNA。2.**切割位點(diǎn)**:T7EI切割錯(cuò)配位點(diǎn)5'端的、第二或第三個(gè)磷酸二酯鍵。3.**靈敏度**:T7EI對(duì)錯(cuò)配DNA的識(shí)別非常靈敏,能夠檢測(cè)并切割單堿基和多堿基的錯(cuò)配。4.**應(yīng)用**:T7EI常用于CRISPR/Cas9等基因編輯技術(shù)導(dǎo)致的基因突變的鑒定。它通過(guò)識(shí)別錯(cuò)配DNA來(lái)幫助鑒定基因編輯是否成功以及是否有非目標(biāo)效應(yīng)。5.**直接電泳檢測(cè)**:T7EI的產(chǎn)物可以直接通過(guò)電泳進(jìn)行檢測(cè),這使得它在實(shí)驗(yàn)操作中更為方便。6.**來(lái)源**:T7EI來(lái)源于大腸桿菌菌株,是一種麥芽糖結(jié)合蛋白(MBP)和T7核酸內(nèi)切酶I(T7EI)的融合蛋白。7.**成本效益**:盡管T7EI在商業(yè)上使用時(shí)成本較高,但它在大規(guī)模樣本測(cè)試中,尤其是在基因突變鑒定方面,提供了一種有效的篩選方法。8.**特殊注意事項(xiàng)**:T7EI能夠識(shí)別長(zhǎng)度大于或等于2bp的插入、缺失或突變導(dǎo)致的錯(cuò)配DNA,但不能識(shí)別1bp的插入、缺失或突變。這些特點(diǎn)使得T7EndonucleaseI成為基因突變鑒定中一個(gè)非常有用的工具,尤其是在CRISPR/Cas9等基因編輯技術(shù)的應(yīng)用中。

Bst Plus DNA Polymerase (40 U/μL) 是一種從嗜熱脂肪芽孢桿菌(Thermophilic Geobacillus sp)DNA聚合酶I衍生的酶,缺乏5'-3'外切核酸酶活性。以下是關(guān)于Bst Plus DNA Polymerase (40 U/μL)的一些關(guān)鍵信息:來(lái)源和特性:Bst Plus DNA Polymerase 具有更強(qiáng)的5'-3' DNA聚合酶活性、鏈置換活性和dUTP耐受性,適合用于抗污染的等溫?cái)U(kuò)增反應(yīng),如LAMP和CPA等。應(yīng)用:主要應(yīng)用于等溫DNA擴(kuò)增,包括環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增(LAMP)和其他等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)。規(guī)格:活性定義:1 U指的是在65°C下30分鐘內(nèi)將10 nmol的dNTP整合到酸不溶物質(zhì)中的酶的量。溶液成分:包含10 mmol/L Tris-HCl、50 mmol/L KCl、0.1 mmol/L EDTA、1 mmol/L DTT、0.1% Triton X-100、50% 甘油,pH 7.5 @ 25℃。產(chǎn)品形式:提供的產(chǎn)品包括Hieff® Bst Plus DNA Polymerase (40 U/μL),貨號(hào)14402ES,以及凍干粉形式的產(chǎn)品,貨號(hào)14405ES,不含甘油。靈敏度和穩(wěn)定性:Bst Plus DNA Polymerase 具有高靈敏度,低至5copies目的基因可測(cè),且在飛克(fg)級(jí)別的模板量下也能快速達(dá)到閾值。在37°C下,該酶可以保持相對(duì)穩(wěn)定的效應(yīng)長(zhǎng)達(dá)5天,并且在-20℃下可以穩(wěn)定保存2年。儲(chǔ)存條件:建議在-25℃至-15℃下儲(chǔ)存,以保持產(chǎn)品活性,并避免反復(fù)凍融。E1在ATP的存在下激發(fā)泛素分子,通過(guò)一個(gè)硫酯鍵將泛素的C末端甘氨酸殘基與E1酶的活性連接起來(lái)。

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牛痘DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶I(VacciniaVirusDNATopoisomeraseI)是一種來(lái)源于牛痘病毒的I型真核拓?fù)洚悩?gòu)酶,具有以下功能和應(yīng)用:1.**功能**:-牛痘DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶I可以催化雙鏈DNA分子中單鏈DNA特定序列位置的磷酸二酯鍵的斷開(kāi)和連接。-具有解超螺旋的酶(DNARelaxingEnzyme)活性,能夠通過(guò)快速的酶切和連接使雙鏈共價(jià)閉合環(huán)狀的正或負(fù)超螺旋DNA發(fā)生解超螺旋,形成含有較少的正或負(fù)超螺旋的雙鏈環(huán)狀DNA分子。-能夠使雙鏈DNA形成繩結(jié)(knotting)或解開(kāi)繩結(jié)(unknotting),聯(lián)結(jié)互補(bǔ)的單鏈環(huán)狀DNA成為雙鏈環(huán)狀DNA。2.**應(yīng)用**:-作為一種DNA重組連接的新型工具酶,用于DNA載體和重組片段的連接、缺刻修復(fù)、接頭連接等。-適用于TOPO克隆載體的制備、NGS建庫(kù)中的接頭連接等。-在TOPO克隆技術(shù)中,DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶I同時(shí)具有限制酶和連接酶特性,其生物學(xué)功能是在復(fù)制期間切割并重新連接DNA。3.**使用方法**:-用于DNA快速酶切流程,包括配制體系反應(yīng)液、輕柔混勻、37℃孵育15分鐘等步驟。4.**儲(chǔ)存條件**:-建議在-25~-15℃保存,有效期為3年。5.**注意事項(xiàng)**:-避免起泡或劇烈攪拌、渦旋等操作,以防止酶失活。牛痘DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶I因其獨(dú)特的功能,在分子生物學(xué)研究和基因工程中扮演著重要的角色。CRISPR/Cas12a 是一種單一的RNA引導(dǎo)的核酸內(nèi)切酶,通過(guò)CRISPR/Cas9系統(tǒng)為靶向基因組工程提供了新的機(jī)會(huì)。1st Strand cDNA Synthesis Kit(RNase H-)(with gDNA Eraser)

One Step RT-qPCR SYBR Green Kit 是一種用于實(shí)時(shí)熒光定量PCR的試劑盒,它結(jié)合了反轉(zhuǎn)錄和PCR擴(kuò)增步驟。Recombinant Cynomolgus ANXA1 Protein,His Tag

BsuDNAPolymerase(嗜熱脂肪芽孢桿菌DNA聚合酶)與其他DNA聚合酶相比,具有一些獨(dú)特的特性和優(yōu)勢(shì):1.**鏈置換活性**:BsuDNAPolymerase保留了BacillussubtilisDNA聚合酶I的5'→3'聚合酶活性,但缺乏5'→3'核酸外切酶結(jié)構(gòu)域,這使得它具有鏈置換DNA合成的能力。這種能力對(duì)于等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)如重組酶聚合酶擴(kuò)增(RPA)和環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增(LAMP)非常重要,因?yàn)樗梢苑蛛x雙鏈DNA,允許新的DNA鏈的合成。2.**溫度穩(wěn)定性**:BsuDNAPolymerase在高溫下保持活性,這使得它適用于需要在較高溫度下進(jìn)行的擴(kuò)增反應(yīng),如RPA技術(shù)中的65°C反應(yīng)條件。3.**無(wú)核酸外切酶活性**:BsuDNAPolymerase缺乏3'→5'和5'→3'核酸外切酶活性,這意味著它不會(huì)像某些其他聚合酶那樣在合成過(guò)程中具有校對(duì)功能。這可以減少非特異性擴(kuò)增,提高擴(kuò)增的特異性。4.**高靈敏度和特異性**:BsuDNAPolymerase在等溫?cái)U(kuò)增中展現(xiàn)出高靈敏度,能夠?qū)⑽⒘亢怂崮0鍞U(kuò)增到可檢測(cè)水平,同時(shí)保持高特異性。5.**簡(jiǎn)化的操作流程**:與其他需要復(fù)雜操作和多個(gè)步驟的DNA聚合酶相比,BsuDNAPolymerase在等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)中的應(yīng)用簡(jiǎn)化了操作流程,因?yàn)樗恍枰獰嵫h(huán)儀,這使得它適合現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)和診斷。

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