1stStrandcDNASynthesisKit(RNaseH-)withgDNAEraser是一種設(shè)計(jì)用于從RNA模板合成cDNA 鏈的試劑盒,它包含gDNAEraser以去除基因組DNA的污染,以及RNaseH-逆轉(zhuǎn)錄酶以減少RNA模板的降解。以下是該試劑盒的一些關(guān)鍵特點(diǎn)和應(yīng)用:1.**去除基因組DNA污染**:試劑盒中的gDNAEraser能有效去除RNA模板中的基因組DNA污染,確保后續(xù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。2.**RNaseH-逆轉(zhuǎn)錄酶**:該試劑盒使用的逆轉(zhuǎn)錄酶缺乏RNaseH活性,有助于保護(hù)RNA模板不被過(guò)早降解,從而可以合成更長(zhǎng)的cDNA鏈。3.**高溫穩(wěn)定性**:逆轉(zhuǎn)錄酶經(jīng)過(guò)基因工程改造,具有較高的熱穩(wěn)定性,可以在高溫條件下(如50°C)進(jìn)行cDNA 鏈的合成,有助于打開(kāi)RNA的二級(jí)結(jié)構(gòu)。4.**合成長(zhǎng)鏈cDNA的能力**:能夠合成長(zhǎng)達(dá)5kb甚至更長(zhǎng)的cDNA片段,適合于需要合成全長(zhǎng)或長(zhǎng)片段cDNA的實(shí)驗(yàn)。5.**包含所有必需組分**:試劑盒包含cDNA 鏈合成所需的所有試劑,如逆轉(zhuǎn)錄酶、RNase抑制劑、隨機(jī)引物、寡聚dT引物、dNTPs、緩沖液等。6.**適用于多種RNA模板**:可以用于從總RNA或mRNA模板合成cDNA 鏈,適用于實(shí)時(shí)熒光定量RT-qPCR、3'-和5'-RACE等實(shí)驗(yàn)。畢赤酵母不僅用于實(shí)驗(yàn)室規(guī)模的蛋白生產(chǎn),還廣泛應(yīng)用于工業(yè)規(guī)模的生物分子生產(chǎn) ??贵w表達(dá)服務(wù)技術(shù)服務(wù)臨床前研究
這項(xiàng)技術(shù)服務(wù)在多個(gè)領(lǐng)域展現(xiàn)出了巨大的應(yīng)用潛力。在疫苗研發(fā)領(lǐng)域,VLP作為一種新型的疫苗候選物,具有良好的免疫原性,能夠誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生強(qiáng)烈的免疫反應(yīng)。江畢赤酵母表達(dá)的VLP疫苗可以針對(duì)多種病毒性疾病,為預(yù)防和控制傳染病提供了創(chuàng)新的解決方案。例如,在應(yīng)對(duì)一些新興病毒威脅時(shí),VLP疫苗能夠快速啟動(dòng)研發(fā)和生產(chǎn),為公眾健康提供及時(shí)的保護(hù)。此外,在生物醫(yī)學(xué)研究中,VLP還可以作為藥物載體或診斷試劑的重要組成部分,用于疾病的和檢測(cè)。漢遜酵母表達(dá)技術(shù)服務(wù)研發(fā)畢赤酵母比哺乳動(dòng)物細(xì)胞更容易進(jìn)行基因操作和培養(yǎng),并且可以生長(zhǎng)到高細(xì)胞密度。
RNaseH-酶與RNaseH+酶在逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程中的主要區(qū)別在于它們對(duì)RNA-DNA雜交鏈中的RNA部分的處理方式。RNaseH+酶在合成cDNA的同時(shí),會(huì)特異性地水解DNA-RNA雜交鏈中的RNA,留下單鏈的cDNA。這種活性有助于控制RNA:cDNA的比例,在擴(kuò)增效率一致的情況下,能夠更真實(shí)地反映原始mRNA中的基因豐度或表達(dá)量信息。相比之下,RNaseH-酶缺乏這種核糖核酸內(nèi)切酶活性,因此不會(huì)在逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程中降解RNA-DNA雜交鏈中的RNA部分。這使得RNaseH-酶在合成cDNA時(shí)能夠保護(hù)RNA模板不被過(guò)早降解,從而可以合成更長(zhǎng)的cDNA鏈。這對(duì)于需要合成全長(zhǎng)或長(zhǎng)片段cDNA的實(shí)驗(yàn)尤為重要,因?yàn)樗梢蕴岣唛L(zhǎng)鏈cDNA的產(chǎn)量和質(zhì)量。RNaseH-酶的優(yōu)勢(shì)在于:1.**保護(hù)RNA模板**:由于不會(huì)降解RNA-DNA雜交鏈中的RNA,RNaseH-酶有助于保護(hù)RNA模板,使其能夠用于合成更長(zhǎng)的cDNA鏈。2.**提高長(zhǎng)鏈cDNA的產(chǎn)量**:RNaseH-酶可以增加長(zhǎng)鏈cDNA的產(chǎn)量,這對(duì)于合成超過(guò)6kb的cDNA特別重要。3.**減少非特異性降解**:RNaseH-酶可以比較大限度地減少反應(yīng)中RNA分子的非特異性降解,提高cDNA合成的特異性和保真度。
江畢赤酵母表達(dá)VLP技術(shù)服務(wù)的發(fā)展也促進(jìn)了跨學(xué)科的合作與交流。生物學(xué)家、化學(xué)家、工程師等不同領(lǐng)域的共同參與其中,推動(dòng)了技術(shù)的不斷創(chuàng)新和完善。同時(shí),相關(guān)企業(yè)和科研機(jī)構(gòu)也加大了對(duì)這項(xiàng)技術(shù)的研發(fā)投入,進(jìn)一步提升了其在市場(chǎng)上的競(jìng)爭(zhēng)力和應(yīng)用價(jià)值。總之,江畢赤酵母表達(dá)VLP技術(shù)服務(wù)以其獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)和廣泛的應(yīng)用前景,成為了生物科技領(lǐng)域的一顆璀璨新星。它為我們探索生命科學(xué)的奧秘、解決人類健康問(wèn)題提供了強(qiáng)有力的工具,也為生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)的發(fā)展注入了新的活力。相信在未來(lái),隨著技術(shù)的不斷進(jìn)步和應(yīng)用的深入拓展,江畢赤酵母表達(dá)VLP技術(shù)服務(wù)將在更多領(lǐng)域發(fā)揮重要作用,為人類創(chuàng)造更加美好的生活。通過(guò)基因工程技術(shù),將目標(biāo)蛋白的基因克隆到表達(dá)載體中,并在選定的表達(dá)系統(tǒng)中進(jìn)行高效表達(dá)。
TthDNAPolymerase(5U/μL)是一種從嗜熱菌_Thermusthermophilus_HB8中發(fā)現(xiàn)的耐熱DNA聚合酶。以下是其主要特點(diǎn)和應(yīng)用:1.**熱穩(wěn)定性**:TthDNAPolymerase在高溫下具有高穩(wěn)定性,其在74°C時(shí)可進(jìn)行DNA復(fù)制,在95°C的半衰期為20分鐘。這種熱穩(wěn)定性使得該酶在高溫下的PCR反應(yīng)中保持活性。2.**催化活性**:該酶在Mg2+存在的條件下具有5′-3′DNA聚合酶活性和5′-3′核酸外切酶活性,無(wú)3′-5′核酸外切酶活性。在Mn2+存在的條件下,該酶在55-70℃條件下表現(xiàn)出較強(qiáng)的逆轉(zhuǎn)錄活性,可用于一步法RT-PCR反應(yīng)。3.**高純度**:TthDNAPolymerase的蛋白純度(SDS-PAGE)≥95%,無(wú)核酸外切酶、DNase、RNase殘留。4.**PCR應(yīng)用**:適用于常規(guī)PCR和RT-PCR。在PCR擴(kuò)增中,TthDNAPolymerase能夠擴(kuò)增DNA片段,且具有5′→3′外切酶活性。在RT-PCR中,由于其內(nèi)在的Mn依賴性逆轉(zhuǎn)錄酶(RT)活性,可以有效地將靶標(biāo)RNA轉(zhuǎn)錄為cDNA。5.**靈敏度**:PCR擴(kuò)增檢測(cè)靈敏度可達(dá)100pg。6.**單位定義**:在70°C條件下,30分鐘內(nèi)催化10nmoldNTP摻入到TCA不溶性物質(zhì)所需的酶量為一個(gè)單位。7.**儲(chǔ)存條件**:干冰運(yùn)輸。-20℃以下儲(chǔ)存,有效期2年。通過(guò)將編碼病毒結(jié)構(gòu)蛋白的基因克隆到畢赤酵母的表達(dá)載體中,利用畢赤酵母的高效表達(dá)系統(tǒng)進(jìn)行生產(chǎn)。北京畢赤酵母表達(dá)VLP技術(shù)服務(wù)研發(fā)
隨著合成生物學(xué)的快速發(fā)展,重組人膠原蛋白已成為全球高級(jí)生物材料。其在材料科學(xué)和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域有創(chuàng)新應(yīng)用??贵w表達(dá)服務(wù)技術(shù)服務(wù)臨床前研究
RNaseInhibitor,HumanPlacenta(人胎盤RNases抑制劑)是一種用于保護(hù)RNA不被核糖核酸酶(RNases)降解的蛋白質(zhì)。以下是它的一些主要特點(diǎn):1.**來(lái)源與表達(dá)**:由大腸桿菌重組表達(dá),表達(dá)基因來(lái)源于人胎盤中編碼該酶的基因。2.**抑制能力**:對(duì)RNaseA、RNaseB、RNaseC和人胎盤核糖核酸酶有極強(qiáng)的抑制能力,其Ki值約為4×10^-14M,遠(yuǎn)低于通??贵w和抗原的親和常數(shù)(10^-6-10^-9M)。3.**快速結(jié)合**:RNaseInhibitor與人胎盤核糖核酸酶的結(jié)合非??焖伲瑤缀踉诩尤氲乃查g就會(huì)形成復(fù)合物從而抑制其酶活性。4.**pH穩(wěn)定性**:在pH5-8范圍內(nèi)保持其RNA酶抑制活性,在pH7-8時(shí)抑制活性比較高。5.**DTT依賴性**:維持其活力需要至少在溶液中含有1mMDTT。6.**His-tag**:產(chǎn)品N端帶有His-tag,可以通過(guò)相應(yīng)的His抗體檢測(cè)或通過(guò)磁珠、鎳柱吸附去除。7.**用途**:用于cDNA合成,體外轉(zhuǎn)錄,體外翻譯,以及mRNA-protein復(fù)合物分離純化等過(guò)程中保護(hù)RNA不被降解;還可用于特定RNase活性的鑒定等。8.**儲(chǔ)存溶液**:含有20mMHEPES-KOH(pH7.5),50mMKCl,5mMDTT,50%(v/v)glycerol。抗體表達(dá)服務(wù)技術(shù)服務(wù)臨床前研究