間充質(zhì)間質(zhì)細胞(MSCs)體外擴增的培養(yǎng)基一般添加胎牛血清FBS,但是考慮到異種ganran及免疫反應(yīng)的風險,監(jiān)管機構(gòu)并不鼓勵使用。人血小板裂解液除了不存在異種免疫反應(yīng)或牛病原體ganran的風險,有助于增強間充質(zhì)干細胞的擴增,也相對容易地根據(jù)良好的生產(chǎn)規(guī)范程序生產(chǎn),并已用于臨床應(yīng)用,因此現(xiàn)如很多資料顯示血小板裂解液已被證明是擴增MSCs一種非常有效的FBS替代方法(參考文獻1)。血小板裂解液由血漿組成,含有纖維蛋白原和凝血因子,對于一般細胞培養(yǎng)中涉及的含鈣培養(yǎng)基來說通常需要加入抗凝劑(常用肝素、Rivaroxaban利伐沙班、argatroban阿加曲班等)來防止凝膠形成,其中肝素很為常用。血小板裂解液里面的沉淀對細胞有沒有影響?NK細胞培養(yǎng)血小板裂解液代理商
在已有的上百篇文獻中,報道了Sexton公司的Stemulate和nliven已經(jīng)被確定為間充質(zhì)干細胞MSC的良好生長補充劑,并且支持各種組織來源包括脂肪、骨髓、軟骨、牙髓和臍帶中的MSCs的擴增培養(yǎng)。Sexton公司標準型和PR處理的血小板裂解液始終優(yōu)于輻照胎牛血清,幫助用戶優(yōu)化MSCs的生產(chǎn)。用戶通過使用Sexton公司的血小板裂解液培養(yǎng)基生長劑,降低時間和花費的成本,可帶來更快的倍增時間。既可以減少潔凈室生產(chǎn)時間,也可以減少試劑的使用量,實現(xiàn)總成本的降低。灝洋血小板裂解液廠家血小板裂解液中的沉淀在使用前是需要過濾掉么?
血小板裂解液主要成分為人血小板裂解液,含有較高濃度的生長因子等細胞培養(yǎng)必須物質(zhì),在體外細胞培養(yǎng)中可代替胎牛血清和自體血清。人源血小板裂解液就是直接將人類來源血小板細胞經(jīng)過連續(xù)的反復凍融裂解后,進一步提純這些血小板脫顆粒的商品。血小板裂解液(platelet lysate,PL)是自體或異體血小板富集物經(jīng)細胞裂解后的產(chǎn)物,已經(jīng)被諸多研究推薦作為胎牛血清(fetal bovine serum,F(xiàn)BS)的替代品,應(yīng)用于間充質(zhì)干細胞(mesenchymal stem cells,MSC)的大規(guī)模擴增培養(yǎng)。
本研究中使用的HPL是Stemulate公司兩款人源血小板裂解液(NH和H)是在工業(yè)規(guī)模(很小批量為20L)生產(chǎn)的,具備高度的批間一致性。將脂肪來源的間充質(zhì)干細胞在DME/F-12中添加10%Stemulate-NH或10%FBS進行傳代培養(yǎng)11代。在DME/F-12中分別添加5、7.5或10%Stemulate-NH,并與10%胎牛血清進行比較。羊膜來源間充質(zhì)干細胞也在2.5或5%Stemulate中培養(yǎng),與10%胎牛血清相比。牙髓來源的骨髓間充質(zhì)干細胞在DME/F-12中添加不同濃度的Stemulate-NH或Stemulate-H,并與添加10%FBS的培養(yǎng)基進行比較。在所有實驗中,每天都監(jiān)測細胞,每次傳代結(jié)束時,收獲細胞,并使用臺盼藍和一個自動細胞計數(shù)器計數(shù)然后繼續(xù)傳代。人源血小板裂解液適合應(yīng)用在多種來源的間充質(zhì)原代干細胞培養(yǎng)過程。
ELAREMPrime人血小板裂解液是面向未來需求的先進的細胞培養(yǎng)解決方案。基于人血小板的經(jīng)濟實惠的細胞生長促進劑可實現(xiàn)從動物血清添加劑到無異種細胞培養(yǎng)條件的簡單轉(zhuǎn)換。每批ELAREMPrime均由大量血小板單位生產(chǎn),以比較大限度地減少批次間的差異。ELAREMPrime支持細胞擴增,無需批間測試即可提供一致的試驗結(jié)果。ELAREMPrime只供體外實驗和研究使用(RUO),該產(chǎn)品不適合直接用于人類或動物用途。有關(guān)安全預防措施,請參閱相應(yīng)的SDS。推薦用于與FBS相比,ELAREMPrime人血小板裂解液支持間充質(zhì)干細胞(MSC)的細胞生長性能,而不會丟失表型。非靈長類細胞系的體外繁殖和維持需要根據(jù)具體情況進行測試和優(yōu)化。國產(chǎn)的血小板裂解液好用么。福建三一造血血小板裂解液使用比例
血小板裂解液進口很難嗎?NK細胞培養(yǎng)血小板裂解液代理商
MSCs在添加10%血小板裂解液和不同濃度肝素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)7天,隨后使用MTT法評估增殖。脂肪組織源性間充質(zhì)干細胞(AT-MSC)和骨髓源性間充質(zhì)干細胞(BM-MSC)培養(yǎng)的過程中,如果使用的UFH濃度低于0.61IU/mL或者使用Enoxaparin(LMWH)濃度低于0.024mg/mL(2.4IU/mL)時培養(yǎng)液均呈現(xiàn)凝膠狀態(tài)(灰色背景),而肝素濃度過高則對細胞增殖的負面影響明顯且以劑量依賴的方式提高。備注肝素濃度單位換算:肝素濃度國際單位(IU)衡量,1IU國際單位是指在規(guī)定的條件下,將1ml全血延長凝血3分鐘所需的量:1mg大約相當于100IU的肝素。NK細胞培養(yǎng)血小板裂解液代理商
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