松松云倉(cāng):對(duì)接WMS與ERP系統(tǒng),助力電商物流新篇章
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對(duì)于某些類型的細(xì)胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS細(xì)胞,在轉(zhuǎn)染前兩天鋪板可顯著提高轉(zhuǎn)入基因的表達(dá)水平。如果選擇轉(zhuǎn)染前兩天鋪板,可適當(dāng)降低鋪板密度,以確保轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞的匯合度仍為70~80%。2.對(duì)于接觸抑制敏感的細(xì)胞,可適當(dāng)降低鋪板密度。3.即使在有蛋白(如10%的血清)存在的情況下,DNA-PEI復(fù)合物仍能轉(zhuǎn)染細(xì)胞,但是DNA-PEI復(fù)合物必須在無(wú)蛋白存在的條件下形成。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達(dá)到*轉(zhuǎn)染效率。其他的無(wú)蛋白培養(yǎng)基則需測(cè)試與線性PEI轉(zhuǎn)染試劑的兼容性。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑,歡迎咨詢上海曼博生物!?如想申請(qǐng)PEI試用裝,請(qǐng)關(guān)注我們的公眾號(hào):Mine-bio,回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請(qǐng)”,即可參加!?用PEI轉(zhuǎn)染時(shí),一般和DNA的比例是?AAV包裝PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝高回報(bào)的選擇
接種細(xì)胞:轉(zhuǎn)染前,用膠原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化細(xì)胞并計(jì)數(shù)(不建議用胰酶)。調(diào)整細(xì)胞濃度,將細(xì)胞鋪入細(xì)胞培養(yǎng)的器皿,每個(gè)孔置入的細(xì)胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞匯合度達(dá)到70~80%。2.準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物:DNA、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無(wú)蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑(這個(gè)需要客戶自行摸索配比,每一批轉(zhuǎn)染試劑和每一批DNA比例可能會(huì)稍有不同)。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中(注意:請(qǐng)勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物。當(dāng)溶液體積較大時(shí),請(qǐng)用圓底聚丙烯管,例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉(zhuǎn)染細(xì)胞:直接向每個(gè)孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無(wú)血清條件下轉(zhuǎn)染時(shí),去除生長(zhǎng)培養(yǎng)基,替換成無(wú)血清培養(yǎng)基,然后滴DNA-PEI復(fù)合物。轉(zhuǎn)染1.5h后,添加?體積的包含30%血清的生長(zhǎng)培養(yǎng)基。更多PEI相關(guān)產(chǎn)品信息,歡迎咨詢上海曼博生物!如想申請(qǐng)PEI試用裝,請(qǐng)關(guān)注我們的公眾號(hào):Mine-bio,回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請(qǐng)”,即可參加!AAV包裝PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝高回報(bào)的選擇MAXgene GMP是一種cGMP級(jí)PEI轉(zhuǎn)染試劑。
美國(guó)Polysciences成立于1961年,是一家歷史久遠(yuǎn)的化學(xué)品制造公司,產(chǎn)品guang fan應(yīng)用于各個(gè)科研領(lǐng)域。Polysciences在聚乙烯亞胺轉(zhuǎn)染試劑(PEI轉(zhuǎn)染試劑)的制造工藝上具有長(zhǎng)達(dá)20多年的經(jīng)驗(yàn),其經(jīng)典的PEI轉(zhuǎn)染試劑產(chǎn)品系列包括研究級(jí)產(chǎn)品PEI 25K,PEI MAX和Transporter 5,以及cGMP級(jí)MAXgene GMP,被guang fan用于抗體藥物和重組蛋白,臨床等級(jí)慢病毒和AAV病毒的大規(guī)模生產(chǎn),為全球客戶提供成本效益高、供應(yīng)穩(wěn)定和質(zhì)量可靠的選擇。在過(guò)去10年間,Polysciences的PEI轉(zhuǎn)染試劑已被用于國(guó)內(nèi)外多項(xiàng)臨床申報(bào)。如想申請(qǐng)PEI試用裝,請(qǐng)關(guān)注我們的公眾號(hào):Mine-bio,回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請(qǐng)”,即可參加!
PolysciencesPEI轉(zhuǎn)染試劑優(yōu)勢(shì):高質(zhì)量的R&D和cGMP等級(jí)產(chǎn)品l高轉(zhuǎn)染效率,低細(xì)胞毒性;MAXgene符合cGMP標(biāo)準(zhǔn)和ISO13485質(zhì)量管理體系;經(jīng)過(guò)驗(yàn)證的生產(chǎn)工藝;全合成,無(wú)動(dòng)物源成分;高性價(jià)比,適用于從早期研發(fā)到臨床及商業(yè)化生產(chǎn)的各個(gè)階段l嚴(yán)格控制批間穩(wěn)定性;國(guó)內(nèi)外已有多個(gè)項(xiàng)目進(jìn)入臨床階段l具備殘留檢測(cè)方法。PEI MAX 是一款高度濃縮的粉劑,大量科學(xué)家選擇PEI MAX ,在內(nèi)部自行制備低成本高效益的PEI轉(zhuǎn)染試劑。多年以來(lái),經(jīng)過(guò)眾多業(yè)內(nèi)人士評(píng)審的公開研究和出版文獻(xiàn)表明,在HEK293、CHO 和 Sf9系統(tǒng)中可獲得很高的轉(zhuǎn)染效率,在重組抗體和病毒載體生產(chǎn)中穩(wěn)定性高,可靠性強(qiáng)。PEI MAX是一種非GMP等級(jí)PEI轉(zhuǎn)染試劑,適用于基礎(chǔ)科學(xué)研究及藥物研發(fā)早期階段。如想申請(qǐng)PEI試用裝,請(qǐng)關(guān)注我們的公眾號(hào):Mine-bio,回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請(qǐng)”,即可參加!PEI轉(zhuǎn)染試劑是一種穩(wěn)定的具有較高的陽(yáng)離子電荷密度的有機(jī)大分子。
穩(wěn)定轉(zhuǎn)染方法:1.接種細(xì)胞:轉(zhuǎn)染前一晚,用膠原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化細(xì)胞并計(jì)數(shù)(不建議用胰酶)。調(diào)整細(xì)胞濃度,將細(xì)胞鋪入細(xì)胞培養(yǎng)的器皿,每個(gè)孔置入的細(xì)胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞匯合度達(dá)到70~80%。2.準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物:DNA、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無(wú)蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑(這個(gè)需要客戶自行摸索配比,每一批轉(zhuǎn)染試劑和每一批DNA比例可能會(huì)稍有不同)。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中(注意:請(qǐng)勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物。當(dāng)溶液體積較大時(shí),請(qǐng)用圓底聚丙烯管,例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉(zhuǎn)染細(xì)胞:直接向每個(gè)孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無(wú)血清條件下轉(zhuǎn)染時(shí),去除生長(zhǎng)培養(yǎng)基,替換成無(wú)血清培養(yǎng)基,然后滴DNA-PEI復(fù)合物。轉(zhuǎn)染1.5h后,添加?體積的包含30%血清的生長(zhǎng)培養(yǎng)基。如想申請(qǐng)PEI試用裝,請(qǐng)關(guān)注我們的公眾號(hào):Mine-bio,回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請(qǐng)”,即可參加!Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑和Pulyplus PEI轉(zhuǎn)染試劑哪個(gè)好?山東PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝可在哪里申請(qǐng)
PEI轉(zhuǎn)染試劑如何做殘留檢測(cè)?AAV包裝PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝高回報(bào)的選擇
PEIMAX——高產(chǎn)工業(yè)化轉(zhuǎn)染試劑-高度濃縮,可制備大量轉(zhuǎn)染試劑Polysciences轉(zhuǎn)染試劑系列是基于聚乙烯亞胺(Polyethylenimine,PEI)的產(chǎn)品,因其較高的轉(zhuǎn)染效果,已廣泛應(yīng)用于工業(yè)化生產(chǎn)。聚乙烯亞胺是一種具有較高的陽(yáng)離子電荷密度的有機(jī)大分子,每相隔二個(gè)碳原子,即每“第三個(gè)原子都是質(zhì)子化的氨基氮原子,使得聚合物網(wǎng)絡(luò)在任何pH下都能充當(dāng)有效的“質(zhì)子海綿”(protonsponge)體。PEI可用作轉(zhuǎn)染試劑,它可以縮聚DNA分子形成顆粒并轉(zhuǎn)染真核細(xì)胞。PEIMAX40K是由Polysciences出品的全合成線性聚乙烯亞胺瞬時(shí)轉(zhuǎn)染試劑。PEIMAX是一款高度濃縮的粉劑,大量科學(xué)家選擇PEIMAX,在內(nèi)部自行制備低成本高效益的PEI轉(zhuǎn)染試劑。多年以來(lái),經(jīng)過(guò)眾多業(yè)內(nèi)人士評(píng)審的公開研究和出版文獻(xiàn)表明,在HEK293、CHO和Sf9系統(tǒng)中可獲得很高的轉(zhuǎn)染效率,在重組抗體和病毒載體生產(chǎn)中穩(wěn)定性高,可靠性強(qiáng)。PEIMAX提供從96孔板到200L生物反應(yīng)器持續(xù)的高基因表達(dá)細(xì)胞體系,實(shí)現(xiàn)從新藥研發(fā)到工業(yè)化生產(chǎn)的輕松過(guò)度。而且與大多數(shù)細(xì)胞轉(zhuǎn)染方案相比,使用PEIMAX至少可降低40%轉(zhuǎn)染成本(部分案例可降低90%轉(zhuǎn)染成本)。如想申請(qǐng)PEI試用裝,請(qǐng)關(guān)注我們的公眾號(hào):Mine-bio,回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請(qǐng)”,即可參加!AAV包裝PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝高回報(bào)的選擇