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達(dá)優(yōu)血小板裂解液中國(guó)代理權(quán)

來源: 發(fā)布時(shí)間:2021-10-16

MSCs是異質(zhì)性的細(xì)胞群,其組成可能受培養(yǎng)條件的影響。血小板裂解液中肝素及其濃度高低對(duì)細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)模式并未有明顯的影響。通過免疫熒光顯微鏡分析未發(fā)現(xiàn)波形蛋白(一種通常在中胚層起源的細(xì)胞中表達(dá)的中間絲)和α-SMA表達(dá)的差異,肝素濃度對(duì)于α-SMA(綠色)和波形蛋白(紅色)的分布并無影響。脂肪組織源性間充質(zhì)干細(xì)胞(AT-MSC)和骨髓源性間充質(zhì)干細(xì)胞(BM-MSC)本身免疫表型就是相似的,經(jīng)添加不同濃度肝素的血小板裂解液培養(yǎng)擴(kuò)增的AT-MSC和BM-MSC的流式細(xì)胞分析結(jié)果顯示出CD29、CD73、CD90和CD105表達(dá),而表面標(biāo)記CD14、CD31、CD34和CD45的缺失,可見肝素濃度對(duì)MSC免疫表型的表達(dá)水平幾乎是沒有影響的。血小板裂解液不含異源動(dòng)物成分,是人類間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)的理想血清替代物。達(dá)優(yōu)血小板裂解液中國(guó)代理權(quán)

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由于在臨床中對(duì)血小板單元的需求而供體有限,因此使用新鮮的血小板單元來產(chǎn)生血小板裂解液引起了關(guān)注。過期的血小板單位可能是另一種來源,因?yàn)橛凶C據(jù)表明可以使用從過期單位獲得的血小板而不會(huì)影響終產(chǎn)品的質(zhì)量。在一個(gè)擁有380萬(wàn)居民的意大利地區(qū),2014年生產(chǎn)了大約100,000個(gè)來自單一捐贈(zèng)者的血沉棕黃層單位。其中約60%在有效期后被丟棄??紤]到50ml的平均血沉棕黃層體積,使用過期的血沉棕黃層單位可以生產(chǎn)約3000L的血小板裂解液。血小板裂解液品牌比較血小板裂解液是由富含血小板的血漿純化萃取而成,其中包含很多不同的細(xì)胞生長(zhǎng)因子。

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通過BODIPY染色的脂肪滴來反映的成脂分化情況,發(fā)現(xiàn)兩種肝素UFH和LMWH在高濃度時(shí),分化成脂細(xì)胞的百分比明顯降低。同樣的,通過茜素紅染色的磷酸鈣沉淀分析成骨分化情況,高濃度肝素也降低了成骨分化的百分比,特別是在脂肪組織來源的MSCs中,UFH肝素高濃度對(duì)成脂和成骨分化誘導(dǎo)的負(fù)面影響較為明顯。基于上述結(jié)果,我們現(xiàn)在知道血小板裂解液中添加的抗凝劑肝素在體外MSCs擴(kuò)增的必要性,在購(gòu)買血小板裂解液后,用戶應(yīng)結(jié)合自己的實(shí)驗(yàn)條件去合理的選擇合適的肝素濃度,而肝素濃度的選擇應(yīng)該在有效防止含血小板裂解液培養(yǎng)基凝膠形成的基礎(chǔ)上盡量降低,以減少肝素對(duì)于MSCs的增殖能力、成纖維細(xì)胞體外集落形成單位(CFU-F)、MSCs體外分化等的影響。

血小板裂解液作為胎牛血清的替代品,間充質(zhì)干細(xì)胞/基質(zhì)細(xì)胞(MSCs)被定義為自我更新的多能祖細(xì)胞,能夠分化成中胚層來源的其他細(xì)胞類型,如脂肪細(xì)胞,骨細(xì)胞和軟骨細(xì)胞。人源血小板裂解液是無動(dòng)物源血清培養(yǎng)補(bǔ)充劑,能在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)提供細(xì)胞生長(zhǎng)所需動(dòng)力,目前已被大規(guī)模的使用在干細(xì)胞及原代細(xì)胞培養(yǎng)過程中。人源血小板裂解物除了擁有比富血小板血漿更高的生長(zhǎng)因子濃度,更用特殊工藝去除了細(xì)胞碎片,大幅降低了使用過程中的免疫原性。GMP級(jí)血小板裂解物產(chǎn)品在嚴(yán)格的GMP條件下生產(chǎn)和分裝。

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為了排除肝素對(duì)于細(xì)胞增長(zhǎng)的抑制作用可能與防腐劑(這里采用芐醇作為防腐劑添加到UFH或LMWH中)有關(guān)。我們對(duì)不添加防腐劑的肝素進(jìn)行了相同實(shí)驗(yàn),結(jié)果對(duì)AT-MSC和BM-MSC細(xì)胞增殖抑制趨勢(shì)相同。在隨后的傳代培養(yǎng)到3代中的累積的群體中,兩種肝素UFH和LMWH對(duì)MSC增殖的影響也變得明顯,血小板裂解液中肝素濃度較低時(shí)累積細(xì)胞群體倍增指數(shù)(cPD) 較高。CFU-F的塑料粘附生長(zhǎng)性能是MSCs培養(yǎng)的先決條件,在96孔板中通過有限稀釋的方法結(jié)合泊松統(tǒng)計(jì)進(jìn)行CFU-F試驗(yàn),顯示集落形成率CFU-F在高濃度UFH時(shí)中度降低,而在高濃度Enoxaparin(LMWH)時(shí)明顯降低。這些結(jié)果表明高濃度的LMWH減少了CFU-F的形成,這與已報(bào)道的其他研究結(jié)論一致。血小板裂解液的血源從哪里來?gamma射線輻照血小板裂解液使用說明

血小板裂解液用于無血清分離和傳代培養(yǎng)臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的方法。達(dá)優(yōu)血小板裂解液中國(guó)代理權(quán)

Sexton公司為用戶提供了研究級(jí)和臨床級(jí)人血小板裂解液,并且具有行業(yè)先進(jìn)的批次到批次一致性,用戶可以放心的從早期研究和開發(fā)到齊全的臨床生產(chǎn)去使用Sexton的人血小板裂解液。根據(jù)額外的標(biāo)準(zhǔn)和更嚴(yán)格的要求發(fā)布使用的臨床級(jí)材料,經(jīng)過與研究級(jí)hPL相同的制造工藝獲得臨床級(jí)人血小板裂解液。這使得用戶可以輕松地從研究過渡到臨床材料,而無需在驗(yàn)證上花費(fèi)額外的成本和時(shí)間。總之,在開發(fā)的早期階段通過優(yōu)化合適的試劑可無縫過渡到后期臨床生產(chǎn)。首先,考慮輔助材料的關(guān)鍵屬性及其對(duì)制造工藝的后續(xù)影響,無論是從生物和功效的角度,還是從總生產(chǎn)成本和商業(yè)的角度,都需要為用戶的工藝選擇正確的原材料。Sexton公司通過Stemulate和Nliven產(chǎn)品為臨床開發(fā)和制造提供安全、有效、可再生的MSCs培養(yǎng)補(bǔ)充,并具有潛在的經(jīng)濟(jì)激勵(lì)。達(dá)優(yōu)血小板裂解液中國(guó)代理權(quán)

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