南京正揚生科科技有限公司自主研發(fā)的CHO宿主細胞殘留DNA檢測試劑盒的優(yōu)點有哪些？①重復性好，同一樣品重復檢測20次，CV＜15%；②提取回收率好，尤其對于低濃度樣品；③操作簡便，無需自行配制試劑；④檢測時間短，從樣品提取純化到出結果只需2.5h；⑤適應性強，針對不同機型，不同實驗室條件，檢測結果穩(wěn)定；⑥可提供自動化服務，自動化完成樣品核酸提取純化；⑦貨期短，供應快；⑧完善的售后服務；

生物制品殘留的宿主細胞DNA會帶來免疫原性、至瘤性和傳染性的風險，探針雜交法和熒光探針法已不能滿足產品質量控制的要求，正逐步被發(fā)達國家藥典淘汰。南京正揚生物科技有限公司自主研發(fā)生產的CHO宿主細胞殘留DNA檢測試劑盒采用Taqman探針熒光定量PCR原理，可以定量檢測生物制品樣品中殘留的CHO宿主細胞DNA。本檢測試劑盒可與南京正揚生物科技有限公司自主研發(fā)生產的宿主細胞殘留DNA提取試劑盒搭配使用，對樣本中殘留的CHO細胞微量DNA進行準確定量分析。 Vero宿主細胞殘留DNA檢測試劑盒。廣州HEK293細胞殘留DNA檢測方法學

南京正揚生物科技有限公司自主研發(fā)生產的CHO宿主細胞殘留DNA檢測試劑盒利用Taqman熒光探針原理，定量檢測各種生物制品及藥品的中間品、半成品和成品中殘留的CHO宿主細胞DNA，檢測試劑盒具備檢測快速、操作簡單、特異性強、檢測靈敏度高、能防止PCR產物污染等特點。蕞低檢測限可以達到fg級別。試劑盒配套有CHODNA定量參考品，已溯源至國家標準品。產品檢測方法可溯源至中國藥典方法，通則〈3407〉。

南京正揚生物科技有限公司自主研發(fā)生產的E.coli宿主細胞殘留DNA檢測試劑盒利用Taqman熒光探針原理，定量檢測各種生物制品及藥品的中間品、半成品和成品中殘留的E.coli宿主DNA，產品具備檢測快速、操作簡單、特異性強、檢測靈敏度高、穩(wěn)定性好、能防止PCR產物污染等特點。蕞低檢測限可以達到fg級別。試劑盒配套有E.coliDNA定量參考品。產品檢測方法可溯源至中國藥典方法，通則〈3407〉。 寧波E1A殘留DNA檢測優(yōu)缺點宿主細胞殘留DNA檢測。

    英國藥典（BP）對宿主細胞殘留DNA檢測的規(guī)定《英國藥典》(BP2017)通則規(guī)定的生物制品殘留DNA限度大多為不超過10ng/劑量，但對個別疫苗的殘留DNA限定標準更嚴格，如甲型肝炎滅活疫苗中的殘留DNA不得超過100pg/劑量，乙型肝炎疫苗中的DNA殘留量不得超過10pg/劑量。印度藥典（PLIM）對宿主細胞殘留DNA檢測的規(guī)定《印度藥典》(IP2014)通則規(guī)定的生物制品殘留DNA限度大多為不超過10ng/劑量，但對個別疫苗的殘留DNA限定標準更嚴格，如甲型肝炎滅活疫苗中的殘留DNA不得超過100pg/劑量，乙型肝炎疫苗中的DNA殘留量不得超過10pg/劑量。南京正揚CHO宿主細胞殘留DNA檢測原理：試劑盒利用Taqman熒光探針原理，定量檢測各種生物制品及藥品的中間品、半成品和成品中殘留的CHO宿主細胞DNA。PCR反應過程中通過熒光標記的特異性探針檢測PCR產物量，通過連續(xù)監(jiān)測反應體系中熒光數值的變化，可即時反映特異性擴增產物量的變化。在反應過程中所釋放的熒光強度達到預設的閾值時，體系的PCR循環(huán)數(Ct值)與該體系所含的起始DNA模板量的對數值呈線性關系。采用已知濃度的DNA標準品，依據以上關系，構建標準曲線，對特定模板進行定量分析，測定供試品中的外源DNA殘留量。

用qPCR法進行宿主細胞殘留DNA檢測時，出現擴增效率超出標準要求（低于83.3%或高于110%）的原因有哪些？①設計的引物探針不適用：重新分析靶標序列進行設計。②標曲濃度設定太高，超出標曲線性范圍：對范圍進行驗證，選取合適標曲范圍。③人員操作問題，如稀釋錯誤、制備過程震蕩時間過長等：人員上崗前應接受多面培訓并做到熟練操作，考核合格后方可上崗。④移液器未校準或品質問題導致量取不準：定期對移液器進行校準并選擇好品質移液器。美國FDA對HEK293宿主細胞殘留DNA檢測的要求。

E.coli宿主細胞殘留DNA檢測在mRNA藥物生產中的應用。mRNA藥物的制備流程包括模板DNA制備、mRNA原液制備和成品制備，其中DNA原液的制備過程中，需借助大腸桿菌作為宿主細胞擴增質粒DNA，線性化的質粒DNA作為體外轉錄（IVT）的模板，因此，模板DNA中可能有宿主細胞DNA的殘留、mRNA原液可能存在質粒DNA模板的殘留，可能引發(fā)藥物安全性問題。為監(jiān)測生物制品的生產工藝，確保其質量穩(wěn)定性和安全性，國內外監(jiān)管機構建立了生物制品殘留DNA的檢測標準和檢測方法。宿主細胞殘留DNA檢測定量分析。合肥畢赤酵母殘留DNA檢測廠家

Vero宿主細胞殘留DNA檢測的質量控制。廣州HEK293細胞殘留DNA檢測方法學

南京正揚生物科技有限公司自主研發(fā)生產了一款E.coli宿主細胞殘留DNA檢測試劑盒，采用qPCR-熒光探針法，在qPCR技術的基礎上利用熒光探針原理，定量檢測樣本中E.coli殘留DNA，簡化qPCR反應操作的反應液配置時的操作步驟，檢測快速，專一性強，性能可靠，蕞低檢測限可以達到fg水平。實驗操作步驟包括標準品稀釋、樣品前處理、樣品DNA提取純化、PCR試劑配制及加樣、PCR擴增檢測、實驗數據分析。

宿主細胞殘留DNA檢測過程中，標準品稀釋環(huán)節(jié)有哪些注意事項？①用來做稀釋的耗材建議使用1.5mL離心管，容量太大的耗材會增加DNA的吸附作用，容量太小易導致混勻不充分。②為了做出更好的線性，進行倍數稀釋的時候要吸取較大體積標準品溶液（避免用1μL標準品+9μL稀釋液這樣的小體積體系進行稀釋）。③每進行一步稀釋都要進行充分的混勻，在點樣前也要進行混勻。④為了提高準確性，每個濃度建議做3個復孔。 廣州HEK293細胞殘留DNA檢測方法學