引起組織壞死,從而導致卵巢功能早衰。技術實現(xiàn)要素:針對上述現(xiàn)有技術,本發(fā)明提供了一種利用順鉑建立大鼠卵巢早衰模型的方法。本發(fā)明根據(jù)“順鉑可誘導卵巢細胞凋亡,引起組織壞死,從而導致卵巢功能早衰”這一原理,使用不同濃度及不同方法建立了化療性損傷卵巢早衰動物模型,并對比各種方法間的優(yōu)劣性,篩選出順鉑比較好的濃度及給藥時間,為篩選順鉑導致的卵巢早衰動物模型比較好劑量提供了一種操作簡單,成功率高,結果可靠的實驗方法。本發(fā)明是通過以下技術方案實現(xiàn)的:一種利用順鉑建立大鼠卵巢早衰模型的方法:將劑量為按體重一日2~3mg/kg的順鉑施用于大鼠,施用方式為腹腔注射,施用方法:連續(xù)施用7天,末次注射后第15天,得大鼠卵巢早衰模型?;颍簩┝繛榘大w重4~6mg/kg的順鉑施用于大鼠,施用方式為腹腔注射,施用方法:第1天、第8天施用;末次注射后第15天,得大鼠卵巢早衰模型。進一步地,可將順鉑溶于%氯化鈉溶液配置成順鉑注射液,然后注射。所述順鉑,可市場常規(guī)購買得到,比如齊魯制藥公司生產(chǎn)的順鉑。進一步地,注射期間每天稱量大鼠體重,注射后每周稱量2次;末次注射后15天,麻醉取血檢測***水平,取卵巢檢測對比卵巢重量。早期階段科學假說與疾病潛在藥物治療效果評價始于小鼠疾病模型構建及其實驗室研究。蘇州小鼠疾病動物模型建模
可以對本發(fā)明進行各種變化和修飾。本發(fā)明對試驗中所使用到的材料以及試驗方法進行一般性和/或具體的描述。雖然為實現(xiàn)本發(fā)明目的所使用的許多材料和操作方法是本領域公知的,但是本發(fā)明仍然在此作盡可能詳細描述。下述實施例中所涉及的儀器、試劑、材料等,若無特別說明,均為現(xiàn)有技術中已有的常規(guī)儀器、試劑、材料等,可通過正規(guī)商業(yè)途徑獲得。下述實施例中所涉及的實驗方法,檢測方法等,若無特別說明,均為現(xiàn)有技術中已有的常規(guī)實驗方法,檢測方法等。實施例1:建立大鼠卵巢早衰模型步驟如下:將%氯化鈉溶液50ml加入規(guī)格為10mg的醫(yī)用順鉑(齊魯制藥,批號:aa1a8029a)中,配制成2mg/kg順鉑注射液,按照10ml/kg連續(xù)腹腔注射7天。實施例2:建立大鼠卵巢早衰模型步驟如下:將%氯化鈉溶液(齊魯制藥,批號:aa1a8029a)中,配制成3mg/kg順鉑注射液,按照10ml/kg連續(xù)腹腔注射7天。實施例3建立大鼠卵巢早衰模型步驟如下:將%氯化鈉溶液25ml加入規(guī)格為10mg的醫(yī)用順鉑(齊魯制藥,批號:aa1a8029a)中,配制成4mg/kg順鉑注射液,按照10ml/kg分別在***天及第八天腹腔注射。實施例4:建立大鼠卵巢早衰模型步驟如下:將%氯化鈉溶液(齊魯制藥,批號:aa1a8029a)中。哪一家疾病動物模型建模廠家開展小鼠疾病模型初步研究分析小鼠疾病模型研究初步結果與生物學信息資料等相關知識間的差距!
1、動物模型名稱:淚腺摘除聯(lián)合新潔爾滅致干眼兔模型2、實驗動物種屬:新西蘭兔3、實驗動物性別:雌雄不限4、實驗動物年齡:2~3月齡5、實驗動物體重:1.8~2.5kg6、實驗動物環(huán)境:SPF級,1、實驗方法:摘除淚腺聯(lián)合新潔爾滅誘導。兔耳緣靜脈注射戊巴比妥鈉聯(lián)合肌肉注射進速眠新Ⅱ進行麻醉。麻醉后,進行淚腺摘除手術,眼瞼局部以75%酒精消毒,鋪洞巾,于眼下眶周部做一切口,小心分離皮膚、肌肉、筋膜,尋找到淚腺后完整摘除之,然后縫合創(chuàng)口。術畢,滴妥布霉素**眼液2滴、涂四環(huán)素可的松眼藥膏,共7d。術后兔創(chuàng)口愈合后進行給藥造模。眼滴0.1%新潔爾滅溶液,2次/天,2滴/次,連續(xù)用藥14d。2、檢測標準:SchirmerI試驗淚液分泌減少,1%虎紅角膜染色試驗虎紅著色評分值高,角膜出現(xiàn)病理改變。
圖2是從側面展示的壓迫元件插入椎間孔的結構示意圖。圖3是術后大鼠四肢表現(xiàn)情況。圖4是術后28天大鼠的雙下肢縮足閾值變化曲線圖。圖5是重復經(jīng)顱磁刺激對大鼠背根神經(jīng)壓迫模型的影響。具體實施方式以下通過具體的實施例對本發(fā)明的技術方案做進一步的描述。以下的實施例是對本發(fā)明的進一步說明,而不是限制本發(fā)明的范圍。實施例1、模型的制備1、腹腔注射1%戊巴比妥鈉(40mg/kg)麻醉大鼠(220-250g),背部剃毛,碘伏消毒背部皮膚,俯臥位固定于動物手術臺上,鋪無菌巾。2、于大鼠腰4到骶1水平左側作一2-3cm縱行切口,切開皮膚,鈍性分離椎旁肌至橫突上方,暴露腰4椎間孔,腰5椎間孔(椎旁肌可用自制拉鉤保持分離狀態(tài))。3、將2根***端11為4mm,第二端12為2mm,直徑為,第二端12置于腰4椎間孔及腰5椎間孔外。如圖1和2所示,可以看到腰4錐體1、腰5錐體2、腰6錐體3、l型棒10、腰4神經(jīng)根4和腰5神經(jīng)根5的位置關系。當l型棒10的***端11插入腰4錐體1的腰4椎間孔后,會對腰4神經(jīng)根4起到壓迫作用;同樣的,當l型棒10的***端11插入腰5錐體2的腰5椎間孔后,會對腰5神經(jīng)根5起到壓迫作用。從而達到模擬腰椎間盤突出壓迫神經(jīng)根的目的,制備得到大鼠慢性背根神經(jīng)壓迫模型。動物模型作為人類疾病的縮影。
1、自發(fā)性**動物模型:未經(jīng)人為處理;自然發(fā)生;自發(fā)性**的總體評價--動物自發(fā)性**的病因往往是由動物的遺傳特性決定的與人癢的病因有較大距離。各動物**生長速度差異較大很難在限定時間內(nèi)獲得大量生長均勻的荷瘤動物(tumor-bearinganimals)。因此,自發(fā)性**動物模型很少在抗**藥物的常規(guī)篩選中廣泛應用。2、誘發(fā)性**動物模型:在實驗條件下:使用致*物(carcinogens);誘發(fā)動物發(fā)生**animalmodelofinducedtumor)指使用致*因素(carcinogens)在實驗條件下誘發(fā)動物發(fā)生**的動物模型,它是進行實驗**學研究的常用方法。常用于驗證可疑致*因素的作用也越來越多地應用干**發(fā)生機理的研究及防治效果的觀察上,在**病因學、遺傳學、生物學等方面的研究中有重要地位。由于誘發(fā)因素和條件可人為控制,誘發(fā)率遠高于自然發(fā)病率故在**實驗研究中優(yōu)于自發(fā)瘤。用于誘發(fā)實驗性**的動物種類很多,它們因種族不同而對相同致*因素有不同的反應性。常用的動物以哺乳動物為主,其中嚙齒類動物的使用**多,應用**廣,包括各種大鼠、小鼠、際鼠等。。小鼠疾病模型研究也是人相關疾病藥物研發(fā)的起點。普陀區(qū)疾病動物模型建模評價
如何定義好的小鼠疾病模型?蘇州小鼠疾病動物模型建模
pcrmix:反應條件:pcr擴增產(chǎn)物的電泳鑒定結果如圖3所示,從圖3中可以看出,6、8、9號為pirb基因敲入小鼠在、,wt小鼠pcr產(chǎn)物沒有這兩個擴增產(chǎn)物。(c)短鏈pcr反應,引物如下:primers(℃):forwardprimer(f4):5’-aacaatcaggctgccgaatctg-3’reverseprimer(r4):5’-ctttattagccagaagtcagatgc-3’expectedpcrproduct:targetedallele:344bppirb基因敲入型小鼠能夠擴增出344bp的產(chǎn)物,而野生型沒有。pcr體系:反應條件:(2)f1代小鼠測序:通過pcr擴增后測序鑒定小鼠基因型,如圖4所示,為6號pirb基因敲入小鼠測序峰圖,pcr所用引物如下:sequencingprimerforpcrproduct1:5’sequenceprimer(f3):5’-cacttgctctcccaaagtcgctc-3’sequencingprimerforpcrproduct2:3’sequenceprimer(r3):5’-atactccgaggcggatcacaa-3’(3)southern雜交檢測f1代小鼠基因型:采用bamhi和avrii核酸內(nèi)切酶切割dna分子,切割示意圖如圖5。具體的southern雜交檢測過程如下:步驟a、提取f1代小鼠尾部dna;步驟b、制備探針,通過pcr方法將dig-dutp滲入到步驟a的dna分子中。蘇州小鼠疾病動物模型建模
上海東寰生物科技有限公司坐落在上海市嘉定區(qū)興賢路1180號5幢2樓206室,是一家專業(yè)的經(jīng)營范圍為:從事生物科技領域內(nèi)的技術開發(fā)、技術轉讓、技術咨詢、技術服務?;ぎa(chǎn)品(除危險化學品、監(jiān)控化學品、煙花爆竹、民用物品、易制毒化學品)的銷售。【依法須經(jīng)批準的項目,經(jīng)相關部門批準后方可開展經(jīng)營活動】。公司。一批專業(yè)的技術團隊,是實現(xiàn)企業(yè)戰(zhàn)略目標的基礎,是企業(yè)持續(xù)發(fā)展的動力。誠實、守信是對企業(yè)的經(jīng)營要求,也是我們做人的基本準則。公司致力于打造***的原代細胞,細胞增殖與凋亡,細胞檢測試劑盒,動物疾病模型。一直以來公司堅持以客戶為中心、原代細胞,細胞增殖與凋亡,細胞檢測試劑盒,動物疾病模型市場為導向,重信譽,保質(zhì)量,想客戶之所想,急用戶之所急,全力以赴滿足客戶的一切需要。