EdU上的乙炔基能與生物素標記的疊氮化物(Biotinlabeledazide)通過一價銅離子的催化發(fā)生共價反應，形成穩(wěn)定的三唑環(huán)，該反應非常迅速，被稱作點擊反應(Clickreaction)，其反應原理參見圖1。通過點擊反應，新合成的DNA會被相應的生物素探針所標記，從而可以使用適當?shù)臋z測設備檢測到增殖的細胞。EdU檢測法中的點擊反應(Clickreaction)原理圖。生物素或熒光探針等標記的疊氮化物(LabeledAzide)與摻入到細胞DNA中的EdU，在銅離子的催化發(fā)生共價反應，形成穩(wěn)定的三唑環(huán)，終使細胞DNA標記上生物素等探針上海EdU細胞增殖檢測試劑盒的價格是多少？北京品質好的EdU細胞增殖檢測試劑盒價格

細胞增殖分析是細胞生長和分化研究的關鍵，在藥物開發(fā)階段常用來評估化學藥物的毒性和對細胞生長的控制作用。經過之后的細胞分裂階段，各個子代細胞會從母細胞中接收到大約一半的熒光染料。采用流式細胞儀對熒光強度進行分析，即可測定出自標記結合起，單個細胞或細胞群所經歷的傳代數(shù)目。通常根據平均DNA含量或細胞代謝參數(shù)進行細胞增殖檢測，此類分析可以報告出總細胞數(shù)目和活細胞數(shù)目，或者測定出單個細胞內的DNA合成情況。細胞增殖染料稀釋分析主要基于細胞膜通透性，熒光團分子、染料進入細胞后，將會共價結合到蛋白質上的氨基基團上，從而使染料能夠長時間停留在細胞中。浙江咨詢EdU細胞增殖檢測試劑盒購買使用EdU細胞增殖檢測試劑盒到底有什么好處？

EdU檢測方法更快速、更靈敏、更準確。EdU檢測染料只有BrdU抗體大小的1/500，在細胞內很容易擴散，無需DNA變性（酸解、熱解、酶解等）即可有效檢測，可有效避免樣品損傷，在細胞和組織水平能更準確地反映細胞增殖等現(xiàn)象。EdU染色(a)通過用10:1去離子水稀釋10x反應緩沖液進行配制1xEdU反應緩沖液；(b)按照溶解200mg緩沖添加劑溶于1ml去離子水的比例稱取適量的粉末進行溶解，即為可用的緩沖添加劑的濃度，建議現(xiàn)用現(xiàn)配；注：緩沖添加劑為白色粉末，較難準確稱量，稱量范圍可稍微放寬，但是不應超過±20%，且該粉末較易氧化，使用后請旋緊管蓋，如試劑出現(xiàn)棕黃色，則需報廢或更換

細胞的固定和通透(a)每孔加入150ul4%多聚甲醛細胞固定液，室溫培養(yǎng)30分鐘，棄固定液；(b)毎孔加入150ul2mg/ml甘氨酸，搖床孵育5分鐘，以中和過量的多聚甲醛；(c)棄甘氨酸溶液，每孔加入300ulPBS洗液，室溫清洗5分鐘；(d)每孔加入300ul0.5%TritonX-100細胞通透液，室溫通透10分鐘，棄細胞通透溶液；(e)每孔加入300ulPBS洗液，室溫清洗5分鐘；該產品是采用成像檢測方法對貼壁細胞進行檢測，適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細胞可在孵育EdU后進行細胞涂片處理，固定后再采用貼壁細胞的染色流程進行檢測。也可以應用于流式細胞儀檢測EdU細胞增殖檢測試劑盒如何發(fā)揮重要作用？上海東寰告訴您。

通過基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應，把熒光集團標記到新合成的含有EdU的DNA上面，這樣就可以進行高效快速的檢測出DNA復制活性，廣泛應用于細胞增殖、細胞分化、生長與發(fā)育、DNA損傷修復等方面的研究。EdU標記(a)將細胞完全培養(yǎng)基中按照500:1的比例加入EdU溶液，制成2xEdU標記培養(yǎng)基；(b)提前將2xEdU標記培養(yǎng)基預熱，然后等體積加入到細胞原有培養(yǎng)基中，獲得lxEdU溶液，其中EdU的終濃度為10uM；注：1)我們不建議替換全部培養(yǎng)基，因為這樣可能會影響細胞增殖的速度；2)配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配，用量以沒過細胞為宜；(c)每孔加入300ul含EdU培養(yǎng)基孵育細胞2小時，棄培養(yǎng)基；注：1)培養(yǎng)時間取決于細胞的增殖速度和生長狀態(tài)；2)大多數(shù)**細胞以及粘附細胞系均可采用2小時的孵育時間(d)以lxPBS清洗細胞兩次，毎次5分鐘，以除去未摻入DNA的EdU殘留。EdU細胞增殖檢測試劑盒的優(yōu)點體現(xiàn)在哪？江蘇提供EdU細胞增殖檢測試劑盒購買

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現(xiàn)在有一種新的檢測方法能避免這種情況的發(fā)生——EdU檢測。EdU（5-乙炔基-2’脫氧尿嘧啶核苷）也是一種胸腺嘧啶核苷類似物，但其連有的炔羥基團在天然化合物中很少見，在細胞增殖時能夠插入正在復制的DNA分子中，基于EdU與染料的共軛反應可以進行高效快速的細胞增殖檢測分析，可以有效地檢測處于S期的細胞百分數(shù)。與傳統(tǒng)的免疫熒光染色（BrdU）檢測方法相比，更簡單，更快速，更準確。EdU只有BrdU抗體大小的1/500，在細胞內更容易擴散，不需要嚴格的樣品變性（酸解、熱解、酶解）處理，有效地避免了樣品損傷，有助于在組織、的整體水平上觀測細胞增殖的真實情況，具有更高的靈敏度和更快的檢測速度北京品質好的EdU細胞增殖檢測試劑盒價格

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