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普陀區(qū)口碑好的疾病動物模型建模

來源: 發(fā)布時間:2022-06-25

通過pirb敲入動物模型與不同類型cre小鼠的雜交,可以用于研究ad不同***或不同細(xì)胞類型pirb的調(diào)節(jié)作用。附圖說明圖1為本發(fā)明pirb基因敲入的小鼠插入pirb基因cds和loxp位點的打靶質(zhì)粒載體的構(gòu)建圖;圖2為本發(fā)明pirb基因敲入的小鼠模型的構(gòu)建方法的流程圖;圖3為本發(fā)明f1代pirb敲入的小鼠的基因型pcr結(jié)果鑒定電泳圖;圖4為本發(fā)明f1代pirb敲入的小鼠驗證pirb基因敲入效果的測序峰圖;圖5為本發(fā)明f1代pirb基因敲入的小鼠進行southern鑒定的方法示意圖;圖6為本發(fā)明f1代pirb基因敲入的小鼠進行southern鑒定的結(jié)果圖。收集研究疾病的生物學(xué)信息資料。普陀區(qū)口碑好的疾病動物模型建模

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1、動物模型名稱:橄欖油聯(lián)合酒精致肝硬化門脈高壓大鼠模型2、實驗動物種屬:SD大鼠3、實驗動物性別:雄性4、實驗動物年齡:5周5、實驗動物體重:150g-180g6、實驗動物環(huán)境:SPF級1、實驗方法:橄欖油聯(lián)合酒精誘導(dǎo)。按0.3mL/100g體重,背頸部皮下注射50%CCl4的橄欖油溶液,***注射量加倍(6mL/kg體重),2次/周,皮下注射共13周;造模前4周為10%酒精溶液喂養(yǎng)代替飲水,4周后改為30%酒精溶液灌胃(30%酒精溶液灌胃1mL/100g體重,3次/周)。繼續(xù)正常飼養(yǎng)1個月。實驗結(jié)束測量門靜脈血流量(PBF)和腸系膜上動脈血流量(SMABF)。處死,取肝臟進行組織病理學(xué)檢查。靜安區(qū)纖維化疾病動物模型建模疾病動物模型建模公司哪家好?

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可以對本發(fā)明進行各種變化和修飾。本發(fā)明對試驗中所使用到的材料以及試驗方法進行一般性和/或具體的描述。雖然為實現(xiàn)本發(fā)明目的所使用的許多材料和操作方法是本領(lǐng)域公知的,但是本發(fā)明仍然在此作盡可能詳細(xì)描述。下述實施例中所涉及的儀器、試劑、材料等,若無特別說明,均為現(xiàn)有技術(shù)中已有的常規(guī)儀器、試劑、材料等,可通過正規(guī)商業(yè)途徑獲得。下述實施例中所涉及的實驗方法,檢測方法等,若無特別說明,均為現(xiàn)有技術(shù)中已有的常規(guī)實驗方法,檢測方法等。實施例1:建立大鼠卵巢早衰模型步驟如下:將%氯化鈉溶液50ml加入規(guī)格為10mg的醫(yī)用順鉑(齊魯制藥,批號:aa1a8029a)中,配制成2mg/kg順鉑注射液,按照10ml/kg連續(xù)腹腔注射7天。實施例2:建立大鼠卵巢早衰模型步驟如下:將%氯化鈉溶液(齊魯制藥,批號:aa1a8029a)中,配制成3mg/kg順鉑注射液,按照10ml/kg連續(xù)腹腔注射7天。實施例3建立大鼠卵巢早衰模型步驟如下:將%氯化鈉溶液25ml加入規(guī)格為10mg的醫(yī)用順鉑(齊魯制藥,批號:aa1a8029a)中,配制成4mg/kg順鉑注射液,按照10ml/kg分別在***天及第八天腹腔注射。實施例4:建立大鼠卵巢早衰模型步驟如下:將%氯化鈉溶液(齊魯制藥,批號:aa1a8029a)中。

PMID:15082495、7561688)①HE染色②關(guān)節(jié)側(cè)視圖③PCR鑒定、二、糖尿病相關(guān)動物模型1.糖尿病***1)模型構(gòu)建(PMID:30826357)使用鏈佐星(STZ)注射ApoE-/-小鼠,建立糖尿病ApoE-/-小鼠模型,同時與ApoE-/-小鼠采用高脂喂養(yǎng)18周2)模型檢測指標(biāo)(PMID:29107826、28345659)3)生化指標(biāo)檢測4)超聲檢測5)主動脈染色檢測2.糖尿病心肌病1)誘發(fā)性DCM模型模型構(gòu)建(PMID:29732743)實驗動物:大鼠方法:各大鼠一次性腹腔注射鏈脲佐菌素150mg·kg-1(STZ用mol·L-1,pH,現(xiàn)配現(xiàn)用),并給予高脂飼料進行喂養(yǎng)。①模型檢測指標(biāo)血糖檢測②HE染色③超聲心電圖2)自發(fā)性1型DCM模型3)自發(fā)性2型DCM模型3.糖尿病視網(wǎng)膜病變1)模型構(gòu)建PMID:30862093實驗動物:小鼠方法:糖尿病雄性db/db(+/+Leprdb/J)小鼠。喂養(yǎng)至21周2)模型檢測指標(biāo)①膠質(zhì)原纖維酸性蛋白染色②TUNEL和HE染色DR組視網(wǎng)膜組織內(nèi)核層及外核層結(jié)構(gòu)松散,細(xì)胞排列紊亂GCL,神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層;INL,內(nèi)核層;ONL,外核層三、動物模型構(gòu)建總結(jié)1.臨床資料合理性在納入臨床資料時,需關(guān)注特定疾病患者的流行病學(xué)趨勢,即疾病易發(fā)年齡,男女比例等,同時需考慮是否與體重、基因表達(dá)等具有相關(guān)性。2.模型合理性選擇合適,簡便。哪里可以做動物模型?

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1、動物模型名稱:膽管結(jié)扎致肝膽管性肝硬化大鼠模型2、實驗動物種屬:SD大鼠3、實驗動物性別:雄性4、實驗動物年齡:5周5、實驗動物體重:200~220g6、實驗動物環(huán)境:SPF級1、實驗方法:用膽管結(jié)扎法。大鼠按10mg/kg體重腹腔注射3%戊巴比妥鈉麻醉,腹部皮膚消毒,無菌操作沿腹部正中線剪開腹腔,分離出膽管,在膽管近端和遠(yuǎn)端2處結(jié)扎膽管。手術(shù)后正常飼養(yǎng)28天。28天后解剖取肝臟進行組織病理學(xué)檢查。2、檢測標(biāo)準(zhǔn):肝臟病理切片鏡下小膽管伴纖維組織增生積分按程度為0-3分:0分:無明顯病變;1分:呈局灶性分布,受累面積在30%以下者;2分:呈多灶性分布,受累面積在30%-70%之間者;3分:呈彌漫性分布,受累面積在70%以上者。統(tǒng)計分析:每份標(biāo)本在低倍視野(10×10)下依次選取左上、右上、左下、右下、中間5個視野(共1.5mm2)進行觀察,測定并計算視野內(nèi)小膽管伴纖維組織增生總面積。上海東寰提供動物模型構(gòu)建過程中的原始實驗記錄及數(shù)據(jù)圖片。連云港心血管疾病疾病動物模型建模

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即為本發(fā)明構(gòu)建的一種pirb基因敲入的小鼠動物模型。本發(fā)明所采用第二種技術(shù)方案的特點還在于,步驟1中得到grna1和grna2后分別與trancrrna在25℃孵育10min形成二級結(jié)構(gòu)。步驟3中g(shù)rna1、grna2的濃度均為2~10pmol/ul,cas9蛋白的注射濃度為30~100ng/μl。步驟4中southern雜交采用bamhi和avrii核酸內(nèi)切酶切割f1代雜合子小鼠的dna。本發(fā)明的有益效果是:本發(fā)明提供了pirb基因敲入的小鼠動物模型及其構(gòu)建方法,本發(fā)明的小鼠動物模型對于pirb基因功能的研究和在體驗證提供了良好的基礎(chǔ)。分離自pirb基因敲入小鼠的細(xì)胞還可以用于研究pirb發(fā)揮調(diào)節(jié)作用的下游機制。普陀區(qū)口碑好的疾病動物模型建模

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