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楊浦區(qū)生殖疾病動物模型建模

來源: 發(fā)布時間:2022-07-07

1、動物模型名稱:膽管結(jié)扎致肝膽管性肝硬化大鼠模型2、實(shí)驗(yàn)動物種屬:SD大鼠3、實(shí)驗(yàn)動物性別:雄性4、實(shí)驗(yàn)動物年齡:5周5、實(shí)驗(yàn)動物體重:200~220g6、實(shí)驗(yàn)動物環(huán)境:SPF級1、實(shí)驗(yàn)方法:用膽管結(jié)扎法。大鼠按10mg/kg體重腹腔注射3%戊巴比妥鈉麻醉,腹部皮膚消毒,無菌操作沿腹部正中線剪開腹腔,分離出膽管,在膽管近端和遠(yuǎn)端2處結(jié)扎膽管。手術(shù)后正常飼養(yǎng)28天。28天后解剖取肝臟進(jìn)行組織病理學(xué)檢查。2、檢測標(biāo)準(zhǔn):肝臟病理切片鏡下小膽管伴纖維組織增生積分按程度為0-3分:0分:無明顯病變;1分:呈局灶性分布,受累面積在30%以下者;2分:呈多灶性分布,受累面積在30%-70%之間者;3分:呈彌漫性分布,受累面積在70%以上者。統(tǒng)計分析:每份標(biāo)本在低倍視野(10×10)下依次選取左上、右上、左下、右下、中間5個視野(共1.5mm2)進(jìn)行觀察,測定并計算視野內(nèi)小膽管伴纖維組織增生總面積。實(shí)驗(yàn)動物向小型化的發(fā)展趨勢更有利于實(shí)驗(yàn)者的日常管理和實(shí)驗(yàn)操作。楊浦區(qū)生殖疾病動物模型建模

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目前鑒定出15個外顯子,外顯子1起始密碼為atg,外顯子15的終止密碼子是tga(轉(zhuǎn)錄本:)。pirb蛋白屬于i型跨膜糖蛋白,包含由六個免疫球蛋白樣結(jié)構(gòu)域(domain,d)組成(d1-d6)的胞外段,一個疏水的跨膜段,三個免疫受體酪氨酸依賴的抑制序列(immunoreceptortyrosinebasedinhibitorymotifs,itims)和一個itims樣序列組成的胞內(nèi)段。理論上講,pirb的分子量約為92kd,但是western-blot分析中,pirb經(jīng)常位于105kd處,因?yàn)閜irb是糖蛋白。以往研究發(fā)現(xiàn),pirb在免疫系統(tǒng)和中樞調(diào)節(jié)中均發(fā)揮重要作用。在免疫系統(tǒng)中,pirb在許多造血細(xì)胞都有表達(dá),包括b細(xì)胞、肥大細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、粒細(xì)胞和樹突細(xì)胞,但是在胸腺細(xì)胞、成熟的t細(xì)胞和自然殺傷細(xì)胞不表達(dá)。成瘤疾病動物模型建模哪家好小鼠疾病模型應(yīng)用于轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究中的思路與策略該研究從臨床患者中篩選到潛在的致病基因。

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是從側(cè)面展示的壓迫元件插入椎間孔的結(jié)構(gòu)示意圖。圖3是術(shù)后大鼠四肢表現(xiàn)情況。圖4是術(shù)后28天大鼠的雙下肢縮足閾值變化曲線圖。圖5是重復(fù)經(jīng)顱磁刺激對大鼠背根神經(jīng)壓迫模型的影響。具體實(shí)施方式以下通過具體的實(shí)施例對本發(fā)明的技術(shù)方案做進(jìn)一步的描述。以下的實(shí)施例是對本發(fā)明的進(jìn)一步說明,而不是限制本發(fā)明的范圍。實(shí)施例1、模型的制備1、腹腔注射1%戊巴比妥鈉(40mg/kg)麻醉大鼠(220-250g),背部剃毛,碘伏消毒背部皮膚,俯臥位固定于動物手術(shù)臺上,鋪無菌巾。2、于大鼠腰4到骶1水平左側(cè)作一2-3cm縱行切口,切開皮膚,鈍性分離椎旁肌至橫突上方,暴露腰4椎間孔,腰5椎間孔(椎旁肌可用自制拉鉤保持分離狀態(tài))。3、將2根***端11為4mm,第二端12為2mm,直徑為,第二端12置于腰4椎間孔及腰5椎間孔外。如圖1和2所示,可以看到腰4錐體1、腰5錐體2、腰6錐體3、l型棒10、腰4神經(jīng)根4和腰5神經(jīng)根5的位置關(guān)系。當(dāng)l型棒10的***端11插入腰4錐體1的腰4椎間孔后,會對腰4神經(jīng)根4起到壓迫作用;同樣的,當(dāng)l型棒10的***端11插入腰5錐體2的腰5椎間孔后,會對腰5神經(jīng)根5起到壓迫作用。從而達(dá)到模擬腰椎間盤突出壓迫神經(jīng)根的目的,制備得到大鼠慢性背根神經(jīng)壓迫模型

r3):5’-atactccgaggcggatcacaa-3’步驟4、鑒定為pirb基因敲入的f0代雄性小鼠7周齡、雌性小鼠6周齡分別與野生型異性小鼠交配獲得f1代雜合子小鼠,圖2為本發(fā)明f1代雜合子小鼠pirb基因敲除小鼠的流程圖,小鼠出生后20天進(jìn)行pcr鑒定,若有陽性小鼠出生,則表示轉(zhuǎn)基因已經(jīng)整合到生殖細(xì)胞。(1)通過pcr方法對獲得的f1代小鼠進(jìn)行基因型的鑒定:(a)dna的提取:方法1:采用takaraminibestuniversalgenomicdnaextractionkit()來獲得高純度的基因組dna。步驟a.每只小鼠剪下一段尾巴(2~5mm),放入離心管中,加入180μlbuffergl,20μl蛋白激酶k和10μlrnasea。步驟b.將步驟a離心管內(nèi)于56℃孵育過夜。步驟c.過夜后12000rpm離心2min去除雜質(zhì)。步驟d.加入200μlbuffergb和200μl無水乙醇,充分混勻。步驟e.將吸附柱放在收集管上,將步驟d得到的樣品加到吸附柱里,12000rpm離心2min,棄掉收集管中液體。步驟f.棄去液體后在吸附柱中加入500μlbufferwa,12000rpm離心1min,棄掉收集管中液體。步驟g.在收集管中加入700μlbufferwb,12000rpm離心1min。棄掉收集管中液體。注意:bufferwb需要與100%乙醇預(yù)混,沿管壁加入bufferwb沖走殘余的鹽。步驟h.重復(fù)步驟g一次。驗(yàn)性動物模型是指研究者通過使用物理的、化學(xué)的和生物的致病因素作用于動物。

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1、動物模型名稱:膽管結(jié)扎致肝膽管性肝硬化大鼠模型2、實(shí)驗(yàn)動物種屬:SD大鼠3、實(shí)驗(yàn)動物性別:雄性4、實(shí)驗(yàn)動物年齡:5周5、實(shí)驗(yàn)動物體重:200~220g6、實(shí)驗(yàn)動物環(huán)境:SPF級1、實(shí)驗(yàn)方法:用膽管結(jié)扎法。大鼠按10mg/kg體重腹腔注射3%戊巴比妥鈉麻醉,腹部皮膚消毒,無菌操作沿腹部正中線剪開腹腔,分離出膽管,在膽管近端和遠(yuǎn)端2處結(jié)扎膽管。手術(shù)后正常飼養(yǎng)28天。28天后解剖取肝臟進(jìn)行組織病理學(xué)檢查。2、檢測標(biāo)準(zhǔn):肝臟病理切片鏡下小膽管伴纖維組織增生積分按程度為0-3分:0分:無明顯病變;1分:呈局灶性分布,受累面積在30%以下者;2分:呈多灶性分布,受累面積在30%-70%之間者;3分:呈彌漫性分布,受累面積在70%以上者。能夠準(zhǔn)確模擬人相關(guān)特定功能與疾病特征。鎮(zhèn)江疾病動物模型建模購買

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葡聚糖硫酸鈉(DSS)致潰瘍性結(jié)腸炎小鼠模型:1、動物模型名稱:葡聚糖硫酸鈉(DSS)致潰瘍性結(jié)腸炎小鼠模型2、實(shí)驗(yàn)動物種屬:BALB/c小鼠3、實(shí)驗(yàn)動物性別:雄性4、實(shí)驗(yàn)動物年齡:成年鼠5、實(shí)驗(yàn)動物體重:18g-22g6、實(shí)驗(yàn)動物環(huán)境:SPF級1、實(shí)驗(yàn)方法:實(shí)驗(yàn)前小鼠禁食不禁水24h,24小時后提起鼠尾將其懸空,使掙扎以排出大腸遠(yuǎn)端的大便。小鼠自由飲用5%葡聚糖硫酸鈉(DSS)溶液,連續(xù)14天。進(jìn)行疾病活動指數(shù)(DAI)的評估、取結(jié)腸進(jìn)行組織病理學(xué)檢查。2、檢測標(biāo)準(zhǔn):DAI評分明顯升高,與對照組比較具統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)腸病理鏡檢可見結(jié)腸炎癥、病變深度、隱窩破壞、潰瘍病變.楊浦區(qū)生殖疾病動物模型建模