實驗期間每天進行陰道涂片,觀測動情周期變化。進一步地,檢測***水平是指:檢測雌***(e2)、促卵泡生長素(fsh)和促黃體生成素(lh)的水平。進一步地,檢測對比卵巢重量是指:比較各組大鼠雙側(cè)卵巢臟器系數(shù)。進一步地,陰道涂片是指:采用陰道脫落細(xì)胞涂片法,使用染色劑為亞甲基藍。本發(fā)明利用順鉑成功地建立了大鼠卵巢早衰模型,為基礎(chǔ)研究建立穩(wěn)定的卵巢早衰動物模型奠定了良好的基礎(chǔ)。本發(fā)明使用的各種術(shù)語和短語具有本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的一般含義。提及的術(shù)語和短語如有與公知含義不一致的,以本發(fā)明所表述的含義為準(zhǔn)。附圖說明圖1:e2水平檢測結(jié)果示意圖。圖2:fsh水平檢測結(jié)果示意圖。圖3:lh水平檢測結(jié)果示意圖。圖4:大鼠體重檢測結(jié)果示意圖。疾病動物模型建模公司哪家好?品質(zhì)好的疾病動物模型建模公司
另外pirb在髓細(xì)胞和b細(xì)胞的表達隨細(xì)胞分化和***增加。在免疫系統(tǒng),pirb作為主要組織相容性復(fù)合物1(classimajorhistocompatibilitycomplex,mhc1)的受體,***參與免疫調(diào)節(jié),包括中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞整合素通路、細(xì)胞毒性t淋巴細(xì)胞***、b淋巴細(xì)胞***和體液—細(xì)胞免疫應(yīng)答等。pirb的前兩個細(xì)胞外免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域(d1-d2)介導(dǎo)mhci和pirb的結(jié)合。在***系統(tǒng)(centralnervoussystem,cns),pirb在許多腦區(qū)包括皮層、海馬、小腦和嗅球都有表達,但在成年脊髓不表達。在細(xì)胞層面,pirb不僅表達于神經(jīng)元,也表達于星形膠質(zhì)細(xì)胞。在許多病理條件下,如腦外傷、中風(fēng)和cns***,pirb的mrna和蛋白表達水平***增加。在cns,pirb是髓鞘抑制因子nogo-a、mag、omgp的受體,參與神經(jīng)元突起芽發(fā)和生長錐塌陷,抑制神經(jīng)元軸突再生和突觸可塑性。pirb的細(xì)胞外免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域(d3-d6)介導(dǎo)了pirb與nogoa的結(jié)合。近年來關(guān)于阿爾茨海默病(alzheimer’sdisease,ad)研究還發(fā)現(xiàn),pirb是aβ42寡聚體的高親和力受體,親和力達到納摩爾水平。pirb的前兩個細(xì)胞外免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域(d1-d2)介導(dǎo)了aβ42寡聚體和pirb的相互作用,導(dǎo)致絲切蛋白(cofilin)信號通路****組織化學(xué)染色結(jié)果發(fā)現(xiàn)。黃浦區(qū)疾病動物模型建模購買疾病動物模型建模好做嗎?
即為本發(fā)明構(gòu)建的一種pirb基因敲入的小鼠動物模型。本發(fā)明所采用第二種技術(shù)方案的特點還在于,步驟1中得到grna1和grna2后分別與trancrrna在25℃孵育10min形成二級結(jié)構(gòu)。步驟3中g(shù)rna1、grna2的濃度均為2~10pmol/ul,cas9蛋白的注射濃度為30~100ng/μl。步驟4中southern雜交采用bamhi和avrii核酸內(nèi)切酶切割f1代雜合子小鼠的dna。本發(fā)明的有益效果是:本發(fā)明提供了pirb基因敲入的小鼠動物模型及其構(gòu)建方法,本發(fā)明的小鼠動物模型對于pirb基因功能的研究和在體驗證提供了良好的基礎(chǔ)。分離自pirb基因敲入小鼠的細(xì)胞還可以用于研究pirb發(fā)揮調(diào)節(jié)作用的下游機制。通過pirb敲入動物模型與不同類型cre小鼠的雜交,可以用于研究ad不同***或不同細(xì)胞類型pirb的調(diào)節(jié)作用。
腰椎間盤突出是造成全球大部分地區(qū)工作缺失和活動受限的主要疾病,隨著日常生活節(jié)奏的不斷加快,腰椎間盤突出癥已經(jīng)成為臨床脊柱外科的常見病和多發(fā)病,而且發(fā)病人群越來越呈現(xiàn)年輕化及普遍化的趨勢。該病主要是由于腰椎長期的受力不均或突然性外傷,導(dǎo)致腰椎纖維環(huán)出現(xiàn)變形、破裂,纖維環(huán)、髓核及軟骨終板單獨或同時外突,從而壓迫到坐骨神經(jīng)、神經(jīng)根或馬尾神經(jīng),患者出現(xiàn)腰部疼痛,牽連股部,下肢足部放射性疼痛,引起神經(jīng)功能、運動功能障礙,特定身體部位出現(xiàn)麻痹或癱瘓癥狀。臨床上平時不易見到的疾病可用動物隨時復(fù)制出來。
步驟3、pmsg處理c57bl/6雌性小鼠(6周齡,平均體重20g),46h后注射hcg,與雄性小鼠合籠交配,次日取受精卵進行顯微注射,將步驟1的grna1、grna2、cas9蛋白以及線性化后的打靶載體一起注射到受精卵中,取注射后存活的受精卵移植到假孕母鼠體內(nèi),產(chǎn)出小鼠,即f0代小鼠。上述步驟中g(shù)rna1、grna2的濃度均為2~10pmol/ul,cas9蛋白的注射濃度為30~100ng/μl,cas9蛋白購自newenglandbiolabs,貨號為m0386m。步驟4、提取f0代小鼠尾部dna,pcr擴增產(chǎn)物測序,鑒定是否為嵌合體。本發(fā)明用于f0代小鼠pirb基因pcr鑒定的特異性引物如下:pcrprimers1(℃):5’armforwardprimer(f1):5’-tacgccacagggagtccaagaatg-3’5’kireverseprimer(r1):5’-gatggggagagtgaagcagaacg-3’pcrprimers2(℃):3’kiforwardprimer(f2):5’-ctgctgtccattccttattccatag-3’3’armreverseprimer(r2):5’-ctggaaatcaggctgcaaatctc-3’。primers1對應(yīng)的擴增產(chǎn)物大小為,primers2對應(yīng)的擴增產(chǎn)物為。用于f0代小鼠測序的引物如下:sequencingprimerforpcrproduct1:5’sequenceprimer(f3):5’-cacttgctctcccaaagtcgctc-3’sequencingprimerforpcrproduct2:3’sequenceprimer。開展小鼠疾病模型初步研究分析小鼠疾病模型研究初步結(jié)果與生物學(xué)信息資料等相關(guān)知識間的差距!閔行區(qū)皮膚疾病動物模型建模
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1、動物模型名稱:膽管結(jié)扎致肝膽管性肝硬化大鼠模型2、實驗動物種屬:SD大鼠3、實驗動物性別:雄性4、實驗動物年齡:5周5、實驗動物體重:200~220g6、實驗動物環(huán)境:SPF級1、實驗方法:用膽管結(jié)扎法。大鼠按10mg/kg體重腹腔注射3%戊巴比妥鈉麻醉,腹部皮膚消毒,無菌操作沿腹部正中線剪開腹腔,分離出膽管,在膽管近端和遠端2處結(jié)扎膽管。手術(shù)后正常飼養(yǎng)28天。28天后解剖取肝臟進行組織病理學(xué)檢查。2、檢測標(biāo)準(zhǔn):肝臟病理切片鏡下小膽管伴纖維組織增生積分按程度為0-3分:0分:無明顯病變;1分:呈局灶性分布,受累面積在30%以下者;2分:呈多灶性分布,受累面積在30%-70%之間者;3分:呈彌漫性分布,受累面積在70%以上者。統(tǒng)計分析:每份標(biāo)本在低倍視野(10×10)下依次選取左上、右上、左下、右下、中間5個視野(共1.5mm2)進行觀察,測定并計算視野內(nèi)小膽管伴纖維組織增生總面積。品質(zhì)好的疾病動物模型建模公司