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EdU細(xì)胞增殖分析試劑采用click化學(xué)技術(shù),可為新合成的DNA檢測與定量提供比傳統(tǒng)BrdU方法更的替代物。當(dāng)在DNA合成過程中摻入修飾的核苷EdU(5-乙炔基-2-脫氧尿苷)時(shí),可以通過快速的“click化學(xué)”反應(yīng)檢測到它,并且對(duì)細(xì)胞的破壞作用小。點(diǎn)擊化學(xué)相比于BrdU具有更簡便、更快速、更易操作的優(yōu)點(diǎn)。與使用溴脫氧尿苷(BrdU)檢測法不同,Click-iTEdU檢測法不是基于抗體,因此并不需要DNA變性以檢測摻入的核苷。此外,Click-iTEdU可以與R-PE、R-PEtandems和GFP等熒光蛋白復(fù)用提高效力。當(dāng)您平行比較這些方法時(shí),Click-iTEdU和InvitrogenClick-iTPlusEdU在測定細(xì)胞增殖方面的優(yōu)勢是顯而易見的。EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒對(duì)如今市場的影響。江西哪家公司提供EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒優(yōu)勢
傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測方法需要DNA變性,抗原修復(fù),抗原抗體過夜孵育,操作步驟復(fù)雜繁瑣。并且由于BrdU抗體分子較大,嵌入DNA分子中的BrdU無法直接與BrdU抗體結(jié)合,必須先進(jìn)行DNA變性操作才能使BrdU抗原表位暴露,但變性的程度可能導(dǎo)致錯(cuò)誤結(jié)果。如果變性不充分,會(huì)導(dǎo)致BrdU難以暴露,無法檢測,而且變性過程從邊緣向中間滲透,會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞核DNA的變性不均勻,邊緣模糊不清。如果變性過分,則會(huì)導(dǎo)致DNA斷裂,甚至降解,導(dǎo)致核染不均一。另外,不同抗體試劑公司的抗體質(zhì)量不一致,造成難以確保實(shí)驗(yàn)重復(fù)性,且容易產(chǎn)生假陽性結(jié)果。上海品牌EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒優(yōu)勢EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒使用時(shí)要考慮什么問題?
CFDASE法(C0051、C1031)基于細(xì)胞熒光示蹤的原理能檢測到單個(gè)的增殖細(xì)胞,但由于每增殖一次熒光減弱一半,在熒光顯微鏡下較難區(qū)分熒光減弱一半的細(xì)胞,檢測靈敏度不是很高,通常單適用于流式細(xì)胞儀檢測。在進(jìn)行科學(xué)研究時(shí),上述這些基于細(xì)胞活性或CFDASE的方法可以作為EdU法的補(bǔ)充性檢測方法。EdU(5-ethynyl-2-deoxyuridine),中文名為5-乙炔基-2-脫氧尿苷,是一種新型胸苷(胸腺嘧啶脫氧核苷,thymidine)類似物,EdU可以在DNA合成過程中替代胸苷摻入到新合成的DNA中
該產(chǎn)品是采用成像檢測方法對(duì)貼壁細(xì)胞進(jìn)行檢測,適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細(xì)胞可在孵育EdU后進(jìn)行細(xì)胞涂片處理,固定后再采用貼壁細(xì)胞的染色流程進(jìn)行檢測。也可以應(yīng)用于流式細(xì)胞儀檢測。建議染色完成后立即進(jìn)行熒光顯微鏡拍照觀察;如果條件限制,請(qǐng)于4°C條件下避光濕潤保存3天之內(nèi)完成拍照。若為細(xì)胞爬片或涂片,可使用抗熒光淬滅封片劑進(jìn)行封片后于4°C條件下保存及拍照檢測。而EdU檢測方法不需要?jiǎng)×业腄NA變性,只需溫和的細(xì)胞固定化和透化處理,能夠較好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)抗原識(shí)別位點(diǎn),操作步驟更加快速、靈敏和準(zhǔn)確EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒的運(yùn)用領(lǐng)域有哪些?
EdU與T非常相似,而EdU染料只有BrdU抗體的1/500,在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無需抗原抗體反應(yīng),能在細(xì)胞和組織水平更準(zhǔn)確地反映DNA復(fù)制活性。EdU(5-Ethynyl-2’-deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類似物,能夠在細(xì)胞增殖時(shí)期代替胸腺嘧啶(T)滲入正在復(fù)制的DNA分子中,通過基于EdU與Apollo®熒光染料的特異性反應(yīng)快速檢測細(xì)胞DNA復(fù)制活性,適用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長與發(fā)育、DNA修復(fù)、病毒復(fù)制、細(xì)胞標(biāo)記示蹤等方面的研究,尤其適合進(jìn)行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他藥物的篩選實(shí)驗(yàn)。與BrdU檢測方法相比,EdU檢測方法更快速、更靈敏、更準(zhǔn)確。EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒多少錢?浙江品牌EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒購買
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細(xì)胞增殖分析是細(xì)胞生長和分化研究的關(guān)鍵,在藥物開發(fā)階段常用來評(píng)估化學(xué)藥物的毒性和對(duì)細(xì)胞生長的控制作用。經(jīng)過之后的細(xì)胞分裂階段,各個(gè)子代細(xì)胞會(huì)從母細(xì)胞中接收到大約一半的熒光染料。采用流式細(xì)胞儀對(duì)熒光強(qiáng)度進(jìn)行分析,即可測定出自標(biāo)記結(jié)合起,單個(gè)細(xì)胞或細(xì)胞群所經(jīng)歷的傳代數(shù)目。通常根據(jù)平均DNA含量或細(xì)胞代謝參數(shù)進(jìn)行細(xì)胞增殖檢測,此類分析可以報(bào)告出總細(xì)胞數(shù)目和活細(xì)胞數(shù)目,或者測定出單個(gè)細(xì)胞內(nèi)的DNA合成情況。細(xì)胞增殖染料稀釋分析主要基于細(xì)胞膜通透性,熒光團(tuán)分子、染料進(jìn)入細(xì)胞后,將會(huì)共價(jià)結(jié)合到蛋白質(zhì)上的氨基基團(tuán)上,從而使染料能夠長時(shí)間停留在細(xì)胞中。江西哪家公司提供EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒優(yōu)勢
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