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河北品質(zhì)好的EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒原理

來源: 發(fā)布時(shí)間:2022-09-05

CFDASE法(C0051、C1031)基于細(xì)胞熒光示蹤的原理能檢測到單個(gè)的增殖細(xì)胞,但由于每增殖一次熒光減弱一半,在熒光顯微鏡下較難區(qū)分熒光減弱一半的細(xì)胞,檢測靈敏度不是很高,通常單適用于流式細(xì)胞儀檢測。在進(jìn)行科學(xué)研究時(shí),上述這些基于細(xì)胞活性或CFDASE的方法可以作為EdU法的補(bǔ)充性檢測方法。EdU(5-ethynyl-2-deoxyuridine),中文名為5-乙炔基-2-脫氧尿苷,是一種新型胸苷(胸腺嘧啶脫氧核苷,thymidine)類似物,EdU可以在DNA合成過程中替代胸苷摻入到新合成的DNA中。EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒的作用是什么?上海東寰告訴您。河北品質(zhì)好的EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒原理

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本試劑盒可以檢測到細(xì)胞或組織樣品中單個(gè)的增殖細(xì)胞,同時(shí)也可以對細(xì)胞或組織樣品總體的細(xì)胞增殖情況進(jìn)行定量檢測。本試劑盒可以檢測培養(yǎng)的細(xì)胞或組織樣品,也可以檢測組織切片,但均需提前進(jìn)行EdU的摻入。細(xì)胞增殖能力的檢測是評估細(xì)胞活性、基因毒性和抗藥物效果等的基本方法。公認(rèn)的精確的檢測細(xì)胞增殖的方法是直接檢測細(xì)胞中DNA的合成。初使用的通過檢測DNA合成來檢測細(xì)胞增殖的方法是放射性標(biāo)記核苷摻入法,如氚標(biāo)記胸腺嘧啶脫氧核苷([3H]thymidine)摻入法提供EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒供應(yīng)商EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒多少錢?上海東寰告訴您!

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EdU是一種胸腺嘧啶核苷類似物,分子量很小,在動(dòng)物體內(nèi)能夠迅速擴(kuò)散到各種組織和中,并滲入正在復(fù)制的DNA分子,通過基于Apollo®熒光染料與EdU的特異性反應(yīng)即可簡單、快速、準(zhǔn)確地檢測出細(xì)胞增殖情況。與BrdU檢測方法相比,EdU檢測方法用量小得多,十分之一的用量即可獲得與BrdU檢測試劑盒相同甚至更好的檢測結(jié)果,而且小分子化學(xué)反應(yīng)檢測方法反應(yīng)快,效率高,反應(yīng)時(shí)間需幾分鐘,不需要DNA變性、蛋白酶處理、抗原抗體過夜孵育,能夠更好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài),更簡單、更靈敏、更快速、更準(zhǔn)確

細(xì)胞增殖的研究方法有很多,主要包括:BrdU,EdU,CCK8等方法。其中EdU檢測方法是新的細(xì)胞增殖檢測方法。細(xì)胞增殖是生物體的重要生命特征,細(xì)胞以分裂的方式進(jìn)行增殖。單細(xì)胞生物,以細(xì)胞分裂的方式產(chǎn)生新的個(gè)體。真核生物的分裂依據(jù)過程不同有三種方式,有有絲分裂,無絲分裂,減數(shù)分裂。其中有絲分裂是人、動(dòng)物、植物、等一切真核生物中的一種普遍的分裂方式,是真核細(xì)胞增殖的主要方式。減數(shù)分裂是生殖細(xì)胞形成時(shí)的一種特殊的有絲分裂EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒如何發(fā)揮重要作用?

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通過基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應(yīng),把熒光集團(tuán)標(biāo)記到新合成的含有EdU的DNA上面,這樣就可以進(jìn)行高效快速的檢測出DNA復(fù)制活性,廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)等方面的研究。EdU標(biāo)記(a)將細(xì)胞完全培養(yǎng)基中按照500:1的比例加入EdU溶液,制成2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基;(b)提前將2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基預(yù)熱,然后等體積加入到細(xì)胞原有培養(yǎng)基中,獲得lxEdU溶液,其中EdU的終濃度為10uM;注:1)我們不建議替換全部培養(yǎng)基,因?yàn)檫@樣可能會(huì)影響細(xì)胞增殖的速度;2)配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配,用量以沒過細(xì)胞為宜;(c)每孔加入300ul含EdU培養(yǎng)基孵育細(xì)胞2小時(shí),棄培養(yǎng)基;注:1)培養(yǎng)時(shí)間取決于細(xì)胞的增殖速度和生長狀態(tài);2)大多數(shù)**細(xì)胞以及粘附細(xì)胞系均可采用2小時(shí)的孵育時(shí)間(d)以lxPBS清洗細(xì)胞兩次,毎次5分鐘,以除去未摻入DNA的EdU殘留。注:貼壁不牢的細(xì)胞可降低清洗強(qiáng)度。EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒的特點(diǎn)是什么?上海東寰告訴您。山東咨詢EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒優(yōu)勢

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與BrdU方法相比,EdU檢測方法無需DNA變性,無需抗原修復(fù),無需抗原抗體反應(yīng),更簡單、更靈敏、更快速、更準(zhǔn)確,是細(xì)胞增殖檢測的比較好選擇。更準(zhǔn)確--無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免變性帶來的樣品損傷,確保細(xì)胞核邊緣清晰完整;更簡單--無需抗原抗體反應(yīng),基于小分子化學(xué)反應(yīng)的檢測方法,簡單高效,反應(yīng)單需要幾分鐘;更靈敏--無需抗體,檢測染料單為BrdU抗體的1/500,更容易擴(kuò)散,即使單個(gè)增殖細(xì)胞也能準(zhǔn)確檢測;更快速--無需過夜,省卻了抗原抗體反應(yīng)的復(fù)雜繁瑣步驟,完成整個(gè)檢測周期單需2.5小時(shí);更兼容--對樣品幾乎無損傷,更容易與多種抗體或熒光蛋白同時(shí)標(biāo)記,能夠同時(shí)檢測細(xì)胞其他性狀特征河北品質(zhì)好的EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒原理

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