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南京品牌疾病動(dòng)物模型建模

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2022-11-07

該模型能夠幫助我們研究pirb基因在免疫系統(tǒng)和神經(jīng)系統(tǒng)的功能以及下游的調(diào)節(jié)機(jī)制。本發(fā)明的另一目的在于提供上述小鼠動(dòng)物模型的構(gòu)建方法。本發(fā)明所采用的第一種技術(shù)方案是:pirb基因敲入的小鼠動(dòng)物模型,包括確定pirb基因的待敲入的特異性靶位點(diǎn)grna1和grna2,將pirb基因敲入c57bl/6j小鼠的rosa26基因的內(nèi)含子1內(nèi),所述grna1的基因序列如seqid**所示,grna2的基因序列如。本發(fā)明所采用的第二種技術(shù)方案為:pirb基因敲入的小鼠動(dòng)物模型的構(gòu)建方法,具體按照以下步驟實(shí)施:步驟1、基于crispr/cas9技術(shù)構(gòu)建針對(duì)c57bl/6j小鼠rosa26基因的特異性grna1和grna2,grna1的基因序列如seqid**所示,grna2的基因序列如;步驟2、構(gòu)建“cagpromoter-loxp-stop-loxp-kozak-mousepirbcds-polya”基因盒打靶載體,將打靶載體進(jìn)行線性化處理;步驟3、步驟2中將含有l(wèi)oxp位點(diǎn)打靶載體、步驟1中有活性的grna1和grna2與cas9蛋白共同注射進(jìn)入**小鼠受精卵中,獲得f0代小鼠;步驟4、將步驟3中性成熟的陽(yáng)性f0小鼠分別與野生型鼠交配繁一代,獲得f1代雜合子小鼠,通過(guò)pcr、測(cè)序和southern雜交確定動(dòng)物基因型;步驟5、將步驟4獲得的f1代雜合子小鼠近交獲得f2代純合子小鼠。動(dòng)物模型作為人類疾病的縮影。南京品牌疾病動(dòng)物模型建模

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l型棒10的第二端12露在椎間孔外,有利于調(diào)整插入位置。***端11的長(zhǎng)度大于等于第二端12的長(zhǎng)度。在本實(shí)施例中l(wèi)型棒的材料選擇的是h62黃銅。在另外的實(shí)施例中其材料可以是聚乳酸等其他材料,甚至可以用1個(gè)u型棒來(lái)代替2根l型棒插入腰4椎間孔和腰5椎間孔。u型棒的兩臂均為4mm長(zhǎng)。手術(shù)成功標(biāo)志為:當(dāng)l型棒或u型棒正確插入,壓迫到背根神經(jīng)節(jié)時(shí),手術(shù)側(cè)的后肢肌肉呈現(xiàn)輕微的暫時(shí)性抽搐,且不引起鼠尾擺動(dòng)。需要根據(jù)大鼠體重選擇l型棒或u型棒的直徑大?。寒?dāng)大鼠體重在200g到不足220g范圍時(shí),采用直徑為;當(dāng)大鼠體重在220g到不足250g范圍時(shí),采用直徑為;當(dāng)大鼠體重在250g到不足300g范圍時(shí),采用直徑為;當(dāng)大鼠體重在300g到350g范圍時(shí),采用直徑為。實(shí)施例2、模型的效果檢測(cè)本發(fā)明已通過(guò)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證了該模型的效果。通過(guò)28天的觀察,確定了實(shí)施例1獲得的模型穩(wěn)定且準(zhǔn)確的模擬了腰椎間盤突出壓迫神經(jīng)根后的跛行以及疼痛癥狀。圖3顯示了術(shù)后大鼠出現(xiàn)手術(shù)側(cè)(左側(cè))后爪(見(jiàn)a部所示)沒(méi)有同其他三只爪一起抓握網(wǎng)架,而是蜷縮著,呈現(xiàn)不敢承重的表現(xiàn)。表1大鼠術(shù)后不同天數(shù)縮足閾值(單位:g)表1顯示了術(shù)后28天內(nèi)11只大鼠雙下肢縮足閾值的具體的均值和標(biāo)準(zhǔn)誤。上海皮膚疾病動(dòng)物模型建模疾病動(dòng)物模型建模怎么做?

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實(shí)驗(yàn)期間每天進(jìn)行陰道涂片,觀測(cè)動(dòng)情周期變化。進(jìn)一步地,檢測(cè)***水平是指:檢測(cè)雌***(e2)、促卵泡生長(zhǎng)素(fsh)和促黃體生成素(lh)的水平。進(jìn)一步地,檢測(cè)對(duì)比卵巢重量是指:比較各組大鼠雙側(cè)卵巢臟器系數(shù)。進(jìn)一步地,陰道涂片是指:采用陰道脫落細(xì)胞涂片法,使用染色劑為亞甲基藍(lán)。本發(fā)明利用順鉑成功地建立了大鼠卵巢早衰模型,為基礎(chǔ)研究建立穩(wěn)定的卵巢早衰動(dòng)物模型奠定了良好的基礎(chǔ)。本發(fā)明使用的各種術(shù)語(yǔ)和短語(yǔ)具有本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的一般含義。提及的術(shù)語(yǔ)和短語(yǔ)如有與公知含義不一致的,以本發(fā)明所表述的含義為準(zhǔn)。附圖說(shuō)明圖1:e2水平檢測(cè)結(jié)果示意圖。圖2:fsh水平檢測(cè)結(jié)果示意圖。圖3:lh水平檢測(cè)結(jié)果示意圖。圖4:大鼠體重檢測(cè)結(jié)果示意圖。

葡聚糖硫酸鈉(DSS)致潰瘍性結(jié)腸炎小鼠模型:1、動(dòng)物模型名稱:葡聚糖硫酸鈉(DSS)致潰瘍性結(jié)腸炎小鼠模型2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種屬:BALB/c小鼠3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物性別:雄性4、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物年齡:成年鼠5、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重:18g-22g6、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境:SPF級(jí)1、實(shí)驗(yàn)方法:實(shí)驗(yàn)前小鼠禁食不禁水24h,24小時(shí)后提起鼠尾將其懸空,使掙扎以排出大腸遠(yuǎn)端的大便。小鼠自由飲用5%葡聚糖硫酸鈉(DSS)溶液,連續(xù)14天。進(jìn)行疾病活動(dòng)指數(shù)(DAI)的評(píng)估、取結(jié)腸進(jìn)行組織病理學(xué)檢查。2、檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn):DAI評(píng)分明顯升高,與對(duì)照組比較具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)腸病理鏡檢可見(jiàn)結(jié)腸炎癥、病變深度、隱窩破壞、潰瘍病變.確定研究疾病目的了解影響疾病發(fā)生的內(nèi)在與外在因素。

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是從側(cè)面展示的壓迫元件插入椎間孔的結(jié)構(gòu)示意圖。圖3是術(shù)后大鼠四肢表現(xiàn)情況。圖4是術(shù)后28天大鼠的雙下肢縮足閾值變化曲線圖。圖5是重復(fù)經(jīng)顱磁刺激對(duì)大鼠背根神經(jīng)壓迫模型的影響。具體實(shí)施方式以下通過(guò)具體的實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案做進(jìn)一步的描述。以下的實(shí)施例是對(duì)本發(fā)明的進(jìn)一步說(shuō)明,而不是限制本發(fā)明的范圍。實(shí)施例1、模型的制備1、腹腔注射1%戊巴比妥鈉(40mg/kg)麻醉大鼠(220-250g),背部剃毛,碘伏消毒背部皮膚,俯臥位固定于動(dòng)物手術(shù)臺(tái)上,鋪無(wú)菌巾。2、于大鼠腰4到骶1水平左側(cè)作一2-3cm縱行切口,切開(kāi)皮膚,鈍性分離椎旁肌至橫突上方,暴露腰4椎間孔,腰5椎間孔(椎旁肌可用自制拉鉤保持分離狀態(tài))。3、將2根***端11為4mm,第二端12為2mm,直徑為,第二端12置于腰4椎間孔及腰5椎間孔外。如圖1和2所示,可以看到腰4錐體1、腰5錐體2、腰6錐體3、l型棒10、腰4神經(jīng)根4和腰5神經(jīng)根5的位置關(guān)系。當(dāng)l型棒10的***端11插入腰4錐體1的腰4椎間孔后,會(huì)對(duì)腰4神經(jīng)根4起到壓迫作用;同樣的,當(dāng)l型棒10的***端11插入腰5錐體2的腰5椎間孔后,會(huì)對(duì)腰5神經(jīng)根5起到壓迫作用。從而達(dá)到模擬腰椎間盤突出壓迫神經(jīng)根的目的,制備得到大鼠慢性背根神經(jīng)壓迫模型~上海東寰在動(dòng)物建模方面已經(jīng)有了多年的技術(shù)經(jīng)驗(yàn)。普陀區(qū)疾病動(dòng)物模型建模價(jià)格

人類疾病的動(dòng)物模型是指各種醫(yī)學(xué)科學(xué)研究中建立的具有人類疾病模擬表現(xiàn)的動(dòng)物。南京品牌疾病動(dòng)物模型建模

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