來(lái)源：ZSCI基礎(chǔ)研究中如果加入動(dòng)物實(shí)驗(yàn)部分則使得研究更加趨于完善，投稿時(shí)中稿率也相應(yīng)會(huì)增加。但將動(dòng)物實(shí)驗(yàn)做好卻不是一件容易的事情。這篇文章主要講動(dòng)物模型的構(gòu)建技術(shù)，把骨科、糖尿病相關(guān)的動(dòng)物模型構(gòu)建做了一個(gè)***的技術(shù)匯總，建議先碼后讀，文章內(nèi)容有部分做了簡(jiǎn)化，想看詳細(xì)講解可以在文末獲取課件！一、骨科相關(guān)動(dòng)物模型1.骨關(guān)節(jié)炎1）骨關(guān)節(jié)炎模型構(gòu)建方法（誘發(fā)性）-關(guān)節(jié)腔內(nèi)手術(shù)法、關(guān)節(jié)腔注射法。2）模型評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)①SafraninO染色與OARSI評(píng)分（PMID：31046827、30942801）②HE染色與OARSI評(píng)分（PMID：30609097）③SafraninO染色與Mankin評(píng)分（PMID：30609097）2.骨質(zhì)疏松癥1）骨關(guān)節(jié)炎模型構(gòu)建方法去趨法模型PMID：31037128實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：小鼠方法：在戊巴比妥麻醉下進(jìn)行雙側(cè)卵巢切除術(shù)以誘導(dǎo)骨質(zhì)疏松癥，同時(shí)對(duì)照組小鼠*進(jìn)行卵巢外置但未切除。2）模型檢測(cè)指標(biāo)(PMID：31037128)①HE染色②Micro-CT③TRAcP染色④Micro-CT相關(guān)指標(biāo)檢測(cè)3.類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（RA）是一種慢性自身免疫性疾病狀態(tài)，其特征是滑膜增生，軟骨退化和脊椎關(guān)節(jié)的骨侵蝕4.強(qiáng)直性脊柱炎1）強(qiáng)直性脊柱炎模型構(gòu)建方法2）模型檢測(cè)指標(biāo)。疾病動(dòng)物模型建模廠家。江蘇哪家公司提供疾病動(dòng)物模型建模

得到大鼠慢性背根神經(jīng)壓迫模型。進(jìn)一步地，l型棒的直徑為，端長(zhǎng)3-5mm，第二端長(zhǎng)1-3mm。具體地，根據(jù)大鼠體重選擇l型棒的直徑大?。寒?dāng)大鼠體重在200g到不足220g范圍時(shí)，采用直徑為；當(dāng)大鼠體重在220g到不足250g范圍時(shí)，采用直徑為；當(dāng)大鼠體重在250g到不足300g范圍時(shí)，采用直徑為；當(dāng)大鼠體重在300g到350g范圍時(shí)，采用直徑為。在另一個(gè)具體實(shí)施方式中，壓迫元件為u型棒；步驟三具體為：將u型棒的***端和第二端分別插入到左側(cè)或右側(cè)腰4椎間孔及腰5椎間孔中，得到大鼠慢性背根神經(jīng)壓迫模型。進(jìn)一步地，壓迫元件采用不受磁場(chǎng)干擾、置入體內(nèi)不會(huì)對(duì)神經(jīng)造成化學(xué)刺激以及具有一定可塑性的材料制備而成。江蘇哪家公司提供疾病動(dòng)物模型建模歡迎致電咨詢疾病動(dòng)物模型建模。

本能發(fā)明的另一目的是公開(kāi)了如上所述的方法制備的鼠慢性背根神經(jīng)壓迫模型的用途是將該模型用于腰椎間盤(pán)突出***方法研究和/或影像學(xué)檢測(cè)研究。進(jìn)一步地，該模型用于與磁性相關(guān)的***和/或檢測(cè)方面的研究，比如經(jīng)顱磁刺激和核磁共振。本發(fā)明利用壓迫元件插入腰椎椎間孔，模擬腰椎間盤(pán)突出后突出物對(duì)神經(jīng)根的持續(xù)慢性的機(jī)械壓迫癥狀，有益效果有：1.應(yīng)用機(jī)械壓迫神經(jīng)根模擬腰椎間盤(pán)突出病理，癥狀的病因?qū)W與臨床情況接近；2.相關(guān)的疼痛行為類(lèi)似于特定的慢性疼痛癥狀，且易于客觀測(cè)量；3.制備方法簡(jiǎn)單，對(duì)動(dòng)物損傷小，穩(wěn)定性好，成功率高；4.造模關(guān)鍵材料壓迫元件不受磁場(chǎng)干擾，無(wú)在磁場(chǎng)作用下移位風(fēng)險(xiǎn)，有利于后續(xù)對(duì)動(dòng)物進(jìn)行磁療，經(jīng)顱磁刺激等***及核磁共振等檢查；5.造模關(guān)鍵材料壓迫元件不影響磁場(chǎng)，不會(huì)對(duì)***儀器和核磁共振等儀器產(chǎn)生不良影響；6.此方法獲得的模型由于采用了h62黃銅或聚乳酸材料制備的壓迫元件，使得研究方法與檢測(cè)方法不受磁場(chǎng)作用限制，豐富了腰椎間盤(pán)突出臨床前研究的***方法及影像學(xué)檢測(cè)，為臨床研究提供理論依據(jù)。以下將結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說(shuō)明，以充分說(shuō)明本發(fā)明的目的、技術(shù)特征和技術(shù)效果。附圖說(shuō)明圖1是壓迫元件插入椎間孔的結(jié)構(gòu)示意圖

具體實(shí)施方式下面結(jié)合附圖和具體實(shí)施方式對(duì)發(fā)明作進(jìn)一步闡述。本發(fā)明構(gòu)建了pirb基因敲入的小鼠動(dòng)物模型，將pirb基因敲入c57bl/6j小鼠的rosa26基因的內(nèi)含子1內(nèi)。具體來(lái)說(shuō)，構(gòu)建一個(gè)cagpromoter-loxp-stop-loxp-kozak-mousepirbcds-polya的基因盒，將其克隆進(jìn)入rosa26基因的內(nèi)含子1中。rosa26基因(ncbireferencesequence：)位于小鼠的七號(hào)染色體。本發(fā)明pirb基因敲入的小鼠動(dòng)物模型的構(gòu)建方法，具體按照以下步驟具體實(shí)施:步驟1、根據(jù)小鼠rosa26基因(genebank：))序列，利用cas-desigher軟件在1號(hào)內(nèi)含子設(shè)計(jì)grna靶序列，并搜索小鼠dbm-db基因組數(shù)據(jù)庫(kù)基因，采用crispr脫靶效應(yīng)軟件cas-offinder檢測(cè)潛在的脫靶位點(diǎn)：**終選取兩個(gè)grna，grna1的基因序列如seqid**所示，grna2的基因序列如：seqid**:ggcaggcttaaaggctaacctgg將grna1和grna2分別與trancrrna在25℃孵育10min形成二級(jí)結(jié)構(gòu)；步驟2、利用c57bl/6小鼠文庫(kù)bac克隆，通過(guò)pcr擴(kuò)增獲得pirb基因cds的同源臂，采用in-fusion方法構(gòu)建含有cagpromoter-loxp-stop-loxp-kozak-mousepirbcds-polya的基因盒的質(zhì)粒打靶載體，通過(guò)酶切、pcr及測(cè)序?qū)Υ虬匈|(zhì)粒載體進(jìn)行驗(yàn)證，圖1為構(gòu)建好的pirb基因打靶載體的示意圖。查閱已有的相關(guān)小鼠模型綜述文獻(xiàn)。

葡聚糖硫酸鈉（DSS）致潰瘍性結(jié)腸炎小鼠模型：1、動(dòng)物模型名稱：葡聚糖硫酸鈉（DSS）致潰瘍性結(jié)腸炎小鼠模型2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種屬：BALB/c小鼠3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物性別：雄性4、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物年齡：成年鼠5、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重：18g-22g6、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境：SPF級(jí)1、實(shí)驗(yàn)方法：實(shí)驗(yàn)前小鼠禁食不禁水24h，24小時(shí)后提起鼠尾將其懸空，使掙扎以排出大腸遠(yuǎn)端的大便。小鼠自由飲用5%葡聚糖硫酸鈉（DSS）溶液，連續(xù)14天。進(jìn)行疾病活動(dòng)指數(shù)(DAI)的評(píng)估、取結(jié)腸進(jìn)行組織病理學(xué)檢查。2、檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)：DAI評(píng)分明顯升高，與對(duì)照組比較具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)腸病理鏡檢可見(jiàn)結(jié)腸炎癥、病變深度、隱窩破壞、潰瘍病變.收集研究疾病的生物學(xué)信息資料。靜安區(qū)疾病動(dòng)物模型建模公司

人類(lèi)疾病的動(dòng)物模型是指各種醫(yī)學(xué)科學(xué)研究中建立的具有人類(lèi)疾病模擬表現(xiàn)的動(dòng)物。江蘇哪家公司提供疾病動(dòng)物模型建模

該模型能夠幫助我們研究pirb基因在免疫系統(tǒng)和神經(jīng)系統(tǒng)的功能以及下游的調(diào)節(jié)機(jī)制。本發(fā)明的另一目的在于提供上述小鼠動(dòng)物模型的構(gòu)建方法。本發(fā)明所采用的第一種技術(shù)方案是：pirb基因敲入的小鼠動(dòng)物模型，包括確定pirb基因的待敲入的特異性靶位點(diǎn)grna1和grna2，將pirb基因敲入c57bl/6j小鼠的rosa26基因的內(nèi)含子1內(nèi)，所述grna1的基因序列如seqid**所示，grna2的基因序列如。本發(fā)明所采用的第二種技術(shù)方案為：pirb基因敲入的小鼠動(dòng)物模型的構(gòu)建方法，將步驟3中性成熟的陽(yáng)性f0小鼠分別與野生型鼠交配繁一代，獲得f1代雜合子小鼠，通過(guò)pcr、測(cè)序和southern雜交確定動(dòng)物基因型；將步驟4獲得的f1代雜合子小鼠近交獲得f2代純合子小鼠。江蘇哪家公司提供疾病動(dòng)物模型建模

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