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哪一家EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒原理

來源: 發(fā)布時間:2023-02-20

傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測方法需要DNA變性,抗原修復(fù),抗原抗體過夜孵育,操作步驟復(fù)雜繁瑣。并且由于BrdU抗體分子較大,嵌入DNA分子中的BrdU無法直接與BrdU抗體結(jié)合,必須先進(jìn)行DNA變性操作才能使BrdU抗原表位暴露,但變性的程度可能導(dǎo)致錯誤結(jié)果。如果變性不充分,會導(dǎo)致BrdU難以暴露,無法檢測,而且變性過程從邊緣向中間滲透,會導(dǎo)致細(xì)胞核DNA的變性不均勻,邊緣模糊不清。如果變性過分,則會導(dǎo)致DNA斷裂,甚至降解,導(dǎo)致核染不均一。另外,不同抗體試劑公司的抗體質(zhì)量不一致,造成難以確保實驗重復(fù)性,且容易產(chǎn)生假陽性結(jié)果。上海東寰與您分享EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒對如今市場的影響。哪一家EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒原理

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該產(chǎn)品是采用成像檢測方法對貼壁細(xì)胞進(jìn)行檢測,適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細(xì)胞可在孵育EdU后進(jìn)行細(xì)胞涂片處理,固定后再采用貼壁細(xì)胞的染色流程進(jìn)行檢測。也可以應(yīng)用于流式細(xì)胞儀檢測。建議染色完成后立即進(jìn)行熒光顯微鏡拍照觀察;如果條件限制,請于4°C條件下避光濕潤保存3天之內(nèi)完成拍照。若為細(xì)胞爬片或涂片,可使用抗熒光淬滅封片劑進(jìn)行封片后于4°C條件下保存及拍照檢測。而EdU檢測方法不需要劇烈的DNA變性,只需溫和的細(xì)胞固定化和透化處理,能夠較好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)抗原識別位點(diǎn),操作步驟更加快速、靈敏和準(zhǔn)確河南品質(zhì)好的EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒說明書上海東寰告訴您EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒如何去使用呢?

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細(xì)胞增殖能力的檢測是評估細(xì)胞活性、基因毒性和抗藥物效果等的基本方法。公認(rèn)的精確的檢測細(xì)胞增殖的方法是直接檢測細(xì)胞中DNA的合成。初使用的通過檢測DNA合成來檢測細(xì)胞增殖的方法是放射性標(biāo)記核苷摻入法,如氚標(biāo)記胸腺嘧啶脫氧核苷([3H]thymidine)摻入法。細(xì)胞活性的細(xì)胞增殖檢測方法,能檢測到細(xì)胞的總體增殖效果,但無法檢測到單個的增殖細(xì)胞。這幾種方法盡管都不是檢測DNA合成的,但被用于替代[3H]thymidine摻入法。上述這些基于細(xì)胞活性或CFDASE的方法可以作為EdU法的補(bǔ)充性檢測方法。

EdU細(xì)胞增殖分析試劑采用click化學(xué)技術(shù),可為新合成的DNA檢測與定量提供比傳統(tǒng)BrdU方法更的替代物。當(dāng)在DNA合成過程中摻入修飾的核苷EdU(5-乙炔基-2-脫氧尿苷)時,可以通過快速的“click化學(xué)”反應(yīng)檢測到它,并且對細(xì)胞的破壞作用小。點(diǎn)擊化學(xué)相比于BrdU具有更簡便、更快速、更易操作的優(yōu)點(diǎn)。與使用溴脫氧尿苷(BrdU)檢測法不同,Click-iTEdU檢測法不是基于抗體,因此并不需要DNA變性以檢測摻入的核苷。此外,Click-iTEdU可以與R-PE、R-PEtandems和GFP等熒光蛋白復(fù)用提高效力。當(dāng)您平行比較這些方法時,Click-iTEdU和InvitrogenClick-iTPlusEdU在測定細(xì)胞增殖方面的優(yōu)勢是顯而易見的。上海東寰EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒的運(yùn)用領(lǐng)域。

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EdU是一種胸腺嘧啶核苷類似物,能夠在細(xì)胞增殖時期代替T滲入正在復(fù)制的DNA分子,通過基于EdU與Apollo®熒光染料的特異性反應(yīng)檢測DNA復(fù)制活性,通過檢測EdU標(biāo)記便能準(zhǔn)確地反映細(xì)胞的增殖情況。與BrdU檢測方法相比,EdU檢測方法更快速、更靈敏、更準(zhǔn)確。EdU檢測染料只有BrdU抗體大小的1/500,在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等)即可有效檢測,可有效避免樣品損傷,在細(xì)胞和組織水平能更準(zhǔn)確地反映細(xì)胞增殖等現(xiàn)象EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒哪家好?上海東寰告訴您!福建口碑好的EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒供應(yīng)商

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建議染色完成后立即進(jìn)行熒光顯微鏡拍照觀察;如果條件限制,請于4°C條件下避光濕潤保存3天之內(nèi)完成拍照。若為細(xì)胞爬片或涂片,可使用抗熒光淬滅封片劑進(jìn)行封片后于4°C條件下保存及拍照檢測。而EdU檢測方法不需要劇烈的DNA變性,只需溫和的細(xì)胞固定化和透化處理,能夠較好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)抗原識別位點(diǎn),操作步驟更加快速、靈敏和準(zhǔn)確。EdU與胸腺嘧啶(T)結(jié)構(gòu)非常相似,而EdU染料大小只有BrdU抗體的1/500,在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無需抗原抗體反應(yīng),能在細(xì)胞和組織水平更快速便捷地反映DNA復(fù)制活性哪一家EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒原理

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