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1、動(dòng)物模型名稱:卵清蛋白聯(lián)合氫氧化鋁致支氣管***豚鼠模型2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種屬:豚鼠3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物性別:雌雄不限4、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物年齡:7~8周齡5、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重:250~350g6、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境:SPF級(jí)。1、實(shí)驗(yàn)方法:卵清蛋白聯(lián)合氫氧化鋁誘導(dǎo)。每只豚鼠腹腔注射100μg卵清蛋白(OVA)+30mg氫氧化鋁(Al(OH)3)致敏。***次致敏后第5天再致敏1次,共2次。***一次致敏后第21d開始采用超聲霧化器噴霧10μgOVA/只,豚鼠置于一直徑約50cm的有蓋大圓盆中,給藥過程中對(duì)盆內(nèi)通O2。2、檢測標(biāo)準(zhǔn):使用OVA噴霧激發(fā)后癥狀觀察,豚鼠出現(xiàn)不同程度的呼吸急促、咳嗽、抓癢、甚至抽搐等支氣管***癥狀,表明成功構(gòu)建了豚鼠***模型。生物醫(yī)學(xué)研究的進(jìn)展常常依賴于使用動(dòng)物模型作為實(shí)驗(yàn)假說和臨床假說二者的試驗(yàn)基礎(chǔ)。普陀區(qū)心血管疾病疾病動(dòng)物模型建模
呼吸系統(tǒng)H01代碼下分為18個(gè)小類,筆者瀏覽近五年面上項(xiàng)目,大致篩選出各個(gè)代碼下常見的研究方向或疾?。ó吘怪皇侨斯ずY選,準(zhǔn)確性欠佳,敬請(qǐng)諒解)。接下來為大家介紹研究較多的幾個(gè)疾病的常見造模方法,分別為、COPD、急性肺損傷、肺纖維化、肺動(dòng)脈高壓。動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:小鼠、大鼠、豚鼠造模試劑:卵清蛋白(OVA)、HDM(塵螨)獲得方式:一般自己構(gòu)建。在造模過程先采用抗原致敏(腹腔注射OVA和氫氧化鋁混合物或者鼻內(nèi)滴入HDM)使動(dòng)物機(jī)體內(nèi)存在致敏物,然后氣道局部激發(fā)(反復(fù)霧化或者滴鼻激發(fā)),誘導(dǎo)。蘇州纖維化疾病動(dòng)物模型建模上海東寰提供動(dòng)物模型構(gòu)建過程中的原始實(shí)驗(yàn)記錄及數(shù)據(jù)圖片。
該模型能夠幫助我們研究pirb基因在免疫系統(tǒng)和神經(jīng)系統(tǒng)的功能以及下游的調(diào)節(jié)機(jī)制。本發(fā)明的另一目的在于提供上述小鼠動(dòng)物模型的構(gòu)建方法。本發(fā)明所采用的第一種技術(shù)方案是:pirb基因敲入的小鼠動(dòng)物模型,包括確定pirb基因的待敲入的特異性靶位點(diǎn)grna1和grna2,將pirb基因敲入c57bl/6j小鼠的rosa26基因的內(nèi)含子1內(nèi),所述grna1的基因序列如seqid**所示,grna2的基因序列如。本發(fā)明所采用的第二種技術(shù)方案為:pirb基因敲入的小鼠動(dòng)物模型的構(gòu)建方法,具體按照以下步驟實(shí)施:步驟1、基于crispr/cas9技術(shù)構(gòu)建針對(duì)c57bl/6j小鼠rosa26基因的特異性grna1和grna2,grna1的基因序列如seqid**所示,grna2的基因序列如;步驟2、構(gòu)建“cagpromoter-loxp-stop-loxp-kozak-mousepirbcds-polya”基因盒打靶載體,將打靶載體進(jìn)行線性化處理;步驟3、步驟2中將含有l(wèi)oxp位點(diǎn)打靶載體、步驟1中有活性的grna1和grna2與cas9蛋白共同注射進(jìn)入**小鼠受精卵中,獲得f0代小鼠;步驟4、將步驟3中性成熟的陽性f0小鼠分別與野生型鼠交配繁一代,獲得f1代雜合子小鼠,通過pcr、測序和southern雜交確定動(dòng)物基因型;步驟5、將步驟4獲得的f1代雜合子小鼠近交獲得f2代純合子小鼠。
實(shí)驗(yàn)期間每天進(jìn)行陰道涂片,觀測動(dòng)情周期變化。進(jìn)一步地,檢測***水平是指:檢測雌***(e2)、促卵泡生長素(fsh)和促黃體生成素(lh)的水平。進(jìn)一步地,檢測對(duì)比卵巢重量是指:比較各組大鼠雙側(cè)卵巢臟器系數(shù)。進(jìn)一步地,陰道涂片是指:采用陰道脫落細(xì)胞涂片法,使用染色劑為亞甲基藍(lán)。本發(fā)明利用順鉑成功地建立了大鼠卵巢早衰模型,為基礎(chǔ)研究建立穩(wěn)定的卵巢早衰動(dòng)物模型奠定了良好的基礎(chǔ)。本發(fā)明使用的各種術(shù)語和短語具有本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的一般含義。提及的術(shù)語和短語如有與公知含義不一致的,以本發(fā)明所表述的含義為準(zhǔn)。歡迎致電咨詢疾病動(dòng)物模型建模。
可以對(duì)本發(fā)明進(jìn)行各種變化和修飾。本發(fā)明對(duì)試驗(yàn)中所使用到的材料以及試驗(yàn)方法進(jìn)行一般性和/或具體的描述。雖然為實(shí)現(xiàn)本發(fā)明目的所使用的許多材料和操作方法是本領(lǐng)域公知的,但是本發(fā)明仍然在此作盡可能詳細(xì)描述。下述實(shí)施例中所涉及的儀器、試劑、材料等,若無特別說明,均為現(xiàn)有技術(shù)中已有的常規(guī)儀器、試劑、材料等,可通過正規(guī)商業(yè)途徑獲得。下述實(shí)施例中所涉及的實(shí)驗(yàn)方法,檢測方法等,若無特別說明,均為現(xiàn)有技術(shù)中已有的常規(guī)實(shí)驗(yàn)方法,檢測方法等。實(shí)施例1:建立大鼠卵巢早衰模型步驟如下:將%氯化鈉溶液50ml加入規(guī)格為10mg的醫(yī)用順鉑(齊魯制藥,批號(hào):aa1a8029a)中,配制成2mg/kg順鉑注射液,按照10ml/kg連續(xù)腹腔注射7天。實(shí)施例2:建立大鼠卵巢早衰模型步驟如下:將%氯化鈉溶液(齊魯制藥,批號(hào):aa1a8029a)中,配制成3mg/kg順鉑注射液,按照10ml/kg連續(xù)腹腔注射7天。疾病動(dòng)物模型建模價(jià)格。金山區(qū)咨詢疾病動(dòng)物模型建模
動(dòng)物疾病模型的另一個(gè)富有成效的用途。普陀區(qū)心血管疾病疾病動(dòng)物模型建模
具體實(shí)施方式下面結(jié)合附圖和具體實(shí)施方式對(duì)發(fā)明作進(jìn)一步闡述。本發(fā)明構(gòu)建了pirb基因敲入的小鼠動(dòng)物模型,將pirb基因敲入c57bl/6j小鼠的rosa26基因的內(nèi)含子1內(nèi)。具體來說,構(gòu)建一個(gè)cagpromoter-loxp-stop-loxp-kozak-mousepirbcds-polya的基因盒,將其克隆進(jìn)入rosa26基因的內(nèi)含子1中。rosa26基因(ncbireferencesequence:)位于小鼠的七號(hào)染色體。本發(fā)明pirb基因敲入的小鼠動(dòng)物模型的構(gòu)建方法,具體按照以下步驟具體實(shí)施:步驟1、根據(jù)小鼠rosa26基因(genebank:))序列,利用cas-desigher軟件在1號(hào)內(nèi)含子設(shè)計(jì)grna靶序列,并搜索小鼠dbm-db基因組數(shù)據(jù)庫基因,采用crispr脫靶效應(yīng)軟件cas-offinder檢測潛在的脫靶位點(diǎn):**終選取兩個(gè)grna,grna1的基因序列如seqid**所示,grna2的基因序列如:seqid**:ggcaggcttaaaggctaacctgg將grna1和grna2分別與trancrrna在25℃孵育10min形成二級(jí)結(jié)構(gòu);步驟2、利用c57bl/6小鼠文庫bac克隆,通過pcr擴(kuò)增獲得pirb基因cds的同源臂,采用in-fusion方法構(gòu)建含有cagpromoter-loxp-stop-loxp-kozak-mousepirbcds-polya的基因盒的質(zhì)粒打靶載體,通過酶切、pcr及測序?qū)Υ虬匈|(zhì)粒載體進(jìn)行驗(yàn)證,圖1為構(gòu)建好的pirb基因打靶載體的示意圖。普陀區(qū)心血管疾病疾病動(dòng)物模型建模
上海東寰生物科技有限公司是以提供原代細(xì)胞,細(xì)胞增殖與凋亡,細(xì)胞檢測試劑盒,動(dòng)物疾病模型內(nèi)的多項(xiàng)綜合服務(wù),為消費(fèi)者多方位提供原代細(xì)胞,細(xì)胞增殖與凋亡,細(xì)胞檢測試劑盒,動(dòng)物疾病模型,公司位于上海市嘉定區(qū)興賢路1180號(hào)5幢2樓206室,成立于2015-09-24,迄今已經(jīng)成長為商務(wù)服務(wù)行業(yè)內(nèi)同類型企業(yè)的佼佼者。公司承擔(dān)并建設(shè)完成商務(wù)服務(wù)多項(xiàng)重點(diǎn)項(xiàng)目,取得了明顯的社會(huì)和經(jīng)濟(jì)效益。產(chǎn)品已銷往多個(gè)國家和地區(qū),被國內(nèi)外眾多企業(yè)和客戶所認(rèn)可。