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來源: 發(fā)布時間:2023-09-06

但該方法由于有放射性污染并且很難實現(xiàn)單細胞檢測而受到很大的限制,隨后逐漸被基于抗體檢測的BrdU(bromo-deoxyuridine)法所替代。BrdU法步驟繁多,且需要使用BrdU抗體,影響因素較多,穩(wěn)定性比較差。并且由于BrdU法需要使用抗體,有時會和其它目的蛋白基于抗體的檢測相互產(chǎn)生干擾。EdU法基于EdU摻入和后續(xù)的點擊反應(yīng),無需使用抗體、操作便捷、檢測靈敏度高,是一種在BrdU法基礎(chǔ)上升級換代的新方法,將會逐步取代BrdU法。MTT法(C0009)、WST-1法(C0035、C0036)、CCK-8法(C0037、C0038、C0039、C0040、C0041、C0042、C0043、C0046)和CellTiter-Lumi?化學(xué)發(fā)光法(C0065、C0068)都是基于細胞活性的細胞增殖檢測方法,能檢測到細胞的總體增殖效果,但無法檢測到單個的增殖細胞。上海東寰與您分享EdU細胞增殖檢測試劑盒的重要性。江西口碑好的EdU細胞增殖檢測試劑盒供應(yīng)商

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EdU是一種胸腺嘧啶核苷類似物,分子量很小,在動物體內(nèi)能夠迅速擴散到各種組織和中,并滲入正在復(fù)制的DNA分子,通過基于Apollo®熒光染料與EdU的特異性反應(yīng)即可簡單、快速、準(zhǔn)確地檢測出細胞增殖情況。與BrdU檢測方法相比,EdU檢測方法用量小得多,十分之一的用量即可獲得與BrdU檢測試劑盒相同甚至更好的檢測結(jié)果,而且小分子化學(xué)反應(yīng)檢測方法反應(yīng)快,效率高,反應(yīng)時間需幾分鐘,不需要DNA變性、蛋白酶處理、抗原抗體過夜孵育,能夠更好地保護細胞形態(tài),更簡單、更靈敏、更快速、更準(zhǔn)確。哪家公司提供EdU細胞增殖檢測試劑盒原理EdU細胞增殖檢測試劑盒,有哪些好處值得選擇?

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細胞增殖是生活細胞的重要生理功能之一,是生物體的重要生命特征。細胞的增殖是生物體生長、發(fā)育、繁殖以及遺傳的基礎(chǔ)。方式:真核生物的分裂依據(jù)過程不同有三種方式,有有絲分裂,無絲分裂,減數(shù)分裂。其中有絲分裂是人、動物、植物、等一切真核生物中的一種為普遍的分裂方式,是真核細胞增殖的主要方式。減數(shù)分裂是生殖細胞形成時的一種特殊的有絲分裂。多細胞生物,以細胞分裂的方式產(chǎn)生新的細胞,用來補充體內(nèi)衰老或死亡的細胞

可通過CellProliferationELISA,BrdU(比色法.)或CellProliferationELISA,BrdU(發(fā)光法)進行細胞群落中DNA合成測定(BrdUbased)。優(yōu)點是:實驗結(jié)果同增殖細胞數(shù)目緊密相關(guān),可一步完成細胞的溫和固定和變性,操作方便穩(wěn)定,不破壞細胞形態(tài)。5-Bromo-2′-dULabeling/DetectionKitI(熒光法)或KitII(AP)可使用試劑盒提供的BrdU單抗,以及酶或熒光偶聯(lián)二抗,檢測單細胞水平的DNA合成(BrdUbased)。前者通過免疫熒光檢測,后者通過熒光顯微鏡檢測。優(yōu)點是:使用核酸酶變性DNA,在不傷害細胞完整性的情況下使抗體結(jié)合BrdU。上海哪家EdU細胞增殖檢測試劑盒值得信賴?

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上海東寰生物科技有限公司細胞的固定和通透(a)每孔加入150ul4%多聚甲醛細胞固定液,室溫培養(yǎng)30分鐘,棄固定液;(b)毎孔加入150ul2mg/ml甘氨酸,搖床孵育5分鐘,以中和過量的多聚甲醛;(c)棄甘氨酸溶液,每孔加入300ulPBS洗液,室溫清洗5分鐘;(d)每孔加入300ul0.5%TritonX-100細胞通透液,室溫通透10分鐘,棄細胞通透溶液;(e)每孔加入300ulPBS洗液,室溫清洗5分鐘;該產(chǎn)品是采用成像檢測方法對貼壁細胞進行檢測,適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。EdU細胞增殖檢測試劑盒哪家好?上海東寰告訴您!湖北哪家公司提供EdU細胞增殖檢測試劑盒說明書

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BrdU法和BeyoClick?EdU法檢測原理的比較。A.BrdU法需使用大分子的BrdU抗體,由于空間位阻,雙鏈DNA須變性后才能使BrdU抗體與BrdU結(jié)合。法使用小分子標(biāo)記的疊氮化物(Azide),無需DNA變性,操作更便捷,兼容性好,檢測結(jié)果更加穩(wěn)定可靠。本試劑盒檢測快速。相對于BrdU法,本試劑盒采用BeyoClick?EdU法檢測新合成的DNA,所需時間縮短。經(jīng)本試劑盒處理后,增殖的細胞呈棕色,可以用普通光學(xué)顯微鏡進行觀察。HeLa細胞用本試劑盒檢測細胞增殖的效果參見圖3。圖3.HeLa細胞用本試劑盒檢測細胞增殖的效果圖。無EdU組觀察不到棕色染色(左側(cè)一列);EdU(10μM)孵育2小時組有明顯的棕色染色(中間一列);而用10mM的DNA合成抑制劑羥基脲(Hydroxyurea)提前預(yù)處理0.5小時后,棕色染色減弱,說明DNA合成被抑制后,EdU的摻入被抑制(右側(cè)一列)。江西口碑好的EdU細胞增殖檢測試劑盒供應(yīng)商