通過基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應(yīng)，把熒光集團(tuán)標(biāo)記到新合成的含有EdU的DNA上面，這樣就可以進(jìn)行高效快速的檢測出DNA復(fù)制活性，廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)等方面的研究。EdU標(biāo)記(a)將細(xì)胞完全培養(yǎng)基中按照500:1的比例加入EdU溶液，制成2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基；(b)提前將2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基預(yù)熱，然后等體積加入到細(xì)胞原有培養(yǎng)基中，獲得lxEdU溶液，其中EdU的終濃度為10uM；注：1)我們不建議替換全部培養(yǎng)基，因為這樣可能會影響細(xì)胞增殖的速度；2)配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配，用量以沒過細(xì)胞為宜；(c)每孔加入300ul含EdU培養(yǎng)基孵育細(xì)胞2小時，棄培養(yǎng)基；注：1)培養(yǎng)時間取決于細(xì)胞的增殖速度和生長狀態(tài)；2)大多數(shù)**細(xì)胞以及粘附細(xì)胞系均可采用2小時的孵育時間(d)以lxPBS清洗細(xì)胞兩次，毎次5分鐘，以除去未摻入DNA的EdU殘留。注：貼壁不牢的細(xì)胞可降低清洗強(qiáng)度。EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒生產(chǎn)廠家。浙江哪一家EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒哪家好

    試劑盒以外自備試劑和儀器：●PBS●純水●1%乙酸●移液器及吸頭●有515nm波長的酶標(biāo)儀使用方法：使用注意事項：●接種時注意細(xì)胞懸液一定要混勻，以避免細(xì)胞沉淀下來，導(dǎo)致每孔中的細(xì)胞數(shù)量不等，可以每接種幾個孔就混勻一下。培養(yǎng)板周圍一圈孔培養(yǎng)基容易揮發(fā)，為了減少誤差，建議培養(yǎng)板的四邊每孔只加培養(yǎng)基，而不作為指標(biāo)檢測孔。●培養(yǎng)時間根據(jù)細(xì)胞種類的不同和每孔內(nèi)細(xì)胞數(shù)量的多少而異。●用水或乙酸洗細(xì)胞時充滿孔后保持一會倒掉即可，也可以用排或洗板機(jī)。●OD值在1-2之間較好。以96孔板為例：1．取出培養(yǎng)好待測的96孔板。2．在培養(yǎng)基表面小心加入50μl固定液(懸浮細(xì)胞加100μl固定液)，靜置5分鐘后放入4℃冰箱30分鐘-1小時。(貼壁細(xì)胞可棄培養(yǎng)基后加入用水3倍稀釋的固定液；懸浮細(xì)胞必須直接加入固定液，輕加在培養(yǎng)液面，靜置5分鐘后再將平板移至4℃放置1小時，可使懸浮細(xì)胞固定在培養(yǎng)孔底部)。 江西哪家公司提供EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒優(yōu)勢使用EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒到底有什么好處？

本試劑盒可以檢測到細(xì)胞或組織樣品中單個的增殖細(xì)胞，同時也可以對細(xì)胞或組織樣品總體的細(xì)胞增殖情況進(jìn)行定量檢測。本試劑盒可以檢測培養(yǎng)的細(xì)胞或組織樣品，也可以檢測組織切片，但均需提前進(jìn)行EdU的摻入。細(xì)胞增殖能力的檢測是評估細(xì)胞活性、基因毒性和抗藥物效果等的基本方法。公認(rèn)的精確的檢測細(xì)胞增殖的方法是直接檢測細(xì)胞中DNA的合成。初使用的通過檢測DNA合成來檢測細(xì)胞增殖的方法是放射性標(biāo)記核苷摻入法，如氚標(biāo)記胸腺嘧啶脫氧核苷([3H]thymidine)摻入法。

本試劑盒包含EdU法檢測所需要的所有組份，同時提供了藍(lán)色細(xì)胞核染料Hoechst33342，可以用來復(fù)染所有細(xì)胞核，也可用于細(xì)胞周期分析。使用本試劑盒所做結(jié)果可以用熒光顯微鏡、激光共聚焦顯微鏡、流式細(xì)胞儀或熒光酶標(biāo)儀進(jìn)行檢測，也可以用于高內(nèi)涵篩選(High-Content Screening, HCS)。對6孔板培養(yǎng)的細(xì)胞（每孔500μl的Click反應(yīng)液）、96孔板培養(yǎng)的細(xì)胞（每孔50μl的Click反應(yīng)液）、每管細(xì)胞數(shù)量為10-100萬的流式細(xì)胞儀檢測（每管500μl的Click反應(yīng)液）以及冰凍或石蠟切片的檢測（每個樣品100-200μl的Click反應(yīng)液）EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒哪家好？上海東寰告訴您！

EdU細(xì)胞增殖檢測和BrdU細(xì)胞增殖檢測的對比。小分子化合物AndyFluor?azide與EdU之間的點擊化學(xué)(ClickChemistry)反應(yīng)不需要DNA變性，就可以進(jìn)行高效快速的細(xì)胞增殖檢測分析，該反應(yīng)不受雙鏈DNA中堿基對的影響，因此客戶了BrdU摻入法的弊端。圖2.使用EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒對細(xì)胞和組織的染色效果。使用10μMEdU處理A549細(xì)胞2小時，然后分別使用AndyFluor?488azide(綠色,上圖)、AndyFluor?594azide(紅色,中間圖)檢測細(xì)胞增殖活性，使用DAPI進(jìn)行復(fù)染（藍(lán)色）。腹腔注射EdU到小鼠體內(nèi)（每公斤小鼠注射5mgEdU），分別于0、12、24小時之后取小鼠腸組織，制成切片用AndyFluor?488azide(綠色,**下圖)檢測細(xì)胞的增殖情況，使用DAPI進(jìn)行復(fù)染（藍(lán)色）。上海東寰向您介紹EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒的好處。北京品質(zhì)好的EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒評價

EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒使用時要考慮什么問題？浙江哪一家EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒哪家好

EdU檢測方法更快速、更靈敏、更準(zhǔn)確。EdU檢測染料只有BrdU抗體大小的1/500，在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散，無需DNA變性（酸解、熱解、酶解等）即可有效檢測，可有效避免樣品損傷，在細(xì)胞和組織水平能更準(zhǔn)確地反映細(xì)胞增殖等現(xiàn)象。EdU染色(a)通過用10:1去離子水稀釋10x反應(yīng)緩沖液進(jìn)行配制1xEdU反應(yīng)緩沖液；(b)按照溶解200mg緩沖添加劑溶于1ml去離子水的比例稱取適量的粉末進(jìn)行溶解，即為可用的緩沖添加劑的濃度，建議現(xiàn)用現(xiàn)配；注：緩沖添加劑為白色粉末，較難準(zhǔn)確稱量，稱量范圍可稍微放寬，但是不應(yīng)超過±20%，且該粉末較易氧化，使用后請旋緊管蓋，如試劑出現(xiàn)棕黃色，則需報廢或更換浙江哪一家EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒哪家好